Phương pháp đơn giản, hiệu quả và toàn diện cho việc chiết xuất DNA gen từ vi khuẩn, nấm men, nấm mốc và vi tảo phù hợp với các ứng dụng dựa trên PCR

Việc chiết xuất DNA gen từ tế bào vi sinh vật đóng vai trò quan trọng trong các ứng dụng dựa trên PCR như chẩn đoán phân tử, phân loại vi sinh vật, sàng lọc các sinh vật biến đổi gen và nhiều ứng dụng khác. Hiện nay, nhiều phương pháp chiết xuất DNA gen từ vi sinh vật đã được phát triển. Tuy nhiên, những phương pháp này thường yêu cầu hóa chất có hại hoặc bao gồm các bước thực hiện tốn thời gian. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã thiết lập một phương pháp chiết xuất DNA gen đơn giản và toàn diện cho các vi sinh vật khác nhau bao gồm vi khuẩn, nấm men, nấm mốc và vi tảo. Phương pháp của chúng tôi không yêu cầu các chất tái kích như phenol và chloroform trong quá trình chiết xuất để giảm thiểu việc sinh ra chất thải nguy hại. Các sản phẩm DNA gen thu được có nồng độ cao và đạt mức độ tinh khiết tốt với tỷ lệ hấp thụ trung bình ở 260 nm/280 nm (A260/280) dao động từ 1,6 đến 2,0. Các phân tử DNA cũng vẫn còn nguyên vẹn khi được phân tích trên gel agarose. Quan trọng hơn, những sản phẩm DNA này đã được chứng minh thông qua việc khuếch đại PCR thành công gen 16S rRNA, spacer nội bộ của rDNA (ITS), hoặc gen 18S rRNA từ bộ gen của vi khuẩn, nấm và vi tảo tương ứng. Hơn nữa, với các sản phẩm DNA gen đã chiết xuất, quá trình xác định trạng thái đơn bội và lưỡng bội của các chủng nấm men Saccharomyces hoặc phát hiện các chủng tiềm tàng của Aspergillus oryzae và Aspergillus flavus đã được phân lập từ nguyên liệu thực phẩm bị nhiễm thông qua các phân tích PCR được thuận lợi. Phương pháp chiết xuất DNA gen được thiết lập trong nghiên cứu này dễ dàng quản lý, tiết kiệm thời gian, chi phí hiệu quả và thân thiện với môi trường.