Kunie Saito1, Makoto Hirokawa1, Hiroshi Fukaya1, Yoshinari Kawabata1, AtAtsushi Komatsuda1, JuJunsuke Yamashita2, Ken-Ichi Sawada1
1Division of Hematology, Department of Medicine, Akita University School of Medicine, Akita, Japan
2Radioisotope Division, Bioscience center, Akita University School of Medicine, Akita, Japan
Tóm tắt
Tóm tắt
Thông tin nền. Thrombopoietin (TPO) và yếu tố hoại tử khối u-α (TNF-α) duy trì sự phân loại và sự sinh sản của các tế bào CD34+ thành các tế bào đuôi gai (DC) trong sự hiện diện của các cytokine tác động đa dạng. Do đó, chúng tôi giả định rằng việc kích thích các tế bào CD34+ của con người bằng TPO và TNF-α có thể đồng phát triển các tiền chất tiểu cầu và DC, điều này có thể liên quan đến sự khởi phát sự dung nạp miễn dịch và tự miễn trong quá trình tiểu cầu sinh ra. Nguyên liệu và phương pháp. Các tế bào CD34+ của người đã được tinh chế cao được nuôi cấy trong pha lỏng với TPO, có hoặc không có TNF-α, và được kích thích để trải qua sự phân loại tiểu cầu. Chúng tôi đếm số lượng các tế bào tiền chất tiểu cầu bằng các đánh dấu đặc hiệu CD41, CD42b và CD61, và DC bằng CD4, CD11c, CD80, CD83, CD86 và CD123. Những đặc điểm và vai trò của các tế bào không tiểu cầu đồng phát triển trong sự hiện diện của TNF-α được phân tích bằng cách sử dụng máy phân loại tế bào kích thích huỳnh quang, miễn dịch hóa tế bào bằng enzym, kính hiển vi quang học quang phác và phản ứng tế bào lympho hỗn hợp tự thân (AMLR). Kết quả. Khi các tế bào CD34+ được nuôi cấy trong 7 ngày trong sự hiện diện của TPO với nồng độ 100 ng/ml, các tế bào tạo ra chủ yếu biểu hiện CD41 (95±2%), CD42b (54±12%) và CD61 (96±2%), trong khi hiếm khi biểu hiện CD11c (1.6±1.3%), CD80 (0.1±0.1%), CD83 (0.8±0.6%) hoặc CD86 (3.3±1.9%). Ngược lại, việc bổ sung TNF-α với nồng độ 100 ng/ml đã làm giảm đáng kể số lượng tế bào biểu hiện CD41 (3.0±0.6%), CD42b (3.3±1.0%) hoặc CD61 (3.2±0.9%), nhưng không làm ảnh hưởng đến số lượng tổng thể của các tế bào. Trong sự hiện diện của TNF-α, các tế bào tạo ra biểu hiện HLA lớp I (100%) và HLA lớp II (100%), và một số lượng đáng kể các tế bào trở thành dương tính với CD11c (37±1%), thậm chí các phân tử đồng kích thích như CD80 (2.4±1.9%), CD83 (8±4%) và CD86 (18±7%). TNF-α gây ra sự chết tế bào ở các tế bào tiểu cầu. CD11c+ DC chưa trưởng thành liên kết vật lý với các tế bào chết và CD61+, và có khả năng nội bào hóa các tế bào CD61+. Tất cả các tế bào CD11c+ đều đồng biểu hiện c-mpl, CD4 và CD123, và khoảng một nửa các tế bào CD11c+ đồng biểu hiện CD86. Các tế bào được tạo ra bởi TNF-α và TPO (DC: TPO+TNF-α) kích thích sự phát triển của tế bào T tự thân trong thử nghiệm AMLR, tuy nhiên, các tế bào được tạo ra chỉ bởi TNF-α (DC: TNF-α) thì không (Hình 1A). Phân tích miễn dịch kiểu hình của cả hai quần thể cho thấy sự biểu hiện cao hơn của các phân tử đồng kích thích như CD80, CD83 và CD86 trong các tế bào được tạo ra bởi TNF-α và TPO (Hình 1B). Kết luận. Các tế bào không tiểu cầu đồng sinh từ các tế bào CD34+ của người trong quá trình phân loại tiểu cầu trong sự hiện diện của TPO và TNF-α thể hiện các kiểu hình DC. Tập hợp DC CD4+/CD11c+/CD123+ liên kết vật lý và chọn lọc với các tế bào tiểu cầu chưa trưởng thành đang phát triển và sau đó tiếp nhận và bắt giữ các chất tự thân và có chức năng trong AMLR. Những phát hiện này cho thấy rằng các DC được tạo ra từ các tế bào CD34+ của người dưới tác động đồng kích thích tiểu cầu và viêm có vai trò chức năng và có thể dẫn đến việc trình diện kháng nguyên để kích thích miễn dịch hoặc dung nạp đối với các tế bào tiểu cầu và/hoặc tiểu cầu.
