Phát triển một panel các thể hỗn hợp tế bào soma đơn sắc để định vị gene nhanh chóng
Tóm tắt
Chúng tôi đã lắp ráp một panel các thể hỗn hợp tế bào soma đơn sắc để sử dụng trong việc định vị gene. DNA từ mỗi thể hỗn hợp cá thể đã được sử dụng làm phương tiện trên các kỳ phân bào người bình thường để xác định nhiễm sắc thể người và bất kỳ mảnh ghép nhiễm sắc thể nào thông qua kỹ thuật đảo màu. Để kiểm tra hiệu quả của panel, quá trình khuếch đại PCR DNA từ panel các thể hỗn hợp tế bào soma đơn sắc đã được thực hiện kết hợp với các mồi oligonucleotide đặc hiệu cho người nhằm chỉ định α‐catenin (CTNNA1) và p21/WAFl cho nhiễm sắc thể 5 và 6 tương ứng. Những gene này đã được định vị rõ hơn bằng cách sử dụng các thể hỗn hợp chứa các chuyển vị đặc hiệu tới vùng 5qll‐qter và 6p21. Chúng tôi cũng đã phát triển các mồi để cho phép chúng tôi chỉ định 17 EST đã được giải trình tự bởi Trung tâm Tài nguyên HGMP. Panel hỗn hợp này được phát triển với sự hỗ trợ của HGMP Vương quốc Anh và DNA có sẵn cho tất cả các người dùng đã đăng ký.
Từ khóa
Tài liệu tham khảo
Carlock L. R., 1985, Deletion mapping of humanchromosome 5 using chromosome specific DNA probes., Am. J. hum. Genet., 37, 839
Fisher J. H., 1987, The coding sequence for the 32,000‐dalton pulmonary surfactant‐associated protein A is located on chromosome 10 and identifies two separate restriction‐fragment‐length polymorphisms., Am. J. Hum. Genet., 40, 503
MacGeogh C., 1991, Strategies for amplification of human Tp53 gene sequences., Technique, 3, 179