Loại bỏ đầu carboxyl của thụ thể adenosine A2A làm giảm hoạt động tự phát: ảnh hưởng khác biệt đến tích tụ cAMP và kích thích MAP kinase

Thụ thể A2A-adenosine có đầu carboxyl kéo dài (~120 axit amin), vai trò của nó vẫn chưa được xác định rõ ràng. Trong các tế bào nội mạch của con người và tế bào HEK293, thụ thể A2A kiểm soát ít nhất hai con đường tín hiệu độc lập, tức là tăng cường hình thành cyclic adenosine 3′,5'-monophosphate (cAMP) thông qua protein G tương ứng Gs và tăng phosphoryl hóa kinase MAP (MAP kinase) bằng cách tuyển mộ p21ras. Để giải quyết vai trò của đầu carboxyl trong việc chuyển giao tín hiệu, chúng tôi đã tạo ra các tế bào HEK293 biểu hiện ổn định thụ thể đầy đủ (wt) và các phiên bản bị cắt (A2A-R(1-360) và A2A-R(1-311)) với mức độ tương đương (~0,5 pmol/mg) trên màng tế bào. Các tác động của sự cắt ngắn là khác nhau liên quan đến hai yếu tố tác động do thụ thể điều chỉnh. Trong các tế bào nguyên vẹn mang A2A-R(wt) và A2A-R(1-360), sự tích tụ cAMP được kích hoạt mạnh mẽ hơn bởi một chất chủ vận A2A so với trong các tế bào biểu hiện A2A-R(1-311). Tương tự, A2A-R(wt) và A2A-R(1-360) - nhưng không phải A2A-R(1-311) - gây ra sự tăng cường cAMP tự phát (=không phụ thuộc vào chất chủ vận) có thể đảo ngược bằng cách bổ sung các chất đối kháng A2A. Tuy nhiên, trong màng được chuẩn bị từ các tế bào này, ba thụ thể không hiển thị hoạt động tự phát nào trong việc kích thích adenylyl cyclase, và chúng không khác nhau về ái lực rõ ràng với chất chủ vận. Sự cắt ngắn thụ thể A2A cũng không làm giảm độ mạnh của một chất chủ vận A2A trong việc kích thích MAP kinase trong các tế bào nguyên vẹn. Chúng tôi kết luận rằng đầu carboxyl xác định cả (a) mức độ hoạt động tự phát, tức là trạng thái cân bằng R↔R*, chỉ trong các tế bào nguyên vẹn, cho thấy vai trò của một thành phần bị mất khi ly giải tế bào, và (b) hiệu quả của việc chuyển giao tín hiệu trong các con đường thay thế.