Kháng thuốc Pyrimethanil và các thuốc trừ nấm khác trong quần thể Botrytis cinerea thu thập trên cây rau ở Tây Ban Nha

Một cuộc khảo sát đã được thực hiện trên 47 nhà kính trồng cây rau ở miền đông nam Tây Ban Nha vào đầu dịch bệnh (tháng 1 năm 2000) để so sánh độ nhạy cảm của các quần thể Botrytis cinerea đối với pyrimethanil (một loại thuốc trừ nấm anilinopyrimidine) sau 4 năm điều trị với một quần thể chưa tiếp xúc từ bộ sưu tập năm 1992. Một phương pháp chuẩn để kiểm tra độ nhạy cảm của B. cinerea đối với pyrimethanil trong một môi trường tối thiểu xác định (1.75 g/l KH₂PO₄, 0.75 g/l MgSO₄, 4 g/l glucose và 4 g/l gelatin) đã được sử dụng để thiết lập các phân phối tần suất về độ nhạy cảm với pyrimethanil ở cả hai quần thể. Hai phân phối khác nhau cho các biến thể nhạy cảm và kháng đã được thu nhận. ED₅₀ của các biến thể nhạy cảm vào năm 1992 nằm trong khoảng từ 0.05 đến 0.5 mg a.i./l (trung bình ± SE, 0.23 ± 0.02), và từ 0.04 đến 0.4 mg a.i./l vào năm 2000 (0.11 ± 0.01). ED₅₀ cho các biến thể kháng nằm trong khoảng từ 1 đến 10 mg a.i./l trong cả hai cuộc khảo sát (5 ± 2.64 và 4.25 ± 2.14, vào năm 1992 và 2000, tương ứng). Không có sự gia tăng khả năng kháng pyrimethanil nào được phát triển trong các quần thể B. cinerea sau 4 năm tiếp xúc với thuốc trừ nấm này. Một quy trình theo dõi in vitro đã được phát triển dựa trên việc kiểm tra một liều phân biệt duy nhất của pyrimethanil (được thiết lập ở mức 0.7 mg a.i./l). Các biến thể kháng pyrimethanil trong thử nghiệm in vitro đã gây ra tổn thương rõ rệt trên các đĩa lá dưa chuột được xử lý bằng thuốc trừ nấm. Không có sự khác biệt đáng kể nào về độ thích nghi (tăng trưởng hoặc tạo bào tử) giữa các biến thể kháng và nhạy cảm. 307 biến thể được thu thập vào tháng 1 năm 2000 đã được kiểm tra in vitro bằng cách sử dụng các liều phân biệt để ước tính tỷ lệ kháng của B. cinerea đối với benzimidazoles (carbendazim), dicarboximides (procymidone), N-phenylcarbamates (diethofencarb), và anilinopyrimidines (pyrimethanil). Trong số 307 biến thể thu thập, 90% kháng lại benzimidazoles, 77% kháng dicarboximides, 23% kháng N-phenylcarbamates và 12% kháng anilinopyrimidines (trong số 165 biến thể này). Các biến thể kháng chéo giữa dicarboximides và benzimidazoles đã được phát hiện ở mỗi nhà kính được khảo sát và chiếm 65,8%. Mười bốn phần trăm dân số kháng lại dicarboximides, benzimidazoles và N-phenylcarbamates, và 3% cũng kháng lại anilinopyrimidines.