Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Phát triển hệ thống chuyển đổi đồng hình cho Aspergillus niger dựa trên gen pyrG
Tóm tắt
Bài báo mô tả sự phát triển của một hệ thống chuyển đổi đồng hình cho Aspergillus niger. Hệ thống này dựa trên việc sử dụng một đột biến thiếu orotidine-5′-phosphate decarboxylase (pyrG) và một vector, pAB4-1, chứa gen pyrG chức năng của A. niger như một dấu hiệu chọn lọc. Sự chuyển đổi của đột biến A. niger pyrG với pAB4-1 đã dẫn đến sự xuất hiện của các biến thể Pyr+ ổn định với tần suất 40 biến thể trên mỗi microgram DNA. Trong 90% số biến thể này, sự tích hợp đã xảy ra tại vị trí pyrG hiện tại, dẫn đến việc thay thế biến dị đột biến bằng biến dị hoang dã (60%) hoặc chèn một hoặc hai bản sao của vector (40%). Đột biến A. niger pyrG cũng có thể được chuyển đổi bằng vector pDJB2 chứa gen pyr4 của Neurospora crassa, với tần suất 2 biến thể trên mỗi microgram DNA. Không phát hiện sự tích hợp tại vị trí pyrG hiện tại với vector này. Vector pAB4-1 cũng có khả năng chuyển đổi một đột biến pyrG của Aspergillus nidulans thành Pyr+. Hệ thống chuyển đổi pyrG đã được sử dụng để giới thiệu một gen không chọn lọc vào A. niger.
Từ khóa
#Aspergillus niger #chuyển đổi đồng hình #gen pyrG #đột biến #vector #Pyr+ #Tài liệu tham khảo
Ballance DJ, Turner G (1985) Development of a high-frequency transforming vector for Aspergillus nidulans. Gene 36:321–331
Ballance DJ, Turner G (1986) Gene cloning in Aspergillus nidulans: isolation of the isocitrate lyase gene (acuD). Mol Gen Genet 202:271–275
Barbesgaard P (1977) Industrial enzymes produced by members of the genus Aspergillus. In: Smith JE, Pateman JA (eds) Genetics and physiology of Aspergillus. Br Myc Soc Symp Series no. 1. Academic Press, London, pp 391–404
Bennet JW (1985) Molds, manufacturing and molecular genetics. In: Timberlake WE (ed) Molecular genetics of filamentous fungi. Alan R. Liss Inc., New York, pp 345–366
Berry DR, Chmiel A, Al Obaidi Z (1977) Citric acid production by Aspergillus niger. In: Smith JE, Pateman JA (eds) Genetics and physiology of Aspergillus. Br Myc Soc Symp Series. no. 1. Academic Press, London, pp 405–426
Boeke JD, LaCroute F, Fink GR (1984) A positive selection for mutants lacking orotidine-5′-phosphate decarboxylase activity in yeast: 5-fluoro-orotic acid resistance. Mol Gen Genet 197:345–346
Boel E, Hjort I, Svensson B, Norris F, Fiil NP (1984) Glucoamylases G1 and G2 from Aspergillus niger are synthesized from two different but closely rated mRNAs. EMBO J 3:1097–1102
Bos CJ (1986) Induced mutation and somatic recombination as tools for genetic analysis and breeding of imperfect fungi. Thesis, Agricultural University, Wageningen, The Netherlands
Buxton FP, Radford A (1983) Cloning of the structural gene for orotidine-5′-phosphate decarboxylase of Neurospora crassa by expression in Escherichia coli. Mol Gen Genet 190:403–405
Buxton FP, Gwynne DI, Davies RW (1985) Transformation of Aspergillus niger using the argB gene of Aspergillus nidulans. Gene 37:207–214
Clutterbuck AJ (1974) Aspergillus nidulans. In: King RC (ed) Handbook of genetics I. Bacteria, bacteriophages and fungi. Plenum Press, New York, pp 447–510
Frischauf AM, Lehrach H, Poustka A, Murray N (1983) Lambda replacement vectors carrying polylinker sequences. J Mol Biol 170:827–842
Johnstone IL, Hughes SG, Clutterbuck AJ (1985) Cloning an Aspergillus nidulans developmentally regulated gene by transformation. EMBO J 4:1307–1311
Kelly MK, Hynes MJ, (1985) Transformation of Aspergillus niger by the amdS gene of Aspergillus nidulans. EMBO J 4:475–479
Lhoas P, (1967) Genetic analysis by means of the parasexual cycle in Aspergillus niger. Genet Res 10:45–61
Maniatis T, Fritsch EF, Sambrook J (1982) Molecular cloning — A laboratory manual. Cold Spring Harbor Laboratory Cold Spring Harbor, New York
Newbury SF, Glazebrook JA, Radford A (1986) Sequence analysis of the pyr-4 (orotidine 5′-P decarboxylase) gene of Neurospora crassa. Gene 43:51–58
Pontecorvo G, Roper JA, Hemmons LM, MacDonald KD, Bufton AWJ (1953) The genetics of Aspergillus nidulans. Adv Genet 5:141–238
Struhl K, Stinchcomb DT, Scherer S, Davies RW (1979) High frequency transformation of yeast: autonomous replication of hybrid DNA molecules. Proc Natl Acad Sci USA 76:1035–1039
Smith JE, Pateman JA (eds) (1977) Genetics and physiology of Aspergillus Br Myc Soc Symp Series no. 1. Academic Press, London
Upshall A (1986) Genetic and molecular characterization of argB+ transformants of A. nidulans. Curr Genet 10:593–599
Van Gorcom RFM, Pouwels PH, Goosen T, Visser J, Van den Broek HWJ, Hammer JE, Timberlake WE, van den Hondel CAMJJ (1985) Expression of an Escherichia coli β-galactosidase fusion gene in Aspergillus nidulans. Gene 40:99–106
Yanisch-Perron C, Vieira J, Messing J (1985) Improved M13 phage cloning vectors and host strains: nucleotide sequences of the M13 mp 18 and pUC19 vectors. Gene 33:103–119
Yelton MM, Hamer JE, Timberlake WE (1984) Transformation of Aspergillus nidulans using a trpC plasmid. Proc Natl Acad Sci USA 81:1470–1474
Yelton MM, Timberlake WE, van den Hondel CAMJJ (1985) A cosmid for selecting genes by complementation in Aspergillus nidulans: selection of developmentally regulated yA locus. Proc Natl Acad Sci USA 82:834–838