Thích ứng nhiệt của phosphotransferase hygromycin B mesophilic qua tiến hóa hướng đích trong Archaea siêu nhiệt: lựa chọn một dấu hiệu di truyền ổn định cho việc chuyển gen vào Sulfolobus solfataricus

Một phiên bản đột biến của gen phosphotransferase hygromycin B (hph mut ) từ Escherichia coli, được tách lọc qua quá trình tiến hóa hướng đích ở 75°C trong các biến thể của một chủng Sulfolobus solfataricus nhiệt cực, đã được đặc trưng về độ ổn định di truyền cả trong chủng mesophilic nguyên bản và chủng nhiệt cực mới. Gen này được chứng minh có khả năng biểu hiện kiểu hình kháng hygromycin B và duy trì ổn định cũng như được nhân lên trong các chủng S. solfataricus nhiệt cực khác, tức là ở nhiệt độ lên tới 82°C. Hơn nữa, nó có thể được chuyển vào tế bào S. solfataricus qua đồng biến đổi với pKMSD48, một yếu tố ngoài nhiễm sắc thể khác được phân lập từ virus SSV1 của Sulfolobus shibatae, mà không có mất mát độ ổn định và không ảnh hưởng đến khả năng sao chép và lây nhiễm của DNA virus này. Các sản phẩm của gen hph mut và gen тип đã được biểu hiện ở mức cao hơn trong E. coli và được tinh chế bằng sắc ký ái lực đặc hiệu trên hygromycin B đã được cố định. Việc so sánh đặc trưng cho thấy enzyme đột biến đã có khả năng kháng nhiệt đáng kể và thể hiện hoạt động nhiệt cao hơn với hiệu suất xúc tác tăng.