Giảm thiểu ô nhiễm DNA nhân trong phân tích DNA lạp thể bằng các enzym restriction endonuclease

Plant Molecular Biology Reporter - Tập 11 - Trang 48-53 - 1993
Jian-Wei Liu1, Ray J. Rose1
1Department of Biological Sciences, The University of Newcastle, Australia

Tóm tắt

Nếu các lạp thể được tinh chế trên các gradient sucrose được xử lý trong 10 phút ở 4°C với 2 M NaCl, sau đó được ly tâm với lực 1000-g, ô nhiễm DNA từ nhân tế bào giảm từ 1.5 đến 3 lần như được ước tính bằng phương pháp đo mật độ quang.

Từ khóa

#lạp thể #DNA nhân #enzyme restriction endonuclease #ô nhiễm DNA #gradient sucrose

Tài liệu tham khảo

herrmann, R.G. 1982. The preparation of circular DNA from plastids. In:Methods in Chloroplast Molecular Biology (eds M. Edelman, R.B. Hallick and N.-H. Chua) pp. 259–280. Academic Press, San Diego. Kemble, R.J. 1987. A rapid, single leaf, nucleic acid assay for determing the cytoplasmic organelle complement of rapeseed and relatedBrassica species. Theor. Appl. Genet. 73:364–370. Liu, J.-W., and R.J. Rose, 1992. The spinach chloroplast chromosome is bound to the thylakoid membrane in the region of the inverted repeat. Biochem. Biophys. Res. Commun. 184:993–1000. Palmer, J.D. 1986. Isolation and structural analysis of chloroplast DNA. In Meth. Enzymol. 118:167–186. Palmer, J.D. 1987. Chloroplast DNA evolution and biosystematic uses of chloroplast DNA variation. Amer. Naturalist. 130:S6-S29. Rose, R.J., L.B. Johnson, and R.J. Kemble, 1986. Restriction endonuclease studies on the chloroplast and mitochondrial DNAs of alfalfa (Medicago sativa L.). Plant Mol. Biol. 6:331–338. Rose, R.J., S.E. Schlarbaum, E. Small, and L.B. Johnson, 1987. Chloroplast genomic variation and phylogeny inMedicago sectionIntertextae. Can. J. Bot. 66:1352–1358. Sugiura, M. 1989. The chloroplast chromosome in land plants. Annu. Rev. Cell Biol. 5:51–70. Svab, Z., Hajdukiewicz, P., and Maliga, P. 1990. Stable transformation of plastids in higher plants. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 87:8526–8530.