Vai trò của chất tẩy rửa trong quá trình gập lại arginine kinase bị biến tính bởi GdnHCl từ tôm Fenneropenaeus Chinensis: sự hòa tan của các hợp chất kết tụ và quá trình gập lại trong dung dịch chất tẩy rửa
Tóm tắt
Sự kết tụ mạnh mẽ đã xảy ra trong quá trình gập lại của arginine kinase (AK) bị biến tính bằng 3 mol GdnHCl/L (GdnHCl, guanidine hydrochloride). Sự phục hồi hoạt động của AK bị biến tính bởi GdnHCl là rất thấp và phụ thuộc vào nồng độ protein trong quá trình gập lại. Đối với AK bị biến tính ở nồng độ 1.2 µmol/L, tỷ lệ phục hồi hoạt động vào khoảng 45.2% so với enzyme tự nhiên, trong khi ở nồng độ 5.2 µmol/L, tỷ lệ phục hồi hoạt động chỉ đạt 20% so với hoạt động tự nhiên. Các chất tẩy rửa không ion như Triton X-100 và Tween 20 (nồng độ ≤100 mmol/L) không chỉ chặn hiệu quả sự kết tụ mà còn cho phép AK bị biến tính phục hồi hầu hết hoạt động tự nhiên của nó. Động lực học hòa tan của các hợp chất kết tụ cho thấy có một giai đoạn khởi phát phụ thuộc vào chất tẩy rửa, nhưng không có sự phụ thuộc khi không có chất tẩy rửa. Sự phục hồi hoạt động rõ rệt có mối quan hệ hợp tác với các chất tẩy rửa trong quá trình gập lại, điều này gợi ý về sự tồn tại của một số tương tác giữa chất tẩy rửa và trung gian gập lại. Dựa trên kết quả nghiên cứu, một sơ đồ gập lại đã được đề xuất.
Từ khóa
#arginine kinase #guanidine-denatured #refolding #detergent #aggregation.Tài liệu tham khảo
Kumar T.K.S., 1998, Biochem. Mol. Biol. Int., 46, 507
Schein C.H., 1990, Bio/Technology, 8, 308