Biểu hiện vi khuẩn của miền tan trong nước của Lynx1, một chất điều biến nội sinh của các thụ thể nicotinic ở người

Russian Journal of Bioorganic Chemistry - Tập 37 - Trang 543-549 - 2011
M. A. Shulepko1, E. N. Lyukmanova1, I. E. Kasheverov1, D. A. Dolgikh1,2, V. I. Tsetlin3, M. P. Kirpichnikov1,2
1Shemyakin–Ovchinnikov Institute of Bioorganic Chemistry, Russian Academy of Sciences, Moscow, Russia
2Moscow State University, Moscow, Russia
3Shemyakin-Ovchinnikov Institute of Bioorganic Chemistry, Russian Academy of Sciences, Moscow, Russia

Tóm tắt

Protein Lynx1 liên kết với màng được biểu hiện trong hệ thần kinh trung ương của con người và đóng vai trò quan trọng trong việc điều chỉnh hoạt động của các thụ thể acetylcholine nicotinic. Trong nghiên cứu hiện tại, ws-Lynx1 mã hóa miền tan trong nước của Lynx1 ở người đã được cô lập và nghiên cứu bằng cách biểu hiện dị hợp chủng trong E. coli. Chỉ có thể thu được protein ws-Lynx1 với số lượng miligam trong các thể inclusion protein tế bào vi khuẩn. Để tối ưu hóa sản lượng protein tái tổ hợp ws-Lynx1, một hệ thống đã được phát triển cho phép thu hồi ws-Lynx1 hoạt động chức năng từ các thể inclusion. Sau khi tái cấu trúc, protein được đặc trưng bởi phổ khối và phổ phân cực vòng. ws-Lynx1 đã được chứng minh là ức chế sự gắn kết của [125I]-α-bungarotoxin vào màng của cơ quan điện của cá đuối Torpedo californica chứa các thụ thể acetylcholine nicotinic kiểu cơ (α12βγδ) theo cách cạnh tranh.

Từ khóa

#Lynx1 #thụ thể acetylcholine nicotinic #protein tái tổ hợp #phổ khối #phổ phân cực vòng #cá đuối Torpedo californica

Tài liệu tham khảo

Miwa, J.M., Ibanez-Tallon, I., Crabtree, G.W., Sánchez, R., Sali, A., Role, L.W., and Heintz, N., Neuron, 1999, vol. 23, pp. 105–114. Tekinay, A.B., Nong, Y., Miwa, J.M., Lieberam, I., Ibanez-Tallon, I., Greengard, P., and Heintz, N., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 2009, vol. 106, pp. 4477–4482. Chimienti, F., Hogg, R.C., Plantard, L., Lehmann, C., Brakch, N., Fischer, J., Huber, M., Bertrand, D., and Hohl, D., Hum. Mol. Genet., 2003, vol. 12, pp. 3017–3024. Tsuji, H., Okamoto, K., Matsuzaka, Y., Iizuka, H., Tamiya, G., and Inoko, H., Genomics, 2003, vol. 81, pp. 26–33. Sekhon, H.S., Song, P., Jia, Y., Lindstrom, J., and Spindel, E.R., Cell Tissue Res., 2005, vol. 320, pp. 287–297. Choo, Y.M., Lee, B.H., Lee, K.S., Kim, B.Y., Li, J., Kim, J.G., Lee, J.H., Sohn, H.D., Nah, S.Y., and Jin, B.R., Neuroscience, 2008, vol. 38, pp. 224–235. Tsetlin, V.I. and Hucho, F., FEBS Lett., 2004, vol. 557, pp. 9–13. Miwa, J.M., Stevens, T.R., King, S.L., Caldarone, B.J., Ibanez-Tallon, I., Xiao, C., Fitzsimonds, R.M., Pavlides, C., Lester, H.A., Picciotto, M.R., and Heintz, N., Neuron, 2006, vol. 51, pp. 587–600. Lyukmanova, E.N., Shulepko, M.A., Shenkarev, Z.O., Dolgikh, D.A., and Kirpichnikov, M.R., Russ. J. Bioorg. Chem., 2010, vol. 36, pp. 137–145. Krabben, L., van Rossum, B.J., Jehle, S., Bocharov, E., Lyukmanova, E.N., Schulga, A.A., Arseniev, A., Hucho, F., and Oschkinat, H., J. Mol. Biol., 2009, vol. 390, pp. 662–671. Lyukmanova, E.N., Shenkarev, Z.O., Schulga, A.A., Ermolyuk, Y.S., Mordvintsev, D.Y., Utkin, Y.N., Shoulepko, M.A., Hogg, R.C., Bertrand, D., Dolgikh, D.A., Tsetlin, V.I., and Kirpichnikov, M.P., J. Biol. Chem., 2007, vol. 282, pp. 24784–24791. Bocharov, E.V., Lyukmanova, E.N., Ermolyuk, Ya.S., Shulga, A.A., Pluzhnikov, K.A., Dolgikh, D.A., Kirpichnikov, M.P., and Arseniev, A.S., Appl. Magn. Reson., 2003, vol. 24, pp. 247–254. Lyukmanova, E.N., Shulepko, M.A., Tikhonov, R.V., Shenkarev, Z.O., Paramonov, A.S., Vul’fson, A.N., Kasheverov, I.E., Ustich, T.L., Utkin, Yu.N., Arsen’ev, A.S., Tsetlin, V.I., Dolgikh, D.A., and Kirpichnikov, M.P., Biokhimiya, 2009, vol. 74, pp. 1400–1409. Wang, Y., Jing, L., and Xu, K., J. Biotechnol., 2002, vol. 94, no. 3, pp. 235–244. Chang, L., Lin, J., Wu, P., Chang, C., and Hong, E., Biochem. Biophys. Res. Commun., 1997, vol. 230, pp. 192–195. Lyukmanova, E.N., Shulga, A.A., Arsenieva, D.A., Pluzhnikov, K.A., Dolgikh, D.A., Arseniev, A.S., and Kirpichnikov, M.P., Russ. J. Bioorg. Chem., 2004, vol. 30, pp. 25–34. Peng, L.S., Zhong, X.F., Huang, Y.S., Zhang, Y., Zheng, S.L., Wei, J.W., Wu, W.Y., and Xu, A.L., Toxicon, 2003, vol. 42, pp. 753–761. Fiordalisi, J.J., al-Rabiee, R., Chiappinelli, V.A., and Grant, G.A., Biochemistry, 1994, vol. 33, pp. 12962–12967. Chen, J., Liu, Y., Wang, Y., Ding, H., and Su, Z., Biotechnol. Prog., 2008, vol. 24, no. 6, pp. 1365–1372. Golovanov, A.P., Hautbergue, G.M., Wilson, S.A., and Lian, L.Y., J. Am. Chem. Soc., 2004, vol. 126, pp. 8933–8939. Provencher, S.W. and Glockner, J., Biochemistry, 1982, vol. 20, pp. 33–37. Kasheverov, I.E., Zhmak, M.N., Fish, A., Rucktooa, R., Khruschov, A.Y., Osipov, A.V., Ziganshin, R.H., D’hoedt, D., Bertrand, D., Sixma, T.K., Smit, A.V., and Tsetlin, V.I., J. Neuroshem., 2009, vol. 111, pp. 934–944.