Đặc điểm của sự gắn kết [125I]‐endothelin‐1 và [125I]‐BQ3020 với thụ thể endothelin ở tiểu não chuột

British Journal of Pharmacology - Tập 118 Số 8 - Trang 2126-2130 - 1996
P.S. Widdowson1,2, C.N.P. Kirk2
1Endocrinology and Diabetes Research Group, University Department of Medicine, Royal Liverpool University Hospital, Liverpool L69 3BX.
2Neurotoxicology Research Group, ZENECA Central Toxicology Laboratory, Alderley Park, Macclesfield, Cheshire SK10 4TJ

Tóm tắt

Chúng tôi đã thực hiện các thí nghiệm gắn kết radioligand trên đồng nhất tiểu não chuột bằng cách sử dụng [125I]‐endothelin‐1 ([125I]‐ET‐1) và [125I]‐BQ3020 để khảo sát dược lý của các thụ thể endothelin trong não chuột. Các thí nghiệm bão hòa đã cho thấy sự hiện diện của một nhóm trang gắn kết duy nhất với độ ái lực cao đối với cả hai radioligand ([125I]‐ET‐1, pKd = 8.94 ± 0.17; [125I]‐BQ3020, pKd = 9.18 ± 0.14 nM; trung bình ± s.e.mean). Tuy nhiên, [125I]‐BQ3020 chỉ nhận diện khoảng một phần ba số lượng thụ thể endothelin được đo bằng [125I]‐ET‐1. Các thí nghiệm gắn kết bão hòa với [125I]‐PD151242 cho thấy sự gắn kết có độ ái lực cao với một nhóm thụ thể ETA trong đồng nhất tiểu não (pKd = 9.95 ± 0.14; Bmax = 30 ± 15 fmol mg−1 protein). Các thí nghiệm cạnh tranh đã được thực hiện với các ligand không chọn lọc hoặc chọn lọc cho các loại thụ thể endothelin. Thụ thể endothelin chuột trong tiểu não có độ ái lực cao đối với endothelin‐1 (ET‐1), endothelin‐3 (ET‐3) và sarafotoxin‐S6c (STX‐6c), mặc dù độ ái lực đối với ET‐3 cao hơn một chút so với ET‐1 khi sử dụng cả hai radioligand. Các chất đối kháng chọn lọc ETA, BQ123, BMS‐182,874 và JKC‐301 đều có độ ái lực thấp tại các thụ thể endothelin. Ngược lại, các chất kích thích chọn lọc ETB, IRL1620 và [Ala1,3,11,15]ET‐1 và đối kháng chọn lọc ETB, BQ‐788 có độ ái lực trung bình tại thụ thể endothelin, trong khoảng nanomolar thấp. Chất kích thích ETB, BQ3020, có độ ái lực cao gấp khoảng 10 lần so với IRL1620 và [Ala1,3,11,15]ET‐1 tại thụ thể endothelin chuột tiểu não. Các chất đối kháng không chọn lọc, Ro‐46,2005, Ro‐47,0203 và PD‐142,893 có độ ái lực trung bình tại thụ thể tiểu não. Bởi vì [125I]‐BQ3020 chỉ nhận diện một phần nhỏ trong số các vùng gắn kết của [125I]‐ET‐1, hầu hết các thụ thể endothelin trong tiểu não không thể được xếp loại là ETB. Mặc dù [125I]‐PD151242 đã có thể phát hiện các thụ thể ETA trong các đồng nhất tiểu não chuột, nhóm nhỏ các thụ thể ETA (chiếm 2% tổng số thụ thể endothelin như đo được bằng [125I]‐ET‐1) không thể giải thích cho nhóm thụ thể không phải ETB. Chúng tôi kết luận rằng thụ thể tiểu não chuột có đặc điểm tương tự như thụ thể ETB1 vì nó có độ ái lực cao đối với ET‐1, ET‐3, STX‐6c và nhạy cảm vừa phải với PD‐142,893. Tuy nhiên, vì các ligand ETB BQ‐788, IRL1620 và [Ala1,3,11,15]ET‐1 chỉ có độ ái lực trung bình đối với thụ thể endothelin tiểu não chuột và do ET‐3 có độ ái lực cao hơn so với ET‐1, kết quả của chúng tôi gợi ý rằng tiểu não chuột chủ yếu chứa các thụ thể ETC.

Từ khóa


Tài liệu tham khảo

10.1038/348730a0

10.1016/0165-6147(94)90159-7

10.1016/0006-291X(91)90979-H

10.1016/0014-5793(93)81713-A

10.1111/j.1476-5381.1994.tb13218.x

10.1038/365759a0

CLOZEL M., 1994, Pharmacological characterization of bosentan, a new potent orally active nonpeptide endothelin receptor antagonist, J. Pharmacol. Exp. Ther., 270, 228

10.1111/j.1476-5381.1995.tb13241.x

10.1016/0014-5793(90)81388-5

10.1016/0028-3908(92)90174-N

HAGIWARA H., 1993, Immunochemical characterization and localization of endothelin ETB receptor, Am. J. Physiol., 264, R777

10.1073/pnas.86.8.2863

10.1073/pnas.91.11.4892

10.1016/0006-8993(94)91148-7

KARNE S., 1993, Cloning and characterization of an endothelin‐3 specific receptor (ETC receptor) from Xenopus Laevis dermal melanophores, J. Biol. Chem., 268, 19126, 10.1016/S0021-9258(17)46743-3

10.1073/pnas.88.8.3185

10.1073/pnas.87.6.2359

MASAKI T., 1994, International union of pharmacology nomenclature of endothelin receptors, Pharmacol. Rev., 46, 137

10.1016/0143-4179(90)90062-4

NAMBI P., 1994, Species differences in the binding characteristics of [125I]IRL‐1620, a potent agonist specific for endothelin‐B receptors, J. Pharmacol. Exp. Ther., 268, 202

NANDASOMA U., 1994, Localisation of endothelin ETA receptors in rat brain using [125I]PD151242, Br. J. Pharmacol., 113, 156P

PATEL S., 1996, [3H]epibatidine: a novel high affinity ligand at neuronal nicotinic acetylcholine receptors, Br. J. Pharmacol.

10.1016/0006-291X(91)91367-L

10.1038/348732a0

10.1021/bi00235a028

10.1016/0006-291X(89)92718-6

TANAKA T., 1994, RES‐701–1, a novel, potent, endothelin type B receptor selective antagonist of microbial origin, Mol. Pharmacol., 45, 724

10.1111/j.1476-5381.1993.tb13879.x

10.1097/00005344-199322008-00032

10.1016/0196-9781(95)00050-T

10.1016/0006-291X(91)91601-8

YAMAMOTO T., 1994, Analysis of the role of endothelin‐A and endothelin‐B receptors on nociceptive information transmission in the spinal cord with FR139317, an endothelin‐A receptor antagonist and sarafotoxin S6c, an endothelin‐B receptor agonist, J. Pharmacol. Exp. Ther., 27, 156

10.1073/pnas.85.18.6964

10.1016/0165-6147(89)90011-4

10.1111/j.1476-5381.1995.tb13262.x

Thông tin
Thông tin xuất bản

British Journal of Pharmacology

Tập 118 Số 8

2126-2130

Thông tin tác giả