Pieter K. Wierenga1, Ellen Weersing1, Bert Dontje1, Gerald de Haan1, Ronald P. van Os1
1Stem Cell Biology, University of Groningen, University Medical Center Groningen, Groningen, Netherlands
Tóm tắt
Thông tin tóm tắt
Các phân tử dính đã được liên kết với các tương tác của tế bào gốc và tế bào tổ chức huyết học với chất nền ngoại bào tủy xương và các tế bào stroma. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã xem xét vai trò của kháng nguyên cực muộn-5 (VLA-5) trong quá trình di động và định cư của tế bào gốc sau khi ghép tế bào gốc. Trong tủy xương (BM) bình thường từ chuột CBA/H, 79±3% các tế bào trong phần âm dòng biểu hiện VLA-5. Sau khi di động với cyclophosphamide/G-CSF, số lượng tế bào biểu hiện VLA-5 trong tế bào máu ngoại vi được di động (MPB) giảm xuống còn 36±4%. Phần âm dòng của các tế bào MPB di chuyển trong ống nghiệm hướng đến SDF-1α (M-MPB) cho thấy sự giảm thêm xuống còn 3±1% các tế bào biểu hiện VLA-5. Những dữ liệu này cho thấy khả năng điều chỉnh giảm VLA-5 trên các tế bào huyết học trong quá trình di động. Tiếp theo, các tế bào MPB được đánh dấu bằng PKH67-GL và được ghép vào các đối tượng nhận chiếu xạ chết người. Ba giờ sau khi ghép, một sự gia tăng trong số lượng tế bào biểu hiện VLA-5 đã được quan sát và duy trì ổn định cho đến 24 giờ sau ghép. Khi sử dụng các tế bào MPB, tỷ lệ tế bào PKH-67GL+ Lin− VLA-5+ tăng từ 36% lên 88±4%. Trong trường hợp các tế bào M-MPB, số lượng này tăng từ 3% lên 33±5%. Mặc dù sự gia tăng này có thể liên quan đến việc điều chỉnh tăng VLA-5, chúng tôi không thể loại trừ khả năng định cư có chọn lọc của các tế bào VLA-5+ như một giả thuyết. Hơn nữa, chúng tôi đã xác định tỷ lệ các tế bào biểu hiện VLA-5 ngay sau khi ghép trong máu ngoại vi của các đối tượng nhận và không quan sát thấy bất kỳ sự gia tăng nào trong các tế bào VLA-5+ trong ba giờ đầu sau ghép. Cuối cùng, chúng tôi đã tách các tế bào MPB ra thành tế bào VLA-5+ và tế bào VLA-5− và nuôi cấy các tế bào này trong các xét nghiệm clonogenic cho tiền thân (CFU-GM) và tế bào gốc (CAFC-day35). Có thể chứng minh rằng 98.8±0.5% các tế bào tiền thân và 99.4±0.7% các tế bào gốc có mặt trong phần VLA-5+. Do đó, VLA-5 không bị điều chỉnh giảm trong quá trình di động và sự gia tăng quan sát thấy trong số lượng tế bào biểu hiện VLA-5 sau ghép thực sự là do sự định cư có chọn lọc của các tế bào VLA-5+. Để làm rõ hơn vai trò của VLA-5 trong quá trình định cư, các tế bào BM và MPB đã được điều trị bằng một kháng thể chống lại VLA-5. Sau khi chặn VLA-5 trên các tế bào MPB, một sự ức chế 59±7% trong việc định cư của các tế bào tiền thân trong tủy xương đã được tìm thấy, trong khi việc định cư của các tiểu thể này trong lách của các đối tượng nhận chỉ bị ức chế 11±4%. Đối với các tế bào BM, một sự ức chế 60±12% trong tủy xương đã được quan sát. Định cư của các tế bào BM ở lách không bị ảnh hưởng chút nào sau khi chặn VLA-5. Dựa trên những dữ liệu này, chúng tôi kết luận rằng việc di động của các tế bào gốc/tế bào tiền thân huyết học không đi kèm với việc điều chỉnh giảm VLA-5. Sự gia tăng quan sát thấy trong các tế bào biểu hiện VLA-5 sau ghép là do sự định cư có ưu tiên của các tế bào VLA-5+. Việc định cư của các tế bào tiền thân/tế bào gốc đến tủy xương sau khi ghép dường như cần các tương tác dính mà có thể bị ức chế bằng cách chặn biểu hiện VLA-5. Việc định cư đến lách dường như không phụ thuộc vào việc biểu hiện VLA-5. Những dữ liệu này cho thấy các con đường dính khác nhau trong quá trình định cư đến tủy xương hoặc lách.
