Một chiến lược cung cấp thức ăn được đề xuất cho việc sản xuất quá mức các protein tái tổ hợp trong Escherichia coli

Biotechnology and Applied Biochemistry - Tập 49 Số 2 - Trang 141-147 - 2008
Valiollah Babaeipour1,2, Seyed Abbas Shojaosadati2, Rasoul Khalilzadeh3, Nader Maghsoudi4, Fatemeh Tabandeh5
1Biochemical Engineering Group, Department of Biotechnology, Malek-Ashtar University of Technology, Tehran, Iran
2Biotechnology Group, Department of Chemical Engineering, Faculty of Engineering, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
3Biochemical Engineering Group, Department of Biotechnology, Malek‐Ashtar University of Technology, Tehran, Iran
4Center of Neuroscience Research, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran
5Department of Bioprocess Engineering, National Institute for Genetic Engineering and Biotechnology (NIGEB), Tehran, Iran

Tóm tắt

Các chiến lược cho ăn khác nhau trong việc sản xuất interferon‐γ của người bằng cách sử dụng hệ thống biểu hiện kích thích bằng isopropyl β‐d‐thiogalactoside trong Escherichia coli BL21(DE3) (plasmid pET3a‐ifnγ) đã được nghiên cứu. Bốn chế độ cung cấp thức ăn theo đợt đã được thiết kế để so sánh ảnh hưởng của μ (tốc độ tăng trưởng riêng) đến sản xuất protein tái tổ hợp, tiêu thụ chất nền, hình thành sản phẩm phụ và độ ổn định của plasmid trong các môi trường nuôi cấy mật độ tế bào cao của E. coli. Kết quả cho thấy Yp/s, sản lượng sản phẩm/chất nền của interferon‐γ bị ảnh hưởng đáng kể bởi μ trong suốt quá trình, nhưng sản lượng sản phẩm/sinh khối (Yp/x) bị ảnh hưởng bởi μ ở giai đoạn trước khi kích thích. Bằng cách áp dụng một chiến lược cung cấp thức ăn hiệu quả, trong đó μ được duy trì ở mức tối đa có thể đạt được, protein tái tổ hợp đã tích lũy tới mức 60% tổng lượng protein tế bào và năng suất của nó đã được tăng lên đáng kể. Trong trường hợp này, tổng năng suất của sinh khối và protein tái tổ hợp lần lượt là 6.36 và 2.1, so với 1.91 và 0.16 g·h−1·lít−1 trong quá trình cho ăn theo hàm mũ, trong đó μ được giữ không đổi trong toàn bộ quá trình.

Từ khóa


Tài liệu tham khảo

10.1016/j.ces.2005.03.031

10.1016/0167-7799(96)80930-9

10.1016/j.biotechadv.2005.04.004

10.1002/(SICI)1097-0290(19960220)49:4<421::AID-BIT9>3.0.CO;2-R

10.1016/S0141-0229(02)00052-2

10.1016/j.procbio.2006.07.009

10.1016/S1369-703X(02)00156-0

10.1021/bp00002a009

10.1016/S0168-1656(99)00157-1

10.1002/bit.10457

10.1002/(SICI)1097-0290(19981105)60:3<271::AID-BIT1>3.0.CO;2-E

10.1016/0168-1656(94)90215-1

Shin C. S., 1997, Biotechnol. Bioeng., 13, 249

10.1007/BF00128620

10.1016/j.procbio.2004.01.058

10.1146/annurev.iy.11.040193.003035

10.1016/S0021-9258(17)39797-1

10.1016/0021-9673(92)85539-6

10.1016/0003-2697(76)90527-3

10.1007/s10295-004-0117-x

10.1093/ajcp/83.6.735

10.1016/0168-1656(94)00143-Z

10.1007/s002530051412

10.1023/B:BILE.0000004390.98648.25

10.1016/j.jbiotec.2005.02.012

10.1007/s00253-004-1814-0

10.1016/j.ymben.2005.06.003

Friehs K., 1993, Biochem. Eng. Adv., 48, 53

10.1016/j.enzmictec.2003.10.011

10.1016/S0168-1656(00)00217-0

10.1002/bit.10645

Thông tin
Thông tin xuất bản

Biotechnology and Applied Biochemistry

Tập 49 Số 2

141-147

Thông tin tác giả