Phương pháp LC-MS/MS chỉ thị độ ổn định để xác định lovastatin trong huyết tương người: ứng dụng vào nghiên cứu tương đương sinh học

Journal of Analytical Science and Technology - Tập 6 - Trang 1-11 - 2015
Arabinda Saha1, Hemanth Jangala1, Poonam Vats1, Richa Thakur1, Arshad Khuroo1, Tausif Monif1
1Department of Clinical Pharmacology and Pharmacokinetics, Ranbaxy Laboratories Ltd., GP-5, HSIDC, Gurgaon, India

Tóm tắt

Một phương pháp phân tích nhạy cảm và chọn lọc là cần thiết để ước lượng lovastatin trong huyết tương người vì lovastatin đã được báo cáo có độ biến thiên cao giữa các cá thể và được chuyển đổi thành chuyển hóa hoạt động lovastatin hydroxy acid trong hệ thống in vitro và ngược lại. Nếu sự chuyển đổi này không được kiểm soát, nó có thể dẫn đến việc ước lượng giả lovastatin trong huyết tương người. Một phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao ghép nối khối phổ (LC-MS/MS) cụ thể, nhạy cảm và tái lập đã được phát triển và xác thực để xác định lovastatin trong huyết tương người, sử dụng lovastatin-d3 làm chất chuẩn nội. Lovastatin và lovastatin-d3 được chiết xuất từ huyết tương người bằng phương pháp chiết xuất pha rắn, phân tách trên cột Luna C18 (2)100A (100 × 4.6 mm, 5 μm) với pha di động bao gồm acetonitrile và đệm acetate amoni 2 mM (pH 3.6) theo tỷ lệ 90:10, v/v. Định lượng được thực hiện bằng cách theo dõi các chuyển tiếp của m/z 422.1 → 285.4 cho lovastatin và 425.4 → 285.4 cho lovastatin-d3 trong giám sát phản ứng đa chiều, sử dụng nguồn ion turbo ở cực dương. Không có tác động ma trận nào được quan sát thấy trong khoảng tuyến tính từ 0.121–35.637 ng/mL (r > 0.99). Độ ảnh hưởng của ma trận đối với lovastatin được xác định là 2.74 %, và nó không có ảnh hưởng đến phân tích mẫu phát sinh với thời gian chạy là 4.5 phút. Giá trị độ chính xác trong và giữa các ngày nằm trong khoảng 11.38 và 8.62 % tương ứng cho lovastatin ở mức định lượng giới hạn thấp nhất. Dữ liệu ổn định cho thấy lovastatin ổn định dưới nhiều điều kiện xử lý và với sự chuyển đổi giữa lovastatin và lovastatin hydroxy acid không đáng kể. Phương pháp này đã được áp dụng thành công cho nghiên cứu tương đương sinh học của lovastatin sau khi uống viên thuốc 40 mg ở tình nguyện viên khỏe mạnh.

Từ khóa

#lovastatin #huyết tương người #LC-MS/MS #nghiên cứu tương đương sinh học #chuyển hóa hoạt động

Tài liệu tham khảo

Daniel M, Mohammed J, Sabine CP (2000) Quantitative determination of pravastatin and its biotransformation products in human serum by turbo ion spray LC/MS/MS. J Pharm Biomed Anal 23:851–866 Dong W, Dongmei W, Feng Q, Lingyun C, Famei L (2008) Determination of lovastatin in human plasma by ultra-performance liquid chromatography/electrospray ionization tandem mass spectrometry. Biomed Chromatogr 22:511–518 Guideline on bioanalytical method validation (2011) European Medical Agency. http://www.ema.europa.eu/docs/en_GB/document_library/Scientific_guideline/2011/08/WC500109686.pdf. Accessed 09 March 2014 Guidance for Industry: Bioanalytical Method Validation (2001) US Food and Drug Administration. http://www.fda.gov/downloads/drugs/guidancecomplianceregulatoryinformation/guidances/ucm368107.pdf. Accessed 09 March 2014 Haiyan Y, Feng W, Jiying T, Wenxing P, Huande L (2008) Determination of lovastatin in human plasma by ultra-performance liquid chromatography–electrospray ionization tandem mass spectrometry and its application in a pharmacokinetic study. J Pharm Biomed Anal 46:808–813 Hsu I, Spinler SA, Johnson NE (1995) Comparative evaluation of the safety and efficacy of HMG-CoA reductase inhibitor monotherapy in the treatment of primary hypercholesterolemia. Ann Pharmacother 29:743–759 Islam UK, Tayyaba K, Muhammad A, Shaazad S (2010) Development and validation of liquid chromatographic method for the simultaneous estimation of ezetimibe and lovastatin in human plasma. J Chil Chem Soc 55:461–464 Jacobsen W, Gabriele K, Katrin H, Laviero M, Michael D, Ingelore H, Benet LZ, Sewing KF, Christians U (1998) Comparison of cytochrome p-450 dependent metabolism and drug interactions of the 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coa reductase inhibitors lovastatin and pravastatin in the liver. Drug Metab Dispos 27:173–179 Kearney AS, Crawford LF, Surendra CM, Galen WR (1993) The interconversion kinetics, equilibrium, and solubilities of the lactone and hydroxy acid forms of the HMG-CoA reductase inhibitor, CI-981. Pharm Res 10:1461–1465 Lily YY, Patricia SF, Malcolm JM (2000) Determination of lovastatin in human plasma using reverse phase high performance liquid chromatography with UV detection. Ther Drug Monit 22:737–741 Lin F, Dai Z, Hou S, Wan Y (2004) Pharmacokinetic study on lovastatin sustained-release tablet and sustained-release capsule in begal dogs. J Huazhong Univ Sci Technolog 24:116–119 Lin L, Jin S, Yaxin S, Zhonggui H (2008) LC–ESI–MS determination of lovastatin in human plasma. Chromatographia 67:621–625 Morris MJ, Gilbert JD, Hsieh JY, Matuszewski BK, Ramjit HG, Bayne WF (1993) Determination of the HMG-CoA reductase inhibitors simvastatin, lovastatin, and pravastatin in plasma by gas chromatography/chemical ionization mass spectrometry. Biol Mass Spectrom 22:1–8 Mullangi R, Pasha MK, Jafar SB, Syed M, Shashikumar D, Srinivas NR (2006) Analysis of five HMG-CoA reductase inhibitors-atorvastatin, lovastatin, pravastatin, rosuvastatin and simvastatin: pharmacological, pharmacokinetic and analytical overview and development of a new method for use in pharmaceutical formulations analysis and in vitro metabolism studies. Biomed Chromatogr 20:282–293 Nageswararao P, Ramesh M, Jaswanth KI, Indira KN, Seshagirirao JVLN (2012) Simultaneous determination of simvastatin, lovastatin and niacin in human plasma by LC-MS/MS and its application to a human pharmacokinetic study. Biomed Chromatogr 26:476–484 O’Connor P, Feely J, Shepherd J (1990) Lipid lowering drugs. Br Med J 300:667–672 Prescribing Information (2012) Mevacor (lovastatin Tablets). MERCK & CO., INC., USA Whitehouse Station (NJ) Ramakrishna N, Koteshwara M, Vishwottam K (2007) Chromatography-mass spectrometry methods for the quantitation of statins in biological samples. J Pharm Biomed Anal 44:379–387 Strode JT, Taylor LT, Howard AL, Ip D (1999) Feasibility of lovastatin analysis by packed column supercritical fluid chromatography with ultraviolet detection. J Pharm Biomed Anal 20:137–143 Viswanathan CT, Bansal S, Booth B (2007) Workshop/conference report-quantitative bioanalytical methods validation and implementation: best practices for chromatographic and ligand binding assays. AAPS J 9:E30–E42 Won CM (1994) Epimerization and hydrolysis of dalvastatin, a new hydroxymethylglutaryl coenzyme (HMG-CoA) reductase inhibitor. Pharm Res 11:165–170 Wu Y, Jamie Z, Jack H, Walter AK, Amelia PL, Lin CC (1997) Microsample determination of lovastatin and its hydroxy acid metabolite in mouse and rat plasma by liquid chromatography/ionspray tandem mass spectrometry. J Mass Spectrom 32:379–387 Xiao H, Shen H, Chen JF, Xaio D (2006) Determination of lovastatin level in human plasma and lovastatin capsules bioavailability in healthy volunteers using HPLC-MS. J Chin Pharm Sci 15:233–237 Xiu SM, Chris DM (2003) Determination of cholesterol-lowering statin drugs in aqueous samples using liquid chromatography–electrospray ionization tandem mass spectrometry. J Chromatogr A 998:133–141