Một yếu tố nhân tế bào được kích thích bởi thiếu oxy thông qua tổng hợp protein mới gắn vào yếu tố tăng cường gen erythropoietin của người tại một vị trí cần thiết cho hoạt hóa phiên mã.

Chúng tôi đã xác định được một yếu tố tăng cường dài 50 nucleotide từ trình tự ngoại vi 3' của gen erythropoietin ở người, có khả năng trung gian cho việc kích thích phiên mã gấp bảy lần khi được nhân bản ở vị trí 3' của gen báo cáo promoter-chloramphenicol acetyltransferase do virus simian 40 điều khiển và được biểu hiện tạm thời trong các tế bào Hep3B. Các nucleotide (nt) từ 1 đến 33 của trình tự này trung gian cho việc kích thích gấp bảy lần biểu hiện gen báo cáo khi có mặt dưới dạng hai bản sao liên tiếp, so với việc kích thích gấp ba lần khi có mặt dưới dạng một bản sao đơn, cho thấy rằng các nt từ 34 đến 50 gắn với một yếu tố làm tăng cường tín hiệu kích thích. Phân tích dấu vết DNase I đã chứng minh sự gắn kết của một yếu tố hạt nhân cấu trúc với các nt từ 26 đến 48. Các nghiên cứu đột biến đã chỉ ra rằng các nt từ 4 đến 12 và từ 19 đến 23 là thiết yếu cho việc kích thích, vì việc thay thế tại bất kỳ vị trí nào đã loại bỏ biểu hiện do thiếu oxy. Các thử nghiệm dịch chuyển di electrophoretic đã xác định một yếu tố hạt nhân gắn với một đầu dò bao gồm các nt từ 1 đến 18 nhưng không gắn với một đầu dò chứa một đột biến đã vô hiệu hóa chức năng tăng cường. Việc gắn kết của yếu tố này đã được kích thích bởi thiếu oxy và sự kích thích này nhạy cảm với điều trị cycloheximide. Chúng tôi đã định nghĩa một yếu tố tăng cường có chức năng ba phần, dài 50 nt, có thể kích thích bởi thiếu oxy và gắn kết với một số yếu tố hạt nhân, một trong số đó được kích thích bởi thiếu oxy thông qua tổng hợp protein mới.