Sự tương quan giữa kiểu gen kháng thuốc được xác định bằng các phương pháp multiplex PCR và các mẫu nhạy cảm kháng sinh của Staphylococcus aureus và Staphylococcus epidermidis

Antimicrobial Agents and Chemotherapy - Tập 44 Số 2 - Trang 231-238 - 2000
Francis Martineau1,2, François J. Picard1, Nicolas Lansac1,2, Christian Ménard1, Paul H. Roy1,3, Marc Ouellette1,2, Michel G. Bergeron1,2
1Centre de Recherche en Infectiologie de l'Université Laval,1
2Division de Microbiologie,2 Faculté de Médecine, Université Laval, Québec G1V 4G2, and
3Département de Biochimie, Université Laval, Québec G1K 7P4,3 Canada

Tóm tắt

TÓM TẮT

Các chủng phân lập lâm sàng của Staphylococcus aureus (tổng cộng 206) và S. epidermidis (tổng cộng 188) từ nhiều quốc gia đã được thử nghiệm bằng các phương pháp PCR đa dạng để phát hiện các gen kháng sinh có liên quan lâm sàng liên quan đến staphylococci. Các gen mục tiêu liên quan đến khả năng kháng lại oxacillin ( mecA ), gentamicin [ aac (6′)- aph (2")], và erythromycin ( ermA , ermB , ermC , và msrA ). Chúng tôi đã tìm thấy sự tương quan gần như hoàn hảo giữa phân tích genotyp và phenotyp cho hầu hết 394 chủng này, cho thấy các mối tương quan sau đây: 98% đối với kháng thuốc oxacillin, 100% đối với kháng thuốc gentamicin, và 98.5% đối với kháng thuốc erythromycin. Các kết quả không nhất quán là (i) tám chủng được xác định dương tính bằng PCR cho mecA hoặc ermC nhưng nhạy cảm với kháng sinh tương ứng dựa trên khuếch tán đĩa và (ii) sáu chủng của S. aureus được xác định âm tính bằng PCR cho mecA hoặc cho bốn gen kháng thuốc erythromycin được lựa chọn nhưng lại kháng với kháng sinh tương ứng. Để chứng minh in vitro rằng tám chủng nhạy cảm mang gen kháng thuốc có thể trở nên kháng thuốc, chúng tôi đã cấy lại các chủng nhạy cảm trên môi trường với các gradient tăng dần của kháng sinh. Chúng tôi đã có thể chọn lọc các tế bào thể hiện kiểu hình kháng thuốc cho tất cả tám chủng này mang gen kháng dựa trên khuếch tán đĩa và xác định MIC. Bốn chủng kháng oxacillin âm tính với mecA đã dương tính với PCR cho blaZ và có kiểu hình của những người sản xuất β-lactamase siêu, điều này giải thích kiểu hình kháng oxacillin ở ngưỡng của chúng. Kháng erythromycin cho hai chủng được xác định âm tính bằng PCR có thể liên quan đến một cơ chế mới. Nghiên cứu này nhấn mạnh sự hữu ích của các xét nghiệm dựa trên DNA để phát hiện các gen kháng thuốc kháng sinh liên quan đến nhiễm trùng staphylococcal.

Từ khóa

#Staphylococcus aureus #Staphylococcus epidermidis #kháng thuốc #gen #multiplex PCR

Tài liệu tham khảo

10.1128/AAC.38.3.447

Baron E. J. Genetic aspects of methicillin resistance in Staphylococcus aureus and methods used for its detection in clinical laboratories in the United States. J. Chemother. 7 (Suppl. 3) 1995 87 92

Barski P. Piechowicz L. Galinski J. Kur J. Rapid assay for detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus using multiplex PCR. Mol. Cell. Probes 10 1996 471 475

10.1007/BF01833867

10.1128/JCM.36.8.2169-2172.1998

10.1111/j.1699-0463.1993.tb00165.x

10.1056/NEJM198905043201806

Busch-Sorensen C. Frimodt-Moller N. Miller G. H. Espersen F. Aminoglycoside resistance among Danish blood culture isolates of coagulase-negative staphylococci. APMIS 104 1996 873 880

Carlton B. C. Brown B. J. Antibiotic resistance (gradient plate) Manual of methods for general bacteriology. Gerhardt P. Murray R. Costillow R. Nester E. Wood W. Krieg N. Briggs Phillips G. 1981 229 230 American Society for Microbiology Washington D.C.

Catchpole I. Thomas C. Davies A. Dykes K. G. H. The nucleotide sequence of Staphylococcus aureus plasmid pT48 conferring inducible resistance and comparison with similar plasmids expressing constitutive resistance. J. Gen. Microbiol. 134 1988 697 709

10.1128/CMR.10.4.781

Chomarat M. Espinouse D. Flandrois J. P. Coagulase-negative staphylococci emerging during teicoplanin therapy and problems in the determination of their sensitivity. J. Antimicrob. Chemother. 27 1991 475 480

10.1128/AAC.41.12.2719

Cloney L. Marlowe C. Wong A. Chow R. Bryan R. Rapid detection of mecA in methicillin resistant Staphylococcus aureus using cycling probe technology. Mol. Cell. Probes 13 1999 191 197

10.1093/jac/33.1.7

Dornbusch K. Miller G. H. Hare R. S. Shaw K. J. Resistance to aminoglycoside antibiotics in gram-negative bacilli and staphylococci isolated from blood. Report from a European collaborative study. The ESGAR study group (European Study Group on Antibiotic Resistance). J. Antimicrob. Chemother. 26 1990 131 144

10.1128/AAC.43.7.1631

10.1093/jac/31.2.211

10.1128/jcm.32.7.1768-1772.1994

10.1128/AAC.35.6.1147

10.1128/jcm.31.10.2683-2688.1993

10.1128/AAC.36.12.2617

10.1128/AAC.31.6.883

Kaatz G. W. Seo S. M. Dorman N. J. Lerner S. A. Emergence of teicoplanin resistance during therapy of Staphylococcus aureus endocarditis. J. Infect. Dis. 162 1990 103 108

Khan S. A. Novick R. P. Terminal nucleotide sequences of Tn551, a transposon specifying erythromycin resistance in Staphylococcus aureus: homology with Tn3. Plasmid 4 1980 148 154

10.1128/CMR.7.1.117

Kobayashi N. Taniguchi K. Kojima K. Urasawa S. Uehara N. Omizu Y. Kishi Y. Yagihashi A. Kurokawa I. Watanabe N. Genomic diversity of mec regulator genes in methicillin-resistant Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis. Epidemiol. Infect. 117 1996 289 295

10.1128/JCM.36.9.2640-2644.1998

10.1128/AAC.40.12.2680

10.1128/jb.166.2.479-483.1986

Lovering A. M. Bywater M. J. Holt H. A. Champion H. M. Reeves D. S. Resistance of bacterial pathogens to four aminoglycosides and six other antibacterials and prevalence of aminoglycosides modifying enzymes. J. Antimicrob. Chemother. 22 1988 823 839

Madsen O. R. Lorentzen J. S. Frimodt-Moller N. Mortensen I. Rosdahl V. T. Mechanisms of aminoglycoside resistance in Danish Staphylococcus aureus strains during the years 1979–1987. APMIS 99 1991 537 540

Manquat G. Croizé J. Stahl J. P. Meyran M. Hirtz P. Micoud M. Failure of teicoplanin treatment associated with an increase in MIC during therapy of Staphylococcus aureus septicaemia. J. Antimicrob. Chemother. 29 1992 731 732

10.1128/JCM.36.3.618-623.1998

10.1128/jcm.34.12.2888-2893.1996

10.1128/jcm.29.10.2240-2244.1991

10.1128/jb.162.2.633-640.1985

National Committee for Clinical Laboratory Standards Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aerobically. Approved standard M7-A2. 1990 National Committee for Clinical Laboratory Standards Villanova Pa

National Committee for Clinical Laboratory Standards Performance standards for antimicrobial disk susceptibility tests. Approved standard M2-4A. 1990 National Committee for Clinical Laboratory Standards Villanova Pa

10.1128/jb.178.18.5464-5471.1996

Petersson A. C. Miorner H. Kamme C. Identification of mecA-related oxacillin resistance in staphylococci by the E test and the broth microdilution method. J. Antimicrob. Chemother. 37 1996 445 456

10.1128/CMR.1.3.281

10.1128/AAC.42.7.1762

10.1128/AAC.35.12.2568

Price K. E. Kresel P. A. Farchione L. A. Siskin S. B. Karpow S. A. Epidemiological studies of aminoglycoside resistance in the U.S.A. J. Antimicrob. Chemother. 8 (Suppl. A) 1981 89 105

10.1128/jcm.32.7.1830-1832.1994

10.1016/0378-1119(94)00833-E

10.1111/j.1365-2958.1990.tb00696.x

Rouch D. A. Byrne M. E. Kong Y. C. Skurray R. A. The aacA-aphD gentamicin and kanamycin resistance determinant of Tn4001 from Staphylococcus aureus: expression and nucleotide sequence analysis. J. Gen. Microbiol. 133 1987 3039 3052

10.1093/clinids/19.2.231

Salisbury S. M. Sabatini L. M. Spiegel C. A. Identification of methicillin-resistant staphylococci by multiplex polymerase chain reaction. Am. J. Clin. Pathol. 107 1997 368 373

10.1128/AAC.42.2.257

10.1128/mr.57.1.138-163.1993

Sheagren J. N. Staphylococcus aureus: the persistent pathogen. N. Engl. J. Med. 310 1984 1368 1442

10.1128/AAC.40.11.2562

10.1128/AAC.37.6.1219

Szybalski W. Microbial selection. I. Gradient plate technique for study of bacterial resistance. Science 116 1952 46 48

10.1128/AAC.31.5.735

10.1128/jcm.30.7.1685-1691.1992

10.1128/AAC.38.2.345

10.1099/00222615-41-4-282

10.1128/jcm.33.11.2864-2867.1995

10.1128/AAC.39.3.577

10.1111/j.1699-0463.1995.tb01099.x

10.1128/AAC.39.2.369

Williams J. G. Kubelik A. R. Livak K. J. Rafalski J. A. Tingey S. V. DNA polymorphisms amplified by arbitrary primers are useful as genetic markers. Nucleic Acids Res. 25 1990 6531 6535

Thông tin
Thông tin xuất bản

Antimicrobial Agents and Chemotherapy

Tập 44 Số 2

231-238

Thông tin tác giả