Vai trò của chất tẩy rửa trong quá trình gập lại arginine kinase bị biến tính bởi GdnHCl từ tôm Fenneropenaeus Chinensis: sự hòa tan của các hợp chất kết tụ và quá trình gập lại trong dung dịch chất tẩy rửa

Biochemistry and Cell Biology - Tập 83 Số 2 - Trang 140-146 - 2005
Ji-Cheng Pan1, Jinsong Wang, Yuan Cheng, Zhenhang Yu, Xue-Ming Rao, Hai‐Meng Zhou
1Department of Biology, Hubei Normal University, Huangshi, PR China.

Tóm tắt

Sự kết tụ mạnh mẽ đã xảy ra trong quá trình gập lại của arginine kinase (AK) bị biến tính bằng 3 mol GdnHCl/L (GdnHCl, guanidine hydrochloride). Sự phục hồi hoạt động của AK bị biến tính bởi GdnHCl là rất thấp và phụ thuộc vào nồng độ protein trong quá trình gập lại. Đối với AK bị biến tính ở nồng độ 1.2 µmol/L, tỷ lệ phục hồi hoạt động vào khoảng 45.2% so với enzyme tự nhiên, trong khi ở nồng độ 5.2 µmol/L, tỷ lệ phục hồi hoạt động chỉ đạt 20% so với hoạt động tự nhiên. Các chất tẩy rửa không ion như Triton X-100 và Tween 20 (nồng độ ≤100 mmol/L) không chỉ chặn hiệu quả sự kết tụ mà còn cho phép AK bị biến tính phục hồi hầu hết hoạt động tự nhiên của nó. Động lực học hòa tan của các hợp chất kết tụ cho thấy có một giai đoạn khởi phát phụ thuộc vào chất tẩy rửa, nhưng không có sự phụ thuộc khi không có chất tẩy rửa. Sự phục hồi hoạt động rõ rệt có mối quan hệ hợp tác với các chất tẩy rửa trong quá trình gập lại, điều này gợi ý về sự tồn tại của một số tương tác giữa chất tẩy rửa và trung gian gập lại. Dựa trên kết quả nghiên cứu, một sơ đồ gập lại đã được đề xuất.

Từ khóa

#arginine kinase #guanidine-denatured #refolding #detergent #aggregation.

Tài liệu tham khảo

Baldwin R.L., 1995, Fold. Des., 1, R1, 10.1016/S1359-0278(96)00003-X

Bradford M.A., 1976, Anal. Biochem., 72, 248, 10.1016/0003-2697(76)90527-3

Daugherty D.L., 1998, J. Biol. Chem., 273, 961, 10.1074/jbc.273.51.33961

Finke J.M., 2000, Biochemistry, 39, 575, 10.1021/bi991518m

Fischer G., 1990, Biochemistry, 29, 2205, 10.1021/bi00461a001

France R.M., 1997, Arch. Biochem. Biophys., 345, 73, 10.1006/abbi.1997.0243

Horowitz P.M., 1986, J. Biol. Chem., 261, 13887, 10.1016/S0021-9258(18)66954-6

Horwitz M., 1993, J. Biol. Chem., 268, 2500, 10.1016/S0021-9258(18)53804-7

Khan R.H., 1998, Biotechnol. Prog., 14, 722, 10.1021/bp980071q

Krishna M.M., 2004, J. Mol. Biol., 343, 1095, 10.1016/j.jmb.2004.08.098

Kumar T.K.S., 1998, Biochem. Mol. Biol. Int., 46, 507

Li S., 2001, Int. J. Biochem. Cell Biol., 33, 279, 10.1016/S1357-2725(01)00003-6

Meng F.G., 2001, Int. J. Biochem. Cell Biol., 33, 701, 10.1016/S1357-2725(01)00048-6

Minton A.P., 2000, Curr. Opin. Struct. Biol., 10, 34, 10.1016/S0959-440X(99)00045-7

Muhlebach S.M., 1994, Mol. Cell. Biochem., 133, 245, 10.1007/BF01267958

Nomura Y., 2003, FEBS Lett., 553, 271, 10.1016/S0014-5793(03)01028-7

Ou W.B., 2002, Int. J. Biochem. Cell Biol., 34, 136, 10.1016/S1357-2725(01)00113-3

Pan J.C., 2004, Biochem. Bioph. Res. Commun., 317, 539, 10.1016/j.bbrc.2004.03.084

Pan J.C., 2004, Biochem. Cell Biol., 82, 361, 10.1139/o04-033

Pan J.C., 2004, Protein Sci., 13, 1892, 10.1110/ps.03464804

Panda M., 2000, J. Biol. Chem., 275, 63, 10.1074/jbc.275.1.63

Ptitsyn O.B., 1990, FEBS Lett., 262, 20, 10.1016/0014-5793(90)80143-7

Raina K., 2004, Protein Expr. Purif., 37, 8, 10.1016/j.pep.2004.03.008

Rozema D., 1996, Biochemistry, 35, 15760, 10.1021/bi961638j

Rozema D., 1996, J. Biol. Chem., 271, 3478, 10.1074/jbc.271.7.3478

Ruddon R.W., 1997, J. Biol. Chem., 272, 3125, 10.1074/jbc.272.6.3125

Rudolph R., 1996, FASEB J., 10, 49, 10.1096/fasebj.10.1.8566547

Schein C.H., 1990, Bio/Technology, 8, 308

Stockel J., 1997, Eur. J. Biochem., 248, 684, 10.1111/j.1432-1033.1997.t01-2-00684.x

Suzuki T., 1997, Biochem. J., 328, 301, 10.1042/bj3280301

Suzuki T., 1999, Biochem. J., 340, 671, 10.1042/bj3400671

Tandon S., 1986, J. Biol. Chem., 261, 15615, 10.1016/S0021-9258(18)66759-6

Tandon S., 1987, J. Biol. Chem., 262, 4486, 10.1016/S0021-9258(18)61218-9

Umetsu M., 2004, FEBS Lett., 557, 49, 10.1016/S0014-5793(03)01441-8

Viitanen P.V., 1990, Biochemistry, 29, 5665, 10.1021/bi00476a003

Vinogradov A.A., 2003, Anal. Biochem., 320, 234, 10.1016/S0003-2697(03)00384-1

Virden R., 1965, Biochem. J., 94, 536, 10.1042/bj0940536

Yu Z., 2002, Protein Peptide Lett., 9, 545, 10.2174/0929866023408382

Zardeneta G., 1992, J. Biol. Chem., 267, 5811, 10.1016/S0021-9258(18)42625-7

Zhou G., 1998, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95, 8449, 10.1073/pnas.95.15.8449