Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Nhu cầu đánh giá danh tính của các dòng tế bào ruột động vật: Một báo cáo trường hợp
Tóm tắt
Tám dòng tế bào ruột, được thiết lập từ các loài động vật khác nhau, đã được gửi đến DSMZ (Bộ sưu tập vi sinh vật và văn hóa tế bào Đức) để phân tích loài nguồn gốc và sự nhiễm khuẩn vi sinh vật. Danh tính loài được xác định bằng PCR nhắm vào các gen ti thể và do đó được xác nhận bằng phương pháp giải trình tự các sản phẩm PCR đã khuếch đại. Đối với ba dòng tế bào (CIEB, CLAB, PSI-1), chúng tôi đã xác nhận danh tính loài, trong khi loài nguồn gốc của ba dòng tế bào khác (B6, B10XI và IPEC) không như mong đợi: tế bào B6 và B10XI, vốn được cho là có nguồn gốc từ gà, lại được xác định là tế bào lợn. IPEC, vốn được cho là một phân nhóm của dòng tế bào ruột lợn nổi tiếng IPEC-J2, thực chất có nguồn gốc từ bò thay vì lợn. Tuy nhiên, hai clone IPEC khác, cụ thể là IPEC-1 và IPEC-J2, được cung cấp từ một nguồn khác lại được chứng minh là có nguồn gốc từ loài đúng (tức là lợn). Hơn nữa, sáu trong số tám dòng tế bào này đã bị nhiễm khuẩn mycoplasma ở mức độ cao. Trước tình hình tỷ lệ dòng tế bào bị nhiễm khuẩn và xác định sai cao như vậy, chúng tôi cảm thấy có trách nhiệm thông báo đến tất cả những người làm việc với các dòng tế bào ruột động vật và chúng tôi khuyến nghị mạnh mẽ việc xác minh danh tính loài trước khi sử dụng chúng. Ngoài ra, cần kiểm tra sự hiện diện của mycoplasma khi lấy các tế bào vào văn hóa lần đầu tiên, và việc kiểm tra mycoplasma này cần được lặp lại theo các khoảng thời gian định kỳ (ví dụ: mỗi 4 tuần).
Từ khóa
#dòng tế bào ruột #kiểm tra danh tính #nhiễm khuẩn mycoplasma #tế bào động vật #vi sinh vậtTài liệu tham khảo
Allston-Roberts C, Barallon R, Bauer SR, Butler J, Capes-Davis A, Dirks WG, Elmore E, Furtado M, Kerrigan L, Kline MC, Kohara A, Los GV, MacLeod RAF, Masters JR, Nardone M, Nims RW, Price PJ, Reid YA, Shewale J, Steuer AF, Storts DR, Sykes G, Taraporewala Z, Thomson J (2010) Cell line misidentification: the beginning of the end. Nat Rev Cancer 10:441–448
Berschneider HM (1989) Development of normal cultured small intestinal epithelial cell lines which transport Na and Cl. Gastroenterol 96:A41
Capes-Davis A, Theodosopoulos G, Atkin I, Drexler HG, Kohara A, MacLeod RAF, Masters JR, Nakamura Y, Reid YA, Reddel RR, Freshney RA (2010) Check your cultures! A list of cross-contaminated or misidentified cell lines. Int J Cancer 127:1–8
Chantret I, Barbat A, Dussaulx E, Brattain MG, Zweibaum A (1988) Epithelial polarity, villin expression, and enterocytic differentiation of cultured human colon carcinoma cells: a survey of twenty cell lines. Cancer Res 48:1936–1942
Chatterjee R (2007) Cell biology: cases of mistaken. Science 315:928–931
Cooper JK, Sykes G, King S, Cottrill K, Ivanova NV, Hanner R, Ikonomi P (2007) Species identification in cell culture: a prolonged molecular approach. In Vitro Cell Dev Biol Anim 43:344–351
Diesing A-K, Nossol C, Panther P, Walk N, Post A, Kluess J, Kreutzmann P, Dänicke S, Rothkötter H-J, Kahlert S (2011) Mycotoxin deoxynivalenol (DON) mediates biphasic cellular response in intestinal porcine epithelial cell lines IPEC-1 and IPEC-J2. Toxicol Lett 200:8–18
Drexler HG, Dirks WG, Matsuo Y, MacLeod RAF (2003) False leukemia- lymphoma cell lines: an update on over 500 cell lines. Leukemia 17:416–426
Geens MM, Niewold TA (2011) Optimizing culture conditions of a porcine epithelial cell line IPEC-J2 through a histological and physiological characterization. Cytotechnolgy 63:415–423
Gonzalez-Vallina R, Wang H, Zhan R, Berschneider HM, Lee RM, Davidson NO, Black DD (1996) Lipoprotein and apolipoprotein secretion by a newborn piglet intestinal cell line (IPEC-1). Am J Physiol 271:G249–G259
Lacroix M (2008) Persistent use of "false“ cell lines. Int J Cancer 122:1–4
Liu MY, Lin SC, Liu H, Candal F, Vafai A (2003) Identification and authentication of animal cell culture by polymerase chain reaction amplification and DNA sequencing. In Vitro Cell Dev Biol Anim 39:424–427
MacLeod RAF, Drexler HG (2006) Public repositories: users reluctant to give materials. Nature 439:912
MacLeod RAF, Dirks WG, Matsuo Y, Kaufmann M, Milch H, Drexler HG (1999) Widespread intraspecies cross-contamination of human tumor cell lines arising at source. Int J Cancer 83:555–563
MacLeod RAF, Dirks WG, Dexler HG (2002) Persistent use of misidentified cell lines and its prevention. Genes Chromosom Cancer 33:103–105
Mariani V, Palermo S, Fiorentini S, Lanubile A, Giuffra E (2009) Gene expression study of two widely used pig intestinal epithelial cell lines: IPEC-J2 and IPI-2I. Vet Immunol Immunopathol 131:278–284
Masters JR (2002) False cell lines: the problem and the solution. Cytotechnology 39:17–22
Nardonne RM (2007) Eradication of cross-contaminated cell lines. A call for action. Cell Biol Toxicol 23:367–372
Nelson-Rees WA, Daniels DW, Flandermeyer RR (1981) Cell cross-contamination in cell cultures. Science 212:446–452
Nossol C, Diesing AK, Walk N, Faber-Zuschratter H, Hertig R, Post A, Kluess J, Rothkötter HJ, Kahlert S (2011) Air-liquid interface cultures enhance the oxygen supply and trigger the structural and functional differentiation of intestinal porcine epithelial cells (IPEC). Histochem Cell Biol 36:103–115
Ono K, Motonobu S, Yoshida T, Ozawa Y, Kohara A, Takeuchi M, Mizusawa H, Sawada H (2007) Species identification of animal cells by nested PCR targeted to mitochondrial DNA. In Vitro Cell Dev Biol Anim 43:168–175
Pinton P, Braicu C, Nougayrede JP, Laffitte J, Taranu I, Oswald IP (2010) Deoxynivalenol impairs porcine intestinal barrier function and decreases the protein expression of claudin-4 through a mitogen-activated protein kinase-dependent mechanism. J Nutr 140:1956–1962
Schierack P, Nordhoff M, Pollmann M, Weyrauch KD, Amasheh S, Lodemann U, Jores J, Tachu B, Kleta S, Blikslager A, Tedin K, Wieler LH (2006) Characterization of a porcine intestinal epithelial cell line for in vitro studies of microbial pathogenesis in swine. Histochem Cell Biol 125:293–305
Stacey GN, Hoelzl H, Stephenson JR, Doyle A (1997) Authentication of animal cell cultures by direct visualization of repetitive DNA, aldolase gene PCR and isoenzyme analysis. Biologicals 25:75–85
Stacey GN, Masters JR, Hay RJ, Drexler HG, MacLeod RAF, Freshney RI (2000) Cell contamination leads to inaccurate data: we must take action now. Nature 403:356
Steube KG, Meyer C, Uphoff CC, Drexler HG (2003) A simple method using β-globin PCR for the species identification of animal cell lines. In Vitro Cell Dev Biol Anim 39:468–475
Steube KG, Koelz AL, Drexler HG (2008) Identification and verification of rodent cell lines by polymerase chain reaction. Cytotechnology 56:49–65
Stevenson R (1987) Development of cell banking in the US 1960–1985: a strategic approach to quality control. Adv Cell Cult 51:267–288
Uphoff CC, Drexler HG (2011a) Detecting Mycoplasma contamination in cell cultures by polymerase chain reaction. In: Cree I (ed) Cancer cell culture: methods and protocols, 2nd edn. Springer, Berlin, pp 93–103
Uphoff CC, Drexler HG (2011b) Elimination of mycoplasmas from infected cell lines using antibiotics. In: Cree I (ed) Cancer cell culture: methods and protocols, 2nd edn. Springer, Berlin, pp 105–114
Zoon KC (1993) Points to consider in the characterization of cell lines used to produce biologicals. Center for Biological Evaluation and Research. Food and Drug Administration, Rockville, MD, pp 7–8