Xác định Thiamine trong Bột Lúa Mì Sử Dụng Phương Pháp HPLC-Phát Huỳnh Quang Được Xác Minh và Tối Ưu Trước Bằng Thiết Kế Box–Behnken

Food Analytical Methods - Tập 7 - Trang 828-835 - 2013
Nicolás Michlig1, Franco Van de Velde1,2, Marcelino R. Freyre1, Cecilia M. del H. Bernardi1
1Instituto de Tecnología de Alimentos, Facultad de Ingeniería Química, Universidad Nacional del Litoral, Santa Fe, Argentina
2Consejo Nacional de Investigaciones Científicas Y Técnicas (CONICET), Santa Fe, Argentina

Tóm tắt

Mục đích chính của nghiên cứu này là tối ưu hóa và xác minh một phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao isocratic mới để phân tích thiamine trong bột lúa mì. Thiamine đã được biến đổi thành thiochrome trước đó và được xác định bằng phát hiện huỳnh quang (bước sóng kích thích, 366 nm; bước sóng phát ra, 435 nm). Pha di động bao gồm đệm phosphate (0,02 M) và chất điều chỉnh hữu cơ (methanol 88%; acetonitril 12%). Việc tối ưu hóa được thực hiện bằng cách sử dụng thiết kế Box–Behnken (ba yếu tố ở ba mức) ở đó tỷ lệ chất điều chỉnh hữu cơ (A) thay đổi từ 20 đến 90%, pH của pha di động (B) thay đổi từ 5,8 đến 7,8, và lưu lượng (C) thay đổi từ 0,5 đến 1 mL phút−1 là các biến số được nghiên cứu. Độ rộng đỉnh là phản ứng được nghiên cứu. Các điều kiện sắc ký tối ưu đã được tìm ra để giảm thiểu phản ứng là A = 90%, B = 6,00 và C = 1 mL phút−1. Sử dụng các điều kiện tối ưu, các chiết xuất thiochrome với isobutanol và chiết xuất pha rắn (SPE) sử dụng cartridge hấp phụ styrene-divinylbenzene được so sánh. Việc xác minh phương pháp, với việc sử dụng dung dịch tiêu chuẩn thiamine và cả hai loại tách thiochrome, bao gồm các nghiên cứu về tính tuyến tính, giới hạn phát hiện và định lượng, và các số liệu cảm biến phân tích và định lượng. Phương pháp bổ sung tiêu chuẩn đã được sử dụng để định lượng thiamine trong bột lúa mì. Kết quả độ chính xác tốt đã được thu được từ cả hai phương pháp chiết xuất. Tỷ lệ thu hồi dao động từ 63 đến 65% cho isobutanol và 84 đến 101% cho SPE, bao gồm chiết xuất mẫu, biến đổi thiamine, tinh sạch thiochrome và tách sắc ký. Với việc xem xét tỷ lệ thu hồi SPE tốt hơn đã thu được, độ chính xác chấp nhận được, và tác động kích thích của isobutanol lên mắt và da của người vận hành, SPE sử dụng hấp phụ styrene-divinylbenzene có thể được chọn cho việc phân tích thiamine thường quy trong các mẫu bột lúa mì.

Từ khóa

#HPLC #thiamine #bột lúa mì #chiết xuất pha rắn #phát hiện huỳnh quang

Tài liệu tham khảo

AOAC (1993) Peer-verified methods program. Manual of policies and procedures. Arlington, VA, USA AOAC (1995) Chapter 45: vitamins. In: Deutsch MJ (ed) Official methods of analysis (16th edition). Association of Official Agricultural Chemists, Arlington Arella F, Lahély S, Bourguignon JB, Hasselmann C (1996) Food Chem 56:81 Argentine Public Health Ministry (2013) Article 3. Law 25,630. http://www.anmat.gov.ar/Legislacion/Alimentos/Ley_25630.pdf. Accessed May 2013 Danzer K, Currie LA (1998) IUPAC Pure and Appl Chem 70:993 Fernando SM, Murphy PA (1990) J Agric Food Chem 38:163 Ferreira SLC, Bruns RE (2007) Anal Chim Acta 597:179 Gauch R, Leuenberger U, Müller U, Lebensm Z (1992) Unters Forsch 195:312 Lynch PLM, Young IS (2000) J Chromatogr A 881:267 Maroto A, Boqué R, Riu J, Rius FX (2001) Anal Chim Acta 446:133 Mirza T, Tan HSI (2001) J Pharm Biomed Anal 25:39 Moore JC, Dolan KD (2003) Cereal Chem 80:238 Muñoz de la Peña A, Espinosa Mansilla A, González Gómez D, Olivieri A, Goicochea HC (2003) Anal Chem 75:2640 Ndaw S, Bergaentzlé M, Aoudé-Werner D, Hasselmann C (2000) Food Chem 71:129 Olivieri C, Goicochea H (2007) La calibración en Química Analítica. Ediciones UNL, Santa Fe Ollilainen V, Vahteristo L, Uusi-Rauva A, Varo P, Koivistoinen P, Huttunen J (1993) J Food Comp Anal 6:152 Poel C, Bäckermann S, Ternes W (2009) Meat Science 83:506 Resta D, Brambilla F, Arnoldi A (2012) Food Chem 131:126 San José Rodríguez R, Fernández-Ruiz V, Cámara M, Sánchez-Mata MC (2012) J of Cereal Sci 55:293 Tang X, Cronin DA, Brunton NPJ (2006) J Food Comp Anal 19:831 Van de Velde F, Pirovani ME, Cámara MS, Güemes D, del H. Bernardi CM (2012) Food Anal Meth 5:1097 Ziegler E, Greer EN (1978) Principles of milling. In: Pomeranz Y (ed) Wheat chemistry and technology. American Association of Cereal Chemists, St. Paul