Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Một thiết bị kích thích kép giá rẻ cho kính hiển vi huỳnh quang
Tóm tắt
Các phân tử chỉ thị nhạy cảm với ion có thể được sử dụng kết hợp với kính hiển vi huỳnh quang trong các tế bào đơn lẻ để đo lường những thay đổi nhanh chóng trong nồng độ nội bào của một số loại ion. Một số đầu dò này (ví dụ như fura-2) yêu cầu khả năng đo cường độ phát xạ tại hai bước sóng kích thích khác nhau để định lượng chính xác nồng độ ion nội bào. Chúng tôi đã phát triển một thiết bị kích thích kép đơn giản cho các ứng dụng như vậy. Thiết bị này chuyển đổi bộ lọc kích thích trong vòng 150 ms. Thiết bị kinh tế này rất phù hợp trong các tình huống mà nồng độ ion cần quan tâm thay đổi tương đối chậm. Hơn nữa, bằng cách đồng bộ hóa hoạt động của thiết bị với một kích thích bên ngoài; những thay đổi ion nhanh chóng và có thể tái lập trong mô có khả năng kích thích cũng có thể được đo lường.
Từ khóa
#ion sensitive indicators #fluorescence microscopy #intracellular ion concentration #dual excitation apparatus #fura-2 #optical filters #ionic changes #excitable tissueTài liệu tham khảo
Grynkiewicz G, Poenie M, Tsien RY (1985) A new generation of Ca2+ indicators with greatly improved fluorescence properties. J Biol Chem 260:3440–3450
Hermsmeyer K, Robinson KB (1977) High sensitivity of cultured cardiac muscle cells to autonomic agents. Am J Physiol 233:C172-C179
Hewett K, Legato MJ, Danilo P Jr, Robinson RB (1983) Isolated myocytes from adult canine left ventricle: Ca2+ tolerance, electrophysiology, and ultrastructure. Am J Physiol 245: H830-H839
Paradiso AM, Tsien RY, Machen TE (1985) Na+-H+ exchange in gastric glands as measured with a cytoplasmic-trapped fluorescent pH indicator. Proc Natl Acad Sci USA 81:7436–7440
Ryan US, Clements E, Habliston D, Ryan JW (1978) Isolation and culture of pulmonary artery endothelial cells. Tissue Cell 10:535–554
Williams DA, Fay FS (1986) Calcium transients and resting levels in isolated smooth muscle cells as monitored with quin 2. Am J Physiol 250:C779-C791