Rt pcr là gì? Các công bố khoa học về Rt pcr

RT-PCR (Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction) là một phương pháp di truyền phân tử được sử dụng để nhân đôi và phân tích một đoạn cụ thể của RNA trong mẫu. Phương pháp này thường được sử dụng để phát hiện và xác định sự hiện diện của vi rút hoặc gen cụ thể trong mẫu sinh phẩm. RT-PCR được sử dụng rộng rãi trong lĩnh vực y học, chẩn đoán bệnh, nghiên cứu di truyền và nhiều lĩnh vực khác.
RT-PCR là một kỹ thuật phân tử sinh học được sử dụng để phát hiện và nhân bản các đoạn RNA cụ thể trong mẫu. Phương pháp này kết hợp giữa một bước đảo ngược transcripsion (reverse transcription) để chuyển đổi RNA thành DNA một một tên gọi khác là cDNA (complementary DNA) và sau đó sử dụng phương pháp polymerase chain reaction (PCR) để nhân bản DNA này.

Quá trình RT-PCR bao gồm các bước chính như sau:

1. Reverse Transcription (RT): Trước tiên, enzyme đảo ngược transcripsion (reverse transcriptase) được sử dụng để chuyển đổi RNA thành cDNA. Một đoạn oligonucleotide ngược (primer) được thêm vào để bắt đầu quá trình transcripsion. RT xảy ra trong một ống nhiệt độ đã được điều chỉnh để cung cấp các điều kiện lý tưởng cho reverse transcriptase hoạt động.

2. PCR: Sau khi cDNA được tạo ra, phương pháp PCR được sử dụng để nhân bản DNA nhằm tăng lượng đoạn DNA mong muốn lên. PCR bao gồm các chu kỳ nhiệt đới kéo dài, mỗi chu kỳ bao gồm các bước gia nhiệt để tách các một đúng nhân đôi (denaturation), một bước gia nhiệt để các primer được gắn vào mỗi sợi mẫu (annealing), và một bước gia nhiệt để enzyme polymerase sao chép đoạn DNA (extension). Quá trình tổng cộng này được lặp lại nhiều lần để tạo ra hàng triệu bản sao của DNA mục tiêu.

3. Phân tích kết quả: Khi quá trình PCR hoàn tất, sản phẩm nhân bản có thể được phân tích bằng cách sử dụng các phương pháp như gel điện phoresis, qPCR (quantitative PCR), sequencing, hoặc sử dụng các công cụ phân tích khác.

RT-PCR là một công cụ mạnh mẽ trong nghiên cứu gen và di truyền, y tế và chẩn đoán bệnh. Nó được sử dụng để phát hiện và xác định sự hiện diện của RNA từ một loại vi rút cụ thể, như vi rút SARS-CoV-2 gây ra COVID-19, hoặc để theo dõi mức độ biểu hiện gen trong mẫu sinh phẩm.