Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Biến đổi ổn định cây đậu tằm Vigna aconitifolia thông qua chuyển giao gen trực tiếp
Tóm tắt
Chuyển giao gen trực tiếp đã chứng minh là một phương pháp biến đổi hiệu quả cho Vigna aconitifolia, một thành viên của họ đậu. Các calli và cây kháng kanamycin đã được tái sinh từ các protoplasts bị sốc nhiệt được điều trị bằng PEG và DNA plasmid chứa vùng mã hóa cho gen aminoglycoside phosphotransferase (NPT II). Giống cây trồng sử dụng là một yếu tố quan trọng trong việc đạt được tần suất biến đổi cao hơn. Quá trình biến đổi được xác nhận bằng phân tích Southern blot sử dụng hệ thống phát hiện không phóng xạ. Các nỗ lực chuyển đổi tế bào mô giậu và tế bào nuôi cấy lơ lửng bằng phương pháp này không thành công. Các protoplasts được điện chuyển với plasmid pCAP212, mã hóa cho acetyltransferase chloramphenicol, đã thể hiện sự biểu hiện tạm thời của gen này hai ngày sau khi điều trị trong khi các tế bào được điện chuyển không cho thấy hoạt động enzyme này. Do đó, có thể cho rằng việc tiếp nhận DNA bị ngăn cản bởi thành tế bào.
Từ khóa
#biến đổi gen #Vigna aconitifolia #chuyển giao gen trực tiếp #protoplasts #Southern blotTài liệu tham khảo
Binding H (1974) Z Pflanzenphysiol 74: 327–356
Fromm M, Taylor LP, Walbot V (1985) Proc Natl Acad Sci USA 82: 5824–5828
Garcia JA, Hill J, Goldbach R (1986) Plant Sci 44: 37–46
Golz C, Köhler F, Eapen S, Schieder O (1987) 7. Wissenschaftl. Tagung der Gesellschaft für Entwicklungsbiologie mit der deutschen Sektion der IAPTC, FU Berlin, Berlin, pp. 89
Hain R, Stabel P, Czernilofsky AP, Steinbiß HH, Herrera-Estrella L, Schell J (1985) Mol Gen Genet 199: 161–168
Krens FH, Molendijk L, Wullems GJ, Schilperoort RA (1982) Nature 296: 72–74
Lörz H, Baker B, Schell J (1985) Mol Gen Genet 199: 178–182
Maniatis T, Fritsch EF, Sambrook J (1982) Molecular cloning: A laboratory manual. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor NY
Murashige T, Skoog F (1962) Physiol Plant 15: 473–497
Neumann R, Rudloff P, Eggers HJ (1986) Naturwissenschaften 73: 553–555
Paszkowski J, Shillito RD, Saul M, Mandak V, Hohn T, Hohn B, Potrykus I (1984) EMBO J 3: 2717–2722
Paszkowski J, Pisan B, Shillito RD, Hohn T, Hohn B, Potrykus I (1986) Plant Mol Biol 6: 303–312
Potrykus I, Paszkowski J, Saul MW, Petruska J Shillito RD (1985a) Mol Gen Genet 199: 169–177
Potrykus I, Saul MW, Petruska J, Paszkowski J, Shillito RD (1985b) Mol Gen Genet 199: 183–188
Schieder O (1984) In: Vasil IK (ed) Cell culture and somatic cell genetics of plants, Vol 1, Academic Press, Orlando, pp 350–355
Shillito RD, Paszkowski J, Potrykus I (1983) Plant Cell Rep 2: 244–247
Shillito RD, Saul MW, Paszkowski J, Müller M, Potrykus I (1985) Bio/Technol 3: 1099–1103
Soberon X, Covarrabias L, Bolivar F (1980) Gene 9: 287–300
Southern EM (1975) J Mol Biol 98: 503–517
Velten J, Schell J (1985) Nucleic Acid Res 13: 6981–6998