Cung cấp cả CDP-choline và diacylglycerol có thể điều chỉnh tỷ lệ tổng hợp phosphatidylcholine trong tế bào HeLa

Biochemistry and Cell Biology - Tập 64 Số 7 - Trang 692-698 - 1986
P.E. Lim, Rosemary B. Cornell, Dennis E. Vance

Tóm tắt

Việc đưa vào [methyl-14C]CDP-choline vào phosphatidylcholine đã được đo trong các tế bào HeLa đã được làm thấm bằng 0,125 mg digitonin/mL. Tốc độ hình thành phosphatidylcholine bị ảnh hưởng bởi nồng độ CDP-choline trong môi trường. Enzyme CDP-choline: 1,2-diacylglycerol cholinephosphotransferase trong các tế bào thấm cho thấy Km là 88 μM đối với CDP-choline. Một giá trị Km tương tự là 104 μM được tìm thấy cho cholinephosphotransferase trong microsome tách từ tế bào HeLa khi thử nghiệm trong sự hiện diện của 2,4 mM dioleoylglycerol. Trong trường hợp không thêm diacylglycerol, Km cho CDP-choline đối với cholinephosphotransferase microsomal chỉ là 38 μM. Việc đưa vào [methyl-14C]CDP-choline vào phosphatidylcholine được kích thích bởi cung cấp diacylglycerol trong cả tế bào HeLa và microsome tách riêng. Một huyền phù dioleoylglycerol 2,4 mM đã làm tăng gấp bốn lần hoạt động cholinephosphotransferase trong microsome. Các tế bào đã được điều trị với digitonin không thấm qua huyền phù dioleoylglycerol. Việc ươm các tế bào đã được làm thấm với 150 μM acyl-CoA và 0,8 mM glycero-3-phosphate đã làm tăng mức diacylglycerol của tế bào lên gấp ba lần, dẫn đến tỷ lệ tổng hợp phosphatidylcholine tăng gấp đôi. Một ươm tương tự đối với microsome với acyl-CoA đã kích thích tổng hợp phosphatidylcholine tăng gấp đôi. Hơn nữa, việc ươm microsome với [3H]diacylglycerol và [14C]CDP-choline cho thấy cả hai chất nền đều được đưa vào phosphatidylcholine với cùng một tốc độ. Kết quả này cho thấy rằng các tác động kích thích đối với cholinephosphotransferase xuất phát từ việc tăng sẵn có chất nền thay vì kích hoạt enzyme. Những kết quả này gợi ý rằng cả trong các tế bào đã được thấm và trong màng tách riêng, quá trình sinh tổng hợp phosphatidylcholine có thể bị giới hạn bởi cả CDP-choline và diacylglycerol.

Từ khóa

#CDP-choline #diacylglycerol #phosphatidylcholine #HeLa cells #sinh tổng hợp phosphatidylcholine

Tài liệu tham khảo