Protein kinase phụ thuộc canxi được định vị cùng với F‐actin trong tế bào thực vật

Wiley - Tập 12 Số 1 - Trang 12-22 - 1989
Cindy Putnam‐Evans1, Alice Harmon1, Barry A. Palevitz2, Marcus Fechheimer3, Milton J. Cormier1
1Department of Biochemistry, University of Georgia, Athens
2Department of Botany, University of Georgia, Athens
3Department of Zoology, University of Georgia, Athens

Tóm tắt

Tóm tắt

Chúng tôi gần đây đã tinh chế một protein kinase (CDPK) phụ thuộc canxi nhưng không phụ thuộc vào calmodulin và phospholipid từ các tế bào thực vật nuôi cấy (Harmon et al.: Plant Physiology 83:830–837, 1987). Một kháng thể đơn dòng (mAb 3B9) nhắm vào CDPK được sử dụng để xác định vị trí của protein này trong tế bào gốc của Allium và ống phấn của Tradescantia bằng các kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang. Mẫu nhuộm mAb 3B9 cho thấy CDPK được định vị trong một mạng lưới sợi trong tế bào chất giống như mạng lưới F‐actin trong giai đoạn giữa của chu kỳ tế bào. Việc điều trị mẫu mô với 10 μM cytochalasin D (CD) trước khi cố định đã xóa bỏ mẫu nhuộm. Các thí nghiệm định vị đôi, trong đó ống phấn trước tiên được nhuộm bằng mAb 3B9 và sau đó là rhodamine‐phalloidin (RP), đã chứng minh rằng CDPK và F‐actin có vị trí đồng thời. Kháng thể đơn dòng 3B9 không có phản ứng với actin tinh khiết từ cơ bắp thỏ hoặc Dictyostelium và không liên kết với các protein tương ứng với Mr của actin trong các chiết xuất thô từ đầu rễ của Allium và ống phấn của Tradescantia.

CDPK không phosphoryl hóa actin tinh khiết từ cơ bắp thỏ hoặc Dictyostelium trong vitro. Các nghiên cứu liên kết cho thấy rằng CDPK (1) không lắng đọng cùng với các sợi actin và (2) không hình thành phức hợp với G‐actin. Dữ liệu cho thấy mặc dù CDPK không tương tác trực tiếp với actin, nó có thể liên quan đến một protein liên kết actin và do đó có thể đóng vai trò trong việc điều chỉnh bộ xương tế bào thực vật.

Từ khóa


Tài liệu tham khảo

10.1146/annurev.bi.49.070180.004421

10.1111/j.1432-1033.1985.tb09121.x

10.1083/jcb.105.4.1473

10.1007/BF00397340

10.1007/BF00392436

Gilroy S., 1987, Calcium: A regulation system emerges in plant cells, Development, 100, 181, 10.1242/dev.100.2.181

Goding J. W., 1983, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, 113

Gordon D. J., 1977, Comparative biochemistry of non‐muscle actins, J. Biol. Chem., 252, 8300, 10.1016/S0021-9258(17)40971-9

10.1104/pp.83.4.830

10.1146/annurev.pp.36.060185.002145

10.1146/annurev.pp.32.060181.001225

10.1146/annurev.cb.02.110186.001053

10.1007/BF00390169

10.1111/j.1462-5822.2007.00901.x

10.1007/BF01273723

Lim S.‐S., 1986, Widespread occurrence of anti‐troponin T crossreactive components in non‐muscle cells, J. Cell Sci., 85, 1, 10.1242/jcs.85.1.1

10.1016/0006-291X(80)91175-4

Nagai R., 1979, Ultrastructure of the endoplasmic factor responsible for cytoplasmic streaming in Chara internode cells, J. Cell Sci., 136, 121, 10.1242/jcs.36.1.121

10.1146/annurev.bi.54.070185.004435

10.1007/BF01276785

10.1083/jcb.104.6.1515

10.1002/cm.970090402

10.1007/BF00284885

10.1083/jcb.65.1.29

10.1007/BF01354292

10.3109/10520297109067835

Parke J., 1986, Higher plant myosin heavy‐chain identified using a monoclonal antibody, Eur. J. Cell Biol., 41, 9

10.1002/j.1537-2197.1985.tb08386.x

Perdue T. D., 1985, In situ localization of F‐actin in pollen tubes, Eur. J. Cell Biol., 39, 13

10.1083/jcb.105.3.1355

10.1146/annurev.bi.55.070186.005011

10.1080/07352688709382247

Pratt L. H., 1986, Modern Methods of Plant Analysis, 50

Sahyoun N., 1985, Cytoskeletal calmodulin‐dependent protein kinase, J. Biol. Chem., 260, 1230, 10.1016/S0021-9258(20)71233-0

10.1083/jcb.92.1.79

Schliwa M., 1986, The Cytoskeleton, An Introductory Survey

10.1042/bj2520463

Sellers J. R., 1984, The binding of smooth muscle myosin light chain kinase and phosphatases to actin and myosin, J. Biol. Chem., 259, 7740, 10.1016/S0021-9258(17)42855-9

Sobue K., 1982, Interaction of 135000‐Mr calmodulin‐binding protein (myosin kinase) and f‐actin: Another Ca2+ ‐and calmodulin‐dependent flip‐flop switch, Biochem. Int., 5, 503

10.1016/S0021-9258(18)62016-2

10.1007/BF01276783

10.1146/annurev.cb.01.110185.002033

10.1247/csf.1.165

10.1007/BF01276365

10.1083/jcb.94.1.213

10.1111/j.1751-1097.1978.tb07577.x

10.1007/BF01287638

10.1007/BF01281795

Williamson R. E., 1979, Filaments associated with the endoplasmic reticulum in the streaming cytoplasm of Chara corralina Eur, J. Cell Biol., 20, 177

10.1038/296647a0

10.1007/BF01279748

Thông tin
Thông tin xuất bản

Wiley

Tập 12 Số 1

12-22

Thông tin tác giả