Tách biệt tế bào bằng phương pháp lắng theo vận tốc

Journal of Cellular Physiology - Tập 73 Số 3 - Trang 191-201 - 1969
Richard G. Miller1, Robert A. Phillips1
1Department of Medical Biophysics, University of Toronto, and the Ontario Cancer Institute, Toronto, Ontario, Canada

Tóm tắt

Tóm tắtHệ thống phân loại quần thể tế bào sống bằng phương pháp lắng theo vận tốc trong trường hấp dẫn của trái đất được mô tả. Tế bào bắt đầu trong một dải mỏng gần phía trên của một gradient nông từ 3% đến 30% huyết thanh bê tê (fetal calf serum) trong dung dịch đệm phosphate ở 4°C. Việc tách biệt tế bào chủ yếu diễn ra dựa trên kích thước và gần như không phụ thuộc vào hình dạng tế bào. Một giới hạn rõ rệt phía trên, gọi là giới hạn dòng chảy, tồn tại đối với nồng độ tế bào trong dải bắt đầu, vượt quá đó sẽ không thể đạt được sự tách biệt tế bào hữu ích. Giới hạn này, thay đổi theo loại tế bào được lắng, có thể được tăng cường một cách đáng kể bằng cách chọn hình dạng gradient phù hợp. Đối với tế bào hồng cầu cừu (vận tốc lắng 1.6 mm/giờ), giới hạn này là 1.5 × 107 tế bào/ml. Vận tốc lắng được đo và tính toán cho tế bào hồng cầu cừu cho thấy có sự đồng nhất. Kỹ thuật này được áp dụng cho một huyền phù tế bào lách chuột và được chỉ ra, bằng cách sử dụng bộ đếm tế bào điện tử và máy phân tích độ cao xung, rằng các tế bào được phân loại theo kích thước dọc theo gradient, sao cho vận tốc lắng (mm/giờ) khoảng tương đương với r2/4, trong đó r là bán kính tế bào tính bằng micron. Vì các tế bào có chức năng khác nhau cũng thường khác nhau về kích thước, hệ thống dường như có những ứng dụng sinh học hữu ích.

Từ khóa


Tài liệu tham khảo

Altman P. L., 1964, Biology Data Book, 269

Beresford J., 1967, Size analysis of organic pigments using the ICI‐Joyce Loebel disc centrifuge, J. Oil Col. Chem. Assoc., 50, 594

Bergsagel D. E. andR. G.Miller1969(in preparation).

10.1083/jcb.36.2.369

10.1111/j.1749-6632.1962.tb45310.x

10.1126/science.131.3392.32

10.1084/jem.99.2.167

10.1126/science.150.3698.910

10.1016/S0006-3495(65)86724-8

10.1038/2161229a0

Hodgman C. D., 1963, Handbook of Chemistry and Physics

10.1126/science.140.3565.405

10.1073/pnas.51.3.520

MacDonald H. R. andR. G.Miller1969(in preparation)

McCool D. R. J. Miller W. R.Bruce R. H.PainterandC. M.Warby1969(in preparation).

Magath T. B., 1960, Electronic blood‐cell counting, Am. J. Clin. Path., 34, 203, 10.1093/ajcp/34.3.203

10.3181/00379727-127-32719

10.1038/200423a0

10.1016/0022-5193(64)90026-8

II Laminar flow and density gradient stability, J. Theor. Biol., 6, 181

III Migration principles – sedimentation and electrophoresis, J. Theor. Biol., 6, 307

Mel H. C. andJ. C.Schooley1965La greffe des cellules hématopoiétiques allogeniques. G. Mathe J. L. Amiel and L. Schwarzenberg (eds.)

10.1073/pnas.58.6.2261

10.1038/214824a0

Phillips R. A. andR. G.Miller1969(in preparation).

10.1038/2161227a0

Tanford C., 1961, Physical Chemistry of Macromolecules, 327

10.1002/jcp.1040690110

10.3181/00379727-125-32093

Worton R. G., 1967, Partial purification of hemopoietic colony‐forming cells, Biophys. J. (Abstr.), 7, 100

Worton R. G. J. E. TillandE. A.McCulloch1969(in preparation).

Thông tin
Thông tin xuất bản

Journal of Cellular Physiology

Tập 73 Số 3

191-201

Thông tin tác giả