Protein liên hợp maltose‐binding của Escherichia coli có hiệu quả không thường thấy trong việc tăng cường tính tan của các polypeptide mà nó liên hợp

Protein Science - Tập 8 Số 8 - Trang 1668-1674 - 1999
Rachel B. Kapust1, David S. Waugh1
1ABL-Basic Research Program, NCI-Frederick Cancer Research and Development Center, P.O. Box B, Frederick, Maryland 21702–1201

Tóm tắt

Tóm tắt

Mặc dù thông thường có thể đạt được sản lượng protein tái tổ hợp thuận lợi trong Escherichia coli, việc thu nhận protein dưới dạng tan, có hoạt tính sinh học vẫn là một thách thức lớn. Đôi khi vấn đề này có thể được khắc phục bằng cách liên hợp một polypeptide dễ kết tụ với một đối tác có khả năng hòa tan cao. Để nghiên cứu hiện tượng này một cách chi tiết hơn, chúng tôi đã so sánh khả năng của ba đối tác liên hợp hòa tan—protein liên kết maltose (MBP), glutathione S-transferase (GST), và thioredoxin (TRX)—trong việc ức chế sự kết tụ của sáu protein đa dạng thường tích tụ ở dạng không tan. Lạ thay, chúng tôi phát hiện rằng MBP là một tác nhân hòa tan hiệu quả hơn nhiều so với hai đối tác liên hợp còn lại. Hơn nữa, chúng tôi đã chứng minh rằng trong một số trường hợp, việc liên hợp với MBP có thể thúc đẩy sự gấp khúc đúng cách của protein liên kết thành dạng hoạt tính sinh học của nó. Do đó, MBP dường như có khả năng hoạt động như một chất chaperone phân tử chung trong bối cảnh của một protein liên hợp. Một mô hình được đề xuất để giải thích cách mà MBP thúc đẩy tính tan và ảnh hưởng đến sự gấp khúc của các đối tác liên hợp của nó.

Từ khóa


Tài liệu tham khảo

Aoki T, 1998, Purification of recombinant human pepsinogens and their application as immunoassay standards, Biochem Mol Biol Int, 45, 289

10.1093/protein/9.2.231

10.1073/pnas.94.8.3571

10.1073/pnas.86.8.2540

10.1006/jmbi.1996.0524

10.1002/pro.5560050307

10.1111/j.1349-7006.2000.tb00907.x

10.1038/nbt0396-315

10.1002/j.1460-2075.1992.tb05424.x

10.1038/371614a0

10.1006/abio.1996.0335

10.1006/bbrc.1997.6235

10.1038/nbt0293-187

10.1016/S0014-5793(97)00703-5

10.1111/j.1432-1033.1991.tb16132.x

10.1074/jbc.271.9.5059

10.1016/0300-9084(90)90063-M

Miller JH, 1972, Experiments in molecular genetics, 433

10.1002/(SICI)1097-4644(19960601)61:3<325::AID-JCB1>3.0.CO;2-V

10.1016/0167-7799(94)90080-9

10.1006/viro.1995.1331

10.1093/protein/10.6.725

Power RF, 1990, High level expression of a truncated chicken progesterone receptor in Escherichia coli, J Biol Chem, 265, 1419, 10.1016/S0021-9258(19)40031-8

10.1016/0378-1119(92)90691-H

10.1006/prep.1997.0759

10.1006/prep.1996.0078

10.1093/glycob/8.6.633

10.1074/jbc.272.25.15607

Robben J, 1993, Carboxyl terminus is essential for intracellular folding of chloramphenicol acetyltransferase, J Biol Chem, 268, 24555, 10.1016/S0021-9258(19)74502-5

Saavedra‐Alanis VM, 1994, Rat liver mitochondrial processing peptidase: Both alpha‐ and beta‐subunits are required for activity, J Biol Chem, 269, 9284, 10.1016/S0021-9258(17)37105-3

10.1006/prep.1997.0826

10.1006/bbrc.1998.8365

10.1021/bi00180a013

Schein CH, 1989, Production of soluble recombinant proteins in bacteria, BioTechnology, 7, 1141

10.1038/nbt0388-291

10.1038/366704a0

10.1016/S0960-9822(02)70789-6

Spurlino JC, 1991, The 2.3 Å resolution structure of the maltose‐ or maltodextrin‐binding protein, a primary receptor of bacterial active transport and chemotaxis, J Biol Chem, 266, 5202, 10.1016/S0021-9258(19)67774-4

Studier FW, 1991, Use of T7 RNA polymerase to direct expression of cloned genes, Methods Enzymol, 185, 60, 10.1016/0076-6879(90)85008-C

Thomas S, 1996, Expression of recombinant rat myo‐inositol 1,4,5‐triphosphate 3‐kinase B suggests a regulatory role for its N‐terminus, Biochem J, 319, 713, 10.1042/bj3190713

10.1016/0958-1669(92)90164-E

10.1016/0378-1119(83)90025-2

10.1096/fasebj.7.10.8393818

10.1021/bi00205a010

10.1093/nar/24.22.4592

10.1006/prep.1997.0834

Thông tin
Thông tin xuất bản

Protein Science

Tập 8 Số 8

1668-1674

Thông tin tác giả