Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Cảm biến sinh học mới cho việc đo estrogen nhanh chóng dựa trên tương tác ligand-receptor
Tóm tắt
Một cảm biến sinh học được phát triển nhằm mục đích phát hiện estrogen. Hệ thống cảm biến sinh học này dựa trên sự liên kết đặc hiệu của estrogen với thụ thể của nó được cố định trên điện cực đĩa vàng. ADN tái tổ hợp mã hóa miền liên kết ligand của thụ thể estrogen người được biểu hiện trong vi khuẩn bằng cách sử dụng hệ thống fusion histidine-tag. Sự biểu hiện của protein fusion được kiểm soát bởi một promoter bacteriophage T7, và protein sau đó được tinh chế trong điều kiện tự nhiên bằng phương pháp sắc ký ái lực, dựa trên sự tương tác đặc hiệu giữa thẻ histidine, nằm ở N-terminus của protein, và chất hấp phụ chelate Ni(II). Protein được cố định trên điện cực Au thông qua quá trình hóa hấp phụ trung gian Ni(II) bằng cách sử dụng thẻ histidine và acid iminodiacetic modify thiol. Các đo đạc voltammetry chu kỳ cho thấy rằng phản ứng điện hóa đảo ngược của một cặp redox ferrocyanide/ferricyanide bị ức chế bởi sự hiện diện của estrogen theo cách phụ thuộc vào nồng độ. Có vẻ hợp lý khi cho rằng tính chất tĩnh điện của lớp protein trên bề mặt điện cực đã bị thay đổi do sự tạo phức với estrogen. Những dữ liệu này cho thấy rằng cảm biến sinh học này có thể được áp dụng để đánh giá hoạt động liên kết của các hóa chất đối với thụ thể estrogen người.
Từ khóa
#Cảm biến sinh học #estrogen #liên kết ligand-thụ thể #sắc ký ái lực #điện cực vàng.Tài liệu tham khảo
R. Bolger, T. E. Wiese, K. Ervin, S. Nestich, and W. Checovich, Environ. Health Perspectives, 1998, 106, 551.
J. Nishikawa, K. Saito, F. Dakeyama, M. Matsuo, and T. Mishikawa, Toxicol. Appl. Pharmacol., 1999, 154, 76.
M. G. Parker, Vitamins and Hormones, 1995, 51, 267.
A. E. G. Cass (ed.), “Biosensores. A Practical Approach”, 1990, IRL Press, New York.
I. Willner and E. Katz, Angew. Chem. Int. Ed., 2000, 39, 1180.
T. Ihara, M. Nakayama, M. Murata, K. Nakano, and M. Maeda, Chem. Commun., 1997, 1609.
M. Maeda, K. Nakano, and M. Takagi, in “Diagnostic Biosensor Polymers”, ed. A. M. Usami and N. Akmal, 1994, American Chemical Society, Washington D.C., 238.
Y. Katayama, M. Nakayama, H. Irie, K. Nakano, and M. Maeda, Chem. Lett., 1998, 1181.
Y. Katayama, Y. Ouchi, M. Nakayama, M. Maeda, H. Higashi, and Y. Kudo, Chem. Lett., 1997, 883.
M. Sugawara, K. Kojima, H. Sazawa, and Y. Umezawa, Anal. Chem., 1987, 59, 2842.
R. White, J. A. Lee, M. Needham, J. Ham, and M. Parker, Mol. Endocrinol., 1987, 1, 735.
V. Kumar, S. Green, G. Stack, M. Berry, J-R. Jin, and P. Chambon, Cell, 1987, 51, 941.
V. Kumar and P. Chambon, Cell, 1988, 55, 145.
S. E. Fawell, J. A. Lees, R. White, and M. G. Parker, Cell, 1990, 60, 953.
H. E. Witkowska, B. N. Green, M. Carlquist, and C. H. L. Shackleton, Steroids, 1996, 61, 433.
R. J. Kavlock, G. P. Daston, C. DeRosa, P. Fenner-Crisp, L. E. Gray, S. Kaattari, G. Lucier, M. J. Mac, C. Maczka, R. Miller, J. Moore, R. Rolland, G. Scott, D. M. Sheehan, T. Sinks, and H. A. Tilson, Environ. Health Perspectives, 1996, 104 Suppl. 4, 1.