Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
PCR Glycoprotein Bề Mặt Biến Đổi RoTat 1.2 như Một Công Cụ Chẩn Đoán Cụ Thể Cho Việc Phát Hiện Các Nhiễm Trùng Trypanosoma evansi
Tóm tắt
Dựa trên gen mã hóa cho Trypanosoma evansi (T. evansi) Glycoprotein Bề Mặt Biến Đổi RoTat 1.2 (VSG) mới được giải mã, một cặp mồi đã được thiết kế nhằm mục tiêu vào vùng DNA không có đặc điểm tương đồng với các gen VSG đã biết khác. Tổng cộng 39 giống trypanosome khác nhau đã được thử nghiệm bằng phương pháp phản ứng chuỗi polymerase (PCR) dựa trên RoTat 1.2. PCR này đã tạo ra một sản phẩm dài 205 bp trong tất cả các dòng T. evansi và trong bảy trên chín dòng T. equiperdum được thử nghiệm. Sản phẩm này không được phát hiện trong DNA từ các ký sinh trùng T. b. brucei, T. b. gambiense, T. b. rhodesiense, T. congolense, T. vivax và T. theileri. PCR Rotat 1.2 có thể phát hiện được chỉ với 10 trypanosome cho mỗi phản ứng với DNA tinh chế từ mẫu máu, tức là 50 trypanosome/ml. Việc khuếch đại PCR của gen VSG RoTat 1.2 là một dấu hiệu đặc hiệu cho các giống T. evansi, ngoại trừ giống T. evansi loại B, và đặc biệt hữu ích cho các giống có tính kém di động, nơi mà các dấu hiệu dựa trên kDNA có thể không khuếch đại được. Hơn nữa, dữ liệu của chúng tôi hỗ trợ những gợi ý trước đó rằng một số giống T. evansi đã bị phân loại nhầm là T. equiperdum.
Từ khóa
#Trypanosoma evansi #PCR #Glycoprotein Bề Mặt Biến Đổi #VSG #chẩn đoánTài liệu tham khảo
Hoare CA: The trypanosomes of mammals. 1972, Oxford, Blackwell Scientific Publications, 1-749.
Stephen LE: Trypanosomiasis. A veterinary perspective. Edited by: StephenLE. 1986, Oxford, Pergamon Press
Nantulya VM: Trypanosomiasis in domestic animals: the problems of diagnosis. Rev Sci Tech. 1990, 9: 357-367.
Moser DR, Cook GA, Ochs DE, Bailey CP, McKane MR, Donelson JE: Detection of Trypanosoma congolense and Trypanosoma brucei subspecies by DNA amplification using the polymerase chain reaction. Parasitology. 1989, 99: 57-66.
Wuyts N, Chokesajjawatee N, Panyim S: A simplified and highly sensitivity detection of Trypanosoma evansi by DNA amplification. Southeast Asian J Trop Med Public Health. 1994, 25: 266-271.
Pereira de Almeida PJL, Ndao M, Van Meirvenne N, Geerts S: Diagnostic evaluation of PCR in goats infected with Trypanosoma brucei brucei. Edited by: IAEA. 1997, Vienna, International Symposium on Diagnosis and Control of Livestock Diseases using Nuclear and Related Techniques, 68-
Clausen P-H, Wiemann A, Patzelt R, Kakaire D, Poetzsch C, Peregrine A, Mehlitz D: Use of a PCR assay for the specific and sensitive detection of Trypanosoma spp. in naturally infected dairy cattle in peri-urban Kampala, Uganda. Ann N Y Acad Sci. 1998, 849: 21-31.
Omanwar S, Rao JR, Basagoudanavar SH, Singh RK, Butchaiah G: Direct and sensitive detection of Trypanosoma evansi by polymerase chain reaction. Acta Vet Hung. 1999, 47: 351-359.
Holland WG, Claes F, My LN, Thanh NG, Tam PT, Verloo D, Büscher P, Goddeeris B, Vercruysse J: A comparative evaluation of parasitological tests and a PCR for Trypanosoma evansi diagnosis in experimentally infected water buffaloes. Vet Parasitol. 2001, 97: 23-33. 10.1016/S0304-4017(01)00381-8.
Pereira de Almeida PJL, Ndao M, Goossens B, Osaer S: PCR primer evaluation for the detection of trypanosome DNA in naturally infected goats. Vet Parasitol. 1998, 80: 111-116. 10.1016/S0304-4017(98)00205-2.
Majiwa PAO: DNA probe- and PCR-based methods for the detection of trypanosomes. Twenty-second Meeting of the International Scientific Councel for Trypanosomiasis Research and Control (ISCTRC) . Kampala, Uganda,25-29 October 1993. Edited by: SonesKR. 1995, Nairobi, OAU/STRC, 53-58.
Masiga DK, Gibson WC: Specific probes for Trypanosoma (Trypanozoon) evansi based on kinetoplast DNA minicircles. Mol Biochem Parasitol. 1990, 40: 279-284. 10.1016/0166-6851(90)90049-R.
Artama WT, Agay MW, Donelson JE: DNA comparisons of Trypanosoma evansi (Indonesia) and Trypanosoma brucei spp. Parasitology. 1992, 104: 67-74.
Diall O: Camel trypanosomosis in Mali: contribution to the diagnosis and the epidemiology. 1993, Vrije Universiteit Brussel, 1-91.
Ventura RM, Takeda GF, Silva RAMS, Nunes VLB, Buck GA, Teixeira MMG: Genetic relatedness among Trypanosoma evansi stocks by random amplification of polymorphic DNA and evaluation of a synapomorphic DNA fragment for species-specific diagnosis. Int J Parasitol. 2001, 1-11.
Verloo D, Magnus E, Büscher P: General expression of RoTat 1.2 variable antigen type in Trypanosoma evansi isolates from different origin. Vet Parasitol. 2001, 97: 183-189.
Urakawa T, Verloo D, Moens L, Büscher P, Majiwa PAO: Trypanosoma evansi: cloning and expression in Spodoptera fugiperda insect cells of the diagnostic antigen RoTat 1.2. Exp Parasitol. 2001, 99: 181-189. 10.1006/expr.2001.4670.
Bromidge T, Gibson W, Hudson K, Dukes P: Identification of Trypanosoma brucei gambiense by PCR amplification of variant surface glycoprotein genes. Acta Trop. 1993, 53: 107-119. 10.1016/0001-706X(93)90023-5.
Dukes P, Gibson WC, Gashumba JK, Hudson KM, Bromidge TJ, Kaukus A, Asonganyi T, Magnus E: Absence of the LiTat 1.3 (CATT antigen) gene in Trypanosoma brucei gambiense stocks from Cameroon. Acta Trop. 1992, 51: 123-134. 10.1016/0001-706X(92)90054-2.
Cross M, Taylor MC, Borst P: Frequent loss of the active site during variant surface glycoprotein expression site switching in vitro in Trypanosoma brucei. Mol Cell Biol. 1998, 18: 198-205.
Ngaira JM, Njagi ENM, Ngeranwa JJN, Olembo NK: PCR amplification of RoTat 1.2 VSG gene in Trypanosoma evansi isolates in Kenya. Vet Parasitol. 2004, 120: 23-33. 10.1016/j.vetpar.2003.12.007.
Gibson WC, Wilson AJ, Moloo SK: Characterisation of Trypanosoma (Trypanozoon) evansi from camels in Kenya using isoenzyme electrophoresis. Res Vet Sci. 1983, 34: 114-118.
Borst P, Fase-Fowler F, Gibson WC: Kinetoplast DNA of Trypanosoma evansi. Mol Biochem Parasitol. 1987, 23: 31-38. 10.1016/0166-6851(87)90184-8.
Claes F, Verloo D, De Waal DT, Urakawa T, Majiwa P, Goddeeris BM, Büscher P: Expression of RoTat 1.2 cross-reactive variable antigen type in Trypanosoma evansi and T. equiperdum. Ann N Y Acad Sci. 2002, 969: 174-179.
Claes F, Agbo EC, Radwanska M, te Pas MFW, Baltz T, De Waal DT, Goddeeris BM, Claassen E, Büscher P: How does Trypanosoma equiperdum fit into the Trypanozoon group? A cluster analysis by RAPD and Multiplex-endonuclease genotyping approach. Parasitology. 2003, 126: 425-431. 10.1017/S0031182003002968.
Barrowman PR: Experimental intraspinal Trypanosoma equiperdum infection in a horse. Onderstepoort J Vet Res. 1976, 43: 201-202.
Van Meirvenne N: Immunologische aspekten van de relatie tussen salivaria trypanosomen en de zoogdiergastheer. 1977, Universitaire Instelling Antwerpen, Antwerpen, 1-240.
Baltz T: Etude de la variation antigénique chez Trypanosoma equiperdum. 1982, L'Université de Bordeaux II, Bordeaux, 1-84.
Hagebock JM, Chieves L, Frerichs WM, Miller CD: Evaluation of agar gel immunodiffusion and indirect fluorescent antibody assays as supplemental tests for dourine in equids. Am J Vet Res. 1993, 54: 1201-1208.
Lun Z-R, Allingham R, Brun R, Lanham SM: The isoenzyme characteristics of Trypanosoma evansi and Trypanosoma equiperdum isolated from domestic stocks in China. Ann Trop Med Parasitol. 1992, 86: 333-340.
Cunningham I: New culture medium for maintenance of tsetse tissues and growth of trypanosomatids. J Protozool. 1977, 24: 325-329.
Aerts D, Truc P, Penchenier L, Claes Y, Le Ray D: A kit for in vitro isolation of trypanosomes in the field: first trial with sleeping sickness patients in the Congo Republic. Trans R Soc Trop Med Hyg. 1992, 86: 394-395. 10.1016/0035-9203(92)90234-4.
Lanham SM, Godfrey DG: Isolation of salivarian trypanosomes from man and other mammals using DEAE-cellulose. Exp Parasitol. 1970, 28: 521-534. 10.1016/0014-4894(70)90120-7.