TMEFF2 và SARDH hợp tác điều tiết chuyển hóa một carbon và xâm lấn của tế bào ung thư tuyến tiền liệt

Protein xuyên màng có yếu tố tăng trưởng biểu bì và hai mô típ follistatin, TMEFF2, đã được liên quan đến ung thư tuyến tiền liệt nhưng vai trò của nó trong bệnh này vẫn chưa rõ ràng. Chúng tôi gần đây đã chứng minh rằng vai trò ức chế khối u của TMEFF2 liên quan, một phần, đến khả năng tương tác với sarcosine dehydrogenase (SARDH) và điều chỉnh mức độ sarcosine. Sự quá biểu hiện TMEFF2 ức chế sự xâm lấn do sarcosine gây ra. Tại đây, chúng tôi tiếp tục đặc trưng hóa tương tác chức năng giữa TMEFF2 và SARDH cũng như mối liên hệ của chúng với chuyển hóa một carbon (1-C) và sự xâm lấn.

Can thiệp RNA được sử dụng để nghiên cứu ảnh hưởng của việc cắt giảm SARDH và/hoặc TMEFF2 (KD) trong sự xâm lấn, được đánh giá bằng cách sử dụng buồng Boyden. Sự phụ thuộc của quá trình xâm lấn vào chuyển hóa 1-C được xác định bằng cách kiểm tra độ nhạy với methotrexate. PCR thời gian thực và Western blot của các phân đoạn tế bào đã được sử dụng để nghiên cứu tác động của KD SARDH hoặc KD TMEFF2 lên biểu hiện của các enzym liên quan đến chuyển hóa một carbon (1-C) và lên biểu hiện cũng như vị trí của TMEFF2. Các tương tác protein được phân tích bằng kỹ thuật khối phổ. Sự sống sót và tăng trưởng của tế bào được đo bằng cách đếm tế bào và phân tích MTT.

Khi cắt giảm SARDH ảnh hưởng đến vị trí tế bào của TMEFF2, tác động này không phải là nguyên nhân gây ra sự xâm lấn tăng lên ở các tế bào KD SARDH. Quan trọng hơn, KD SARDH và/hoặc TMEFF2 thúc đẩy sự gia tăng xâm lấn tế bào, làm nhạy cảm tế bào với methotrexate, làm cho tế bào kháng lại sự xâm lấn do sarcosine gây ra, một sản phẩm chuyển hóa từ con đường chuyển hóa một carbon trung gian folate, và ảnh hưởng đến mức độ biểu hiện của các enzym liên quan đến con đường này.

Các phát hiện của chúng tôi xác định vai trò của TMEFF2 và con đường chuyển hóa một carbon trung gian folate trong việc điều tiết xâm lấn tế bào. Prostate 73: 1561–1575, 2013 © 2013 Wiley Periodicals, Inc.