Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Sử dụng hợp tử hợp gen và lựa chọn Hprt để phân tích các kiểu gen đốm liên kết với giới tính liên quan đến chết thai kỳ
Tóm tắt
Các kiểu gen đột biến liên kết với nhiễm sắc thể giới tính X liên quan đến chết thai kỳ ở con trai rất khó phân tích vì chỉ có các cá thể cái dị hợp tử dễ được sử dụng cho nghiên cứu. Việc phân tích gen của alleles đột biến được hỗ trợ bởi việc xây dựng các hợp tế bào soma, vì điều này cho phép phân ly các nhiễm sắc thể X mang alleles đột biến và loại hình hoang dã. Chúng tôi mô tả ở đây một phương pháp đảm bảo rằng nhiễm sắc thể X mang allele đột biến được giữ lại trong các hợp tế bào soma ở trạng thái có thể chọn lọc hoạt động. Điều này được thực hiện bằng cách cho giao phối giữa các cá thể cái dị hợp tử với các cá thể đực mang đột biến tại vị trí hypoxanthine phosphoribosyl transferase (Hprt). Các cá thể cái F1 thu được là những dị hợp chất hợp gen, và khi tế bào từ những cá thể cái này được kết hợp với tế bào chuột hamster HPRT và được chọn lọc trong môi trường HAT, những tế bào sống sót duy nhất là những tế bào hợp gen giữ lại một nhiễm sắc thể X hoạt động mang allele đột biến cùng với allele Hprt loại hình hoang dã. Chúng tôi sử dụng các hợp tế bào được xây dựng bằng phương pháp này để chứng minh rằng không có sự mất đoạn lớn hay tái cấu trúc di truyền nào hiện diện trong ba allele đốm liên quan đến chết thai kỳ ở đực.
Từ khóa
#đột biến liên bang #chết thai kỳ #hợp tế bào soma #chọn lọc Hprt #dị hợp tửTài liệu tham khảo
Blair, H.J., Boyd, Y. (1994). Positioning of 14 simple sequence repeat loci relative to markers on the gene-based map of the mouse X chromosome. Mouse Genome 92, 127–129.
Chelly, J., Turner, Z., Tonnesen, T., Petterson, A., Ishikawa-Brush, Y., Tommerup, N., Horn, N., Monaco, A.P. (1993). Isolation of a candidate gene for Menke’; disease that encodes a heavy metal binding protein. Nature Genet. 1, 132–136.
Danks, D.M. (1977). Copper transport and utilisation in Menke’; syndrome and in mottled mice. Inorg. Perspect. Biol. Med. 1, 73–100.
Das, S., Levinson, B., Vulpe, C, Whitney, S., Gitschier, J., Packman, S. (1995). Similar splicing mutations of the Menkes/mottled copper-transporting ATPase gene in occipital horn syndrome and the blotchy mouse. Am. J. Hum. Genet. 56, 570–576.
Dierick, H.A., Ambrosini, L., Spencer, J., Glover, T.W., Mercer, J.F. (1995). Molecular structure of the Menke’; disease gene (ATP7A). Genomics 28, 462–469.
Disteche, CM., Gandy, S.L., Adler, D.A. (1987). Translocation and amplification of an X-chromosome repeat in inbred strains of mice. Nucleic Acids Res. 15, 4393–4401.
George, A.M., Reed, V., Glenister, P., Chelly, J., Turner, Z., Horn, N., Monaco, A.P., Boyd, Y. (1994). Analysis of Mnk, the murine homologue of Menke’; disease, in normal and mottled mice. Genomics 22, 27–35.
Green, M.C. (1989). Catalog of mutant genes and polymorphic loci. In Genetic Strains and Variants of the Laboratory Mouse, M.F. Lyon, A.G. Searle, eds. (Oxford: Oxford University Press), pp. 12–403.
Hooper, M., Hardy, K., Handyside, A., Humter, S., Monk, M. (1987). HPRT-deficient (Lesch-Nyhan) mouse embryos derived from germline colonization by cultured cells. Nature 326, 292–295.
Horn, N., Tonnesen, T., Turner, Z. (1992). Menke’; disease: an X-linked neurological disorder of copper metabolism. Brain Pathol. 2, 351–362.
Kaler, S.G., Gallo, L.K., Proud, V.K., Percy, A.K., Mark, Y., Segal, N.A., Goldstein, D.S., Holmes, C.S., Gahl, W.A. (1994). Occipital horn syndrome and a mild Menke’; phenotype associated with splice site mutations at the MNK locus. Nature Genet. 8, 195–202.
Levinson, B., Vulpe, C, Elder, B., Martin, C, Verley, F., Packman, S., Gitschier, J. (1994). The mottled gene is the mouse homologue of the Menkes disease gene. Nature Genet. 6, 369–373.
Mercer, J.F.B., Livingston, J., Hall, B., Paynter, J.A., Begy, C, Chandrasekharappa, S., Lockhart, P., Grimes, A., Bhave, M., Siemieniak, D., Glover, T.W. (1993). Isolation of a partial candidate gene for Menke’; disease by positional cloning. Nature Genet. 3, 20–25.
Mercer, J.F.B., Grimes, A., Ambrosini, L., Lockhart, P., Paynter, J.A., Dierick, H., Glover, T.W. (1994). Mutations in the murine homologue of the Menkes gene in dappled and blotchy mice. Nature Genet. 6, 374–378.
Phillips, R.J.S. (1961). ‘Dappled’, a new allele at the mottled locus in the house mouse. Genet. Res. 2, 290–295.
Rasberry, C, Cattanach, B.M. (1993). Three new mottled mutations (Research News). Mouse Genome 91, 851–853.
Reed, V., Boyd, Y. (1994). Mutations in mottled dappled are RFLVs. Nature Genet. 8, 11–12.
Turner, Z., Vural, B., Tonnesen, T., Chelly, J., Monaco, A.P., Horn, N. (1995). Characterization of the exon structure of the Menke’; disease gene using vectorette PCR. Genomics 26, 437–442.
Vulpe, C, Levinson, B., Whitney, S., Packman, S., Gitschier, J. (1993). Isolation of a candidate gene for Menke’; disease and evidence that it encodes a copper-transporting ATPase. Nature Genet. 3, 7–13.