Vai trò thiết yếu của NF-κB trong việc ngăn chặn sự chết tế bào do TNF-α gây ra
Tóm tắt
Các nghiên cứu trên chuột thiếu hụt các tiểu đơn vị của nhân tố phiên mã nhân NF-κB cho thấy nhân tố này rất quan trọng đối với đáp ứng tế bào lympho trước kháng nguyên và trong biểu hiện gen cảm ứng bởi cytokine. Đặc biệt, tiểu đơn vị RelA (p65) là cần thiết để kích hoạt các gen phụ thuộc TNF-α. Xử lý nguyên bào sợi và đại thực bào chuột thiếu RelA (RelA −/−) bằng TNF-α dẫn đến giảm đáng kể khả năng sống sót, trong khi các tế bào RelA +/+ không bị ảnh hưởng. Độc tính tế bào ở cả hai loại tế bào được trung gian bởi thụ thể TNF-1. Việc đưa trở lại RelA vào nguyên bào sợi RelA −/− làm tăng khả năng sống sót, cho thấy sự hiện diện của RelA là cần thiết để bảo vệ khỏi tác động của TNF-α. Những kết quả này có ý nghĩa quan trọng đối với việc điều trị các bệnh viêm và tăng sinh.
Tài liệu tham khảo
Kieran M., et al., ibid.: 1007.
Nolan G. P., Ghosh S., Liou H.-C., Tempst P., Baltimore D., ibid. 649611991.
Beg A. A. Baltimore D. unpublished data.
Fibroblasts were grown in Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) with 10% calf serum. Approximately 200 000 Rel+/+ or Rel−/− embryonic fibroblasts were plated on each well of a six-well plate. Twenty-four hours later mouse or human TNF-α (both from Genzyme) was added for periods indicated in the text after which the cells were trypsinized and viable cells counted by trypan blue exclusion. Mouse TNF-α (10 ng/ml specific activity 5 × 107 U/mg) or hTNF-α (50 ng/ml specific activity 1 × 107 U/mg) was used.
Goodwin R. G., et al., Mol. Cell. Biol. 1130201991.
Macrophages were prepared essentially as described [R. Coico Ed. Current Protocols in Immunology (Wiley New York 1994)] except that fetal liver instead of bone marrow was used. Livers from 14-day Rel+/+ or Rel−/− embryos were disrupted by passage through a syringe and plated overnight in DMEM with 20% fetal bovine serum and 30% of total volume of L929 fibrosarcoma-conditioned media (containing macrophage growth factors) to allow attachment of adherent cells. Cells present in the supernatant were then plated on a six-well plate. Within 2 days macrophage colonies appeared. Cells obtained in this way are positive for the macrophage-specific marker Mac-1. TNF-α was added when the plates were 50% confluent for periods indicated in the text. After TNF-α treatment cells were treated with Dispase II (Boehringer Mannheim) and scraped from the plates. Viable cells were counted by trypan blue exclusion.
Muzio M., et al., ibid. 858171996.
Boldin M. P., Goncharov T. M., Goltsev Y. V., Wallach D., ibid.: 803.
Wang C.-Y., et al., ibid.: 784.
Auphan N., DiDonato J. A., Rosette C., Helmberg A., Karin M., ibid.: 286.
Kopp E., Ghosh S., ibid. 2659561994.
We thank L. Herzenberg (Stanford University) for the plasmid pON 405 A. Gifford for technical assistance and members of our laboratory for discussions and comments. A.A.B. was supported by a Concern II-Cancer Research Institute Fellowship. D.B. is an American Cancer Society Research Professor. Supported by a grant from the Amgen Corporation.