Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
PCR Thời gian Thực trong mẫu phân của Triatoma infestans thu được qua phương pháp chẩn đoán nhiễm khá xenodiagnosis: Đề xuất về kiểm soát nội dung ngoại sinh
Tóm tắt
Phản ứng chuỗi polymerase (PCR) đã chứng minh là một kỹ thuật nhạy cảm trong việc phát hiện Trypanosoma cruzi trong giai đoạn mãn tính của bệnh Chagas, giai đoạn này đặc trưng bởi tình trạng nhiễm trùng thấp và dao động. Một kỹ thuật khác được đề xuất cho chẩn đoán ký sinh trùng trong giai đoạn nhiễm này kết hợp việc tìm kiếm hình thức trypomastigote di động trong mẫu phân (FS) thu được bằng phương pháp chẩn đoán nhiễm khá (XD) với PCR thông thường (XD-PCR). Trong nghiên cứu này, chúng tôi đánh giá việc sử dụng DNA máu người như một kiểm soát nội bộ ngoại sinh (EIC) cho PCR thời gian thực (qPCR) kết hợp với XD (XD-qPCR) sử dụng phát hiện nhiễm sắc thể 12 (X12). Không có mẫu phân-XD nào được đánh giá bằng qPCR có sự khuếch đại cho X12. Tuy nhiên, tất cả các hỗn hợp EIC-FS-XD đều khuếch đại cho X12. Chúng tôi xác định rằng X12 là hữu ích như một EIC cho XD-qPCR vì chúng tôi đã chỉ ra rằng FS-XD không chứa DNA người sau 30 ngày hoặc lâu hơn của việc ủ XD. Thông tin này có giá trị cho nghiên cứu về T. cruzi bằng XD-qPCR vì nó cho phép loại trừ sự ức chế và kết quả giả âm tính do mất DNA trong quá trình chiết xuất và tinh chế.
Từ khóa
#PCR #Trypanosoma cruzi #bệnh Chagas #xenodiagnosis #DNA máu ngườiTài liệu tham khảo
Virreira M, Serrano G, Maldonado L, Svoboda M: Trypanosoma cruzi: typing of genotype (sub) lineages in megacolon samples from Bolivian patients. Acta Trop. 2006, 100: 252-255. 10.1016/j.actatropica.2006.11.005.
Britto C: Usefulness of PCR-based assays to assess drug efficacy in Chagas disease chemotherapy: value and limitations. Mem Inst Oswaldo Cruz. 2009, 104: 122-135.
Botto-Mahan C, Campos R, Acuña-Retamar M, Coronado X, Cattán PE, Solari A: Temporal variation of Trypanosoma cruzi infection in native mammals in Chile. Vector Borne Zoonotic Dis. 2010, 10: 317-319. 10.1089/vbz.2009.0006.
Schijman A, Bisio M, Orellana L, Sued M, Duffy T, Mejia-Jaramillo AM, Cura C, Auter F, Veron V, Qvarnstrom Y, Deborggraeve S, Hijar G, Zulantay I, Lucero RH, Velázquez E, Tellez T, Sánchez-León Z, Galvão L: International study to evaluate PCR methods for detection of Trypanosoma cruzi DNA in blood samples from Chagas disease patients. PLoS Negl Trop Dis. 2011, 5: e931-10.1371/journal.pntd.0000931.
Zulantay I, Apt W, Valencia C, Torres A, Saavedra M, Rodríguez J, Sandoval L, Martínez G, Thieme P, Sepúlveda E: Detection of Trypanosoma cruzi in untreated chagasic patients is improved by using three parasitological methods simultaneously. J Antimicrob Chemother. 2011, 66: 2224-2226. 10.1093/jac/dkr313.
Duffy T, Bisio M, Altcheh J, Burgos JM, Diez M, Schijman AG: Accurate Real-Time PCR strategy for monitoring bloodstream parasitic loads in Chagas disease patients. PLoS Negl Trop Dis. 2009, 3: e419-10.1371/journal.pntd.0000419.
Cencig S, Coltel N, Truyens C, Carlier Y: Parasitic loads in tissues of mice infected with Trypanosoma cruzi and treated with Am Bisome. PLoS Negl Trop Dis. 2011, 5: e1216-10.1371/journal.pntd.0001216.
Castro C, Santos MC, Silveira CA: Comparative study between artificial xenodiagnosis performed immediately and four hours after venous punch. Rev Soc Bras Med Trop. 2004, 37: 128-130. 10.1590/S0037-86822004000200002.
Schenone H: Xenodiagnosis. Mem Inst Oswaldo Cruz. 1999, 94: 289-294.
Zulantay I, Apt W, Gil LC, Rocha C, Mundaca K: The PCR-based detection of Trypanosoma cruzi in the faeces of Triatoma infestans fed on patients with chronic American tripanosomiasis gives higher sensitivity and a quicker results than routine xenodiagnosis. Ann Trop Med Parasitol. 2007, 101: 673-679. 10.1179/136485907X241415.
Pita-Pereira D, Lins R, Oliveira M, Lima R, Pereira B, Moreira O: SYBR Green-based Real-Time PCR targeting kinetoplast DNA can be used to discriminate between the main etiologic agents of Brazilian cutaneous and visceral leishmaniasis. Parasit Vectors. 2012, 5: 15-10.1186/1756-3305-5-15.