Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Xây dựng tái tổ hợp và phân tích khả năng gây nhiễm của virus khảm thuốc lá và bộ gen virus khảm cà chua giảm độc lực N14
Tóm tắt
Các dòng tái tổ hợp của pTN và pNT đã được xây dựng bằng cách trao đổi các vùng mã hóa của protein di động (MP), protein vỏ (CP) và 3− vùng không mã hóa giữa các cDNA của virus khảm thuốc lá (đặc khu Trung Quốc, TMV-Cv) và bộ gen virus khảm cà chua giảm độc lực N14, và được sử dụng làm mẫu cho quá trình phiên mã chạy ngoài vitro. Các sản phẩm phiên mã của chúng đã được sử dụng cho các thử nghiệm nhiễm thuốc lá. Kết quả nhiễm cho thấy rằng các sản phẩm phiên mã của pTN và pNT có khả năng gây nhiễm. Các tổn thương cục bộ đã được quan sát thấy trên lá của Nicotiana tabacum cv. Samsun NN được tiêm với sản phẩm phiên mã pTN, nhưng ít hơn so với những tổn thương ở cùng loại cây được tạo ra bởi sản phẩm phiên mã pTMV-Cv. Các triệu chứng toàn thân cũng đã được quan sát trong N. tabacum cv. Huangmiaoyu do sản phẩm phiên mã pTN gây ra, nhưng nhẹ hơn so với những triệu chứng ở cùng loại thuốc lá do sản phẩm phiên mã pTMV-Cv gây ra. Các tổn thương cục bộ đã xuất hiện trong N. tabacum cv. Samsun NN được tiêm với sản phẩm phiên mã pNT, nhưng nhiều hơn so với những tổn thương ở cùng loại cây do sản phẩm phiên mã pN14 gây ra, trong khi không có triệu chứng toàn thân nào được hiển thị ở N. tabacum cv. Huangmiaoyu. Những kết quả này gợi ý rằng các virus tái tổ hợp TN và NT đều có khả năng sinh sản trong cây thuốc lá đã được thử nghiệm, và chúng giữ được những đặc điểm kiểu hình hầu như giống hệt với các sản phẩm phiên mã pTMV-Cv và pN14, cũng như TMV-Cv và N14. Sự liên kết giữa các replicase và các MP, CP và 3− vùng không mã hóa là không nghiêm ngặt. Rõ ràng có sự bổ sung chức năng tương thích giữa các gen đồng nhất của TMV-Cv và N14. Từ những điểm trên, có thể suy luận rằng gen replicase đã bị biến đổi của N14 đóng vai trò chính trong việc góp phần vào việc giảm độc lực của virus, trong khi gen MP đã bị biến đổi của nó có thể làm nhẹ triệu chứng của các cây thuốc lá bị nhiễm.
Từ khóa
Tài liệu tham khảo
Banerjee, N., Wang, J. Y., Zaitlin, M., A single nucleolide change in the coat protein gene of tobacco mosaic virus is involved in the induction of severe chlorosis. Virology, 1995, 207: 234.
Nishiguchi, M., Kikuchi, S., Kino, T. et al., Molecular basis of plant viral virulence; the complete nucleotide sequence of an attenuated strain of tobacco mosaic virus. Nucleic Acids Research, 1985, 13(15): 5585.
Shiian, A. N., Mil’shina, N. V., Snegireva, P. B. et al., The primary structure of a vaccine strain of tobacco mosaic virus V-69, Genilka, 1994, 30(12): 1626.
Kang, L. Y., Yang, X. C., Tian, P., Double-stranded viral RNA content in tobacco leaves infected with virulent and avirulent isolates of tobacco mosaic virus. Virology, 1982, 118: 324.
Yang, G., Qiu, B. S., Cloning and infection analysis of the cDNAs of tobacco mosaic virus and its attenuated virus genomes, Chin. J. Biolechnol., 2000, 16(2): 207.
Dawson, W. O., Bubrick, P., Grantham, G. L., Modifications of the tobacco mosaic vims coat protein gene affecting replication, movement, and symptomatology, Mol. Plant Pathol., 1988, 78(6): 783.
Ishikawa, M., Meshi, T., Watanabe, Y. et al., Replication of chimeric tobacco mosaic viruses which carry heterologous combinations of replicase gene and 3′ noncoding regions, Virology, 1988, 164: 290.
Deom, C. M., He, X. Z., Beachy, R. N. et al., Influence of heterologous tobamovirus movement protein and chimeric movement protein genes on cell-lo-cell and long-distance movement. Virology, 1994, 205(1): 198.
Heinlein, M., Epel, B. I., Padgett, H. S. et al., Interaction of tobamovirus movement proteins with the plant cytosketeton, Science, 1995,270(5244): 1983.
Reichet, C., Beachy, R. N., Tobacco mosaic virus infection induces severe morphological changes of the endoplasmic reticulum, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1998, 95(19): 11169.
Dustin, P., Microlubules, Second totally revised edition, Berlin: Springer-Verlag Press, 1984, 251.
Carr, J. P., Marsh, L. E., Lomonossoff, G. P. et al., Resistance to tobacco mosaic virus induced by the 54-kDa gene sequence requires expression of the 54-kDa protein, Mol. Plant Microbe Interact, 1992, 5(5): 397.