Phát triển phương pháp xác định và phân loại gen của vi khuẩn Pasteurella multocida và Mannheimia haemolytica bằng cách sử dụng phản ứng chuỗi polymerase và phân tích phát sinh loài của các chủng vi khuẩn được phân lập từ gia súc

Allerton Press - Tập 31 - Trang 75-81 - 2016
A. V. Nefedchenko1, A. N. Shikov2, A. G. Glotov1, T. I. Glotova1, V. A. Ternovoy2, A. P. Agafonov2, A. N. Sergeev2, N. A. Donchenko1
1Institute of Experimental Veterinary of Siberia and the Far East, Federal State Budget Scientific Institution, Novosibirsk, Russia
2Vektor State Science Center for Virology and Biotechnology, Federal Budget Institution of Sciences, Novosibirsk, Russia

Tóm tắt

Kết quả phát triển phương pháp xác định và phân loại gen của vi khuẩn Pasteurella multocida thuộc năm nhóm nang và vi khuẩn Mannheimia haemolytica A 1, sử dụng phản ứng chuỗi polymerase đa trình tự (PCR) với phát hiện bằng điện di được báo cáo. Độ nhạy chẩn đoán của phương pháp phát triển đạt tới 103 CFU/mL trong các nghiên cứu nuôi cấy tinh khiết và 105 CFU/g trong các nghiên cứu vật liệu sinh học. Phân tích cho thấy 50% P. multocida và 11,2% M. haemolytica trong tất cả 260 mẫu vật liệu sinh học được thử nghiệm từ các động vật bị nhiễm. Sự lưu hành của vi khuẩn P. multocida thuộc nhóm nang B và E trong số các động vật nhạy cảm chưa được xác định. Vi khuẩn nhóm A được phát hiện trong phần lớn các mẫu; vi khuẩn nhóm D hiếm khi được xác định; trong một trường hợp, vi khuẩn nhóm F đã được phát hiện. Sự lưu hành của vi khuẩn P. multocida nhóm nang A thuộc hai loại di truyền đã được xác định bằng cách sử dụng phân tích phát sinh loài.

Từ khóa

#Pasteurella multocida #Mannheimia haemolytica #phản ứng chuỗi polymerase #phân tích phát sinh loài #vi khuẩn #nuôi cấy vi khuẩn

Tài liệu tham khảo

Frank, G.H., Bacteria as etiologic agents in bovine respiratory disease, in Bovine Respiratory Disease, Loan, R.W., Ed., College Station, TX: Texas A & M University Press, 1984, pp. 342–362. Griffin, D., Chengappa, M.M., Kuszak, J., and McVey, D.S., Bacterial pathogens of the bovine respiratory disease complex, Vet. Clin. North Am.: Food Anim. Pract., 2010, vol. 26, pp. 381–394. Shegidevich, E.A., Role of pasteurella in respiratory pathology of sheep and bovines, Doctoral Sci. (Vet.) Dissertation, Moscow, 1993. Glotov, A.G., Petrova, O.G., Glotova, T.I., Nefedchenko, A.V., Tatarchuk, A.T., Koteneva, S.V., et al., Spread of viral bovine respiratory diseases, Veterinariya, 2002, no. 3, pp. 17–21. Glotov, A.G., Glotova, T.I., Nefedchenko, A.V., Koteneva, S.V., Budulov, N.R., and Kungurtseva, O.V., The etiological structure of calves’ mass respiratory diseases in farms producing milk, Sib. Vestn. S-kh. Nauki, 2008, no. 3, pp. 72–78. Griffin, D., Bovine pasteurellosis and other bacterial infections of the respiratory tract, Vet. Clin. North Am.: Food Anim. Pract., 2010, vol. 26, pp. 57–71. Dabo, S.M., Taylor, J.D., and Confer, A.W., Pasteurella multocida and bovine respiratory disease, Anim. Health Res. Rev., 2007, vol. 8, pp. 129–150. Hemorrhagic septicemia, in Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals (Mammals, Birds and Bees), vol. 1, chap. 2.4.14: 2012, pp. 732–745. Wilkie, I.W., Harper, M., Boyce, J.D., and Adler, B., Pasteurella multocida: diseases and pathogenesis, Curr. Top. Microbiol. Immunol., 2012, vol. 361, pp. 1–22. Katsuda, K., Kamiyama, M., Kohmoto, M., Kawashima, K., Tsunemitsu, H., and Eguchi, M., Serotyping of Mannheimia haemolytica isolates from bovine pneumonia: 1987–2006, Vet. J., 2012, vol. 178, pp. 146–148. Terent’yeva, T.E., Glotova, T.I., Glotov, A.G., and Donchenko, N.A., Comparative efficiency of different methods for diagnosticating bovine diseases caused by Pasteurella multocida, Sib. Vestn. S-kh. Nauki, 2014, no. 3, pp. 90–95. Townsend, K.M., Boyce, J.D., Chung, J.Y., Frost, A.J., and Adler, B., Genetic organization of Pasteurella multocida cap loci and development of a multiplex capsular PCR typing system, J. Clin. Microbiol., 2001, vol. 39, pp. 924–929. Guenther, S., Schierack, P., Grobbel, M., Lübke-Becker, A., Wieler, L.H., and Ewers, C., Real-time PCR assay for the detection of species of the genus Mannheimia, J. Microbiol. Methods, 2008, vol. 75, pp. 75–80. Luo, Y., Zeng, Q., Glisson, J.R., Jackwood, M.W., Cheng, I.H., and Wang, C., Sequence analysis of Pasteurella multocida major outer membrane protein (OmpH) and application of synthetic peptides in vaccination of chickens against homologous strain challenge, Vaccine, 1999, vol. 17, pp. 821–831. Singh, R., Tewari, K., Packiriswamy, N., Marla, S., Rao Ingh, V.D.P., and Tewari, R.K., Molecular characterization and computational analysis of the major outer membrane protein (ompH) gene of Pasteurella multocida P52, Vet. Arh., 2011, vol. 81, pp. 211–222. Antony, P.X., Nair, G.K., Jayaprakasan, V., Mini, M., and Aravindakshan, T., Nucleic acid based differentiation of Pasteurella multocida serotypes, Internet J. Vet. Med., 2007, vol. 2, pp. 85–89. Glotov, A.G., Terent’yeva, T.E., Nefedchenko, A.V., Glotova, T.I., Shikov, A.N., and Agafonov, A.P., Heterogeneity of Pasteurella isolated from bovines in dairy units, Veterinariya, 2014, no. 12, pp. 23–26.