Chiết Xuất Chloroform Cúc Mũi Cầy Thúc Đẩy Sự Tiếp Nhận Glucose Qua Đường AMPK/GLUT4 Trong Các Tế Bào L6

Số lượng bệnh nhân mắc bệnh tiểu đường loại 2 (T2DM) đang tăng nhanh chóng trên toàn cầu. Protein vận chuyển glucose 4 (GLUT4) là một trong những protein chính vận chuyển glucose trong máu vào các tế bào và là mục tiêu trong điều trị T2DM. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã điều tra cơ chế hoạt động của chiết xuất chloroform từ cúc mũi cầy (DCE) đối với sự tiếp nhận glucose trong các tế bào L6. Mức tiêu thụ glucose của dịch nuôi cấy tế bào L6 được đo bằng bộ dụng cụ thử nghiệm hấp thu glucose, và những thay đổi động lực học của GLUT4 nội bào và nồng độ canxi (Ca²⁺) được theo dõi bằng kính hiển vi huỳnh quang quét laser trong các dòng tế bào L6 có biểu hiện IRAP-mOrange ổn định. Sự hợp nhất của GLUT4 với màng tế bào (PM) được theo dõi qua myc-GLUT4-mOrange. Sự biểu hiện GLUT4 và các protein kinase như AMPK, protein kinase B (PKB/Akt), protein kinase C (PKC), và mức độ phosphoryl hóa được xác định bằng phương pháp western blot. Sự biểu hiện mRNA của GLUT4 được phát hiện bằng phương pháp PCR thời gian thực. DCE đã làm tăng mức biểu hiện GLUT4, thúc đẩy translocation GLUT4 và sự hợp nhất với màng tế bào cuối cùng dẫn đến quá trình tiếp nhận glucose, đồng thời kích thích phosphoryl hóa AMPK trong các tế bào L6. Hợp chất ức chế AMPK, C, đã ức chế đáng kể mức biểu hiện và translocation GLUT4 do DCE gây ra, trong khi không quan sát thấy tác dụng ức chế nào từ ức chế phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) Wortmannin và ức chế PKC Gö6983. Những dữ liệu này cho thấy rằng DCE thúc đẩy mức biểu hiện GLUT4 và vận chuyển đến màng tế bào qua con đường tín hiệu AMPK, từ đó kích thích sự hợp nhất GLUT4 với PM để tăng cường sự tiếp nhận glucose trong các tế bào L6. Translocation GLUT4 do DCE gây ra cũng được phát hiện là độc lập với Ca²⁺. Tóm lại, những phát hiện này chỉ ra rằng DCE có thể là một tác nhân hạ đường huyết mới để điều trị T2DM.