Tổn thương tế bào nội mô tiềm tàng sau khi đông lạnh giác mạc trong thí nghiệm

Michael Hagenah1, Matthias Böhnke2
1Universitäts-Augenklinik Hamburg, Germany
2Inselspital Bern, Bern, Switzerland

Tóm tắt

Chín mươi giác mạc lợn đã được đánh giá bằng nhuộm sống với alizarin đỏ S và trypan blue trong một thí nghiệm ba bước. Mật độ tế bào trung tâm đã được đếm (a) trên giác mạc mới được phẫu thuật (n = 30), (b) trên giác mạc đông lạnh ngay sau khi rã đông (n = 30), và (c) sau một khoảng thời gian nuôi cấy mô cơ quan 24 giờ sau khi rã đông (n = 30). Hai phương pháp đông lạnh đã được sử dụng: (a) môi trường thiết yếu tối thiểu — chứa 20% huyết thanh bê thai, và (b) cũng môi trường đó nhưng thêm 2% sulfat chondroitin. Ngay sau khi rã đông, không có phương pháp nào cho thấy mất mát tế bào đáng kể (3.9% và 3%) so với mô tươi. Tuy nhiên, sau khi nuôi cấy mô cơ quan sau rã đông, mô đã được đông lạnh mà không có sulfat chondroitin cho thấy mất mát tế bào 73.5% so với giác mạc cùng phương pháp đông lạnh ngay sau khi rã đông. Giác mạc trong môi trường có chứa sulfat chondroitin chỉ cho thấy mất mát tế bào 33.2%. Chúng tôi kết luận rằng việc đánh giá hình thái đáng tin cậy không nên được thực hiện từ giác mạc đã được đông lạnh mà được kiểm tra ngay sau khi rã đông.

Từ khóa

#đông lạnh giác mạc #tế bào nội mô #sulfat chondroitin #nuôi cấy mô cơ quan #đánh giá hình thái

Tài liệu tham khảo

Böhnke M (1991) Corneal preservation in organ culture. Curr Opin Ophthalmol 2:432–442

Böhnke M, Hagenah M, Draeger J (1987) Kryokonservierung von Schweinehornhäuten mit Chondroitinsulfat. Klin Monatsbl Augenheilkd 191:283–286

Bourne WM (1974) In vivo survival of cryopreserved endothelial cells in primates. Arch Ophthalmol 92:146–148

Brunette I, Nelson LR, Bourne WM (1989) Tolerance of human corneal endothelium to glycerol. Cryobiology 26:513–523

Capella JA, Kaufman HE, Polack FM (1972) Prognosis of keratoplasty in phakic and aphakic patients and use of cryopreserved tissue. Trans Am Ophthalmol Soc 76:1275–1285

Capella JA, Kaufman HE, Robbins JE (1965) Preservation of viable corneal tissue. Cryobiology 2:116–121

Clifton EC, Hanna C (1974) Corneal cryopreservation and the fate of corneal cells in penetrating keratoplasty. Am J Ophthalmol 78:239–250

Eastcott HH, Cross AG, Leigh AG, North DP (1954) Preservation of corneal grafts by freezing. Lancet 1:237–242

Ehlers N, Sperling S (1983) Ultrastructure of cryopreserved functioning human corneal endothelium. Acta Ophthalmol 61:245–253

Ehlers N, Sperling S, Olsen T (1982) Post-operative thickness and endothelial cell density in cultivated, cryopreserved human corneal grafts. Acta Ophthalmol 60:935–940

Fong LP, Hunt CJ, Taylor MJ, Pegg DE (1986) Cryopreservation of rabbit corneas: assessment by microscopy and transplantation. Br J Ophthalmol 70:751–760

Hagenah M, Böhnke M, Draeger J (1987) Kryokonservierung von Schweinehornhäuten mit extrazellulären Kryoprotektoren. Fortschr Ophthalmol 84:549–551

Hagenah M, Höhna E, Insler MS, Böhnke M, Draeger J (1990) Zur Übertragbarkeit experimenteller Befunde der Kryokonservierung mit tierischen Gewebe auf die Ergebnisse nach Kryokonservierung menschlichen Gewebes. Fortschr Ophthalmol 87:218–220

Illif CE, Wood RH, Hollander DH (1956) Successful transplantation of a frozen human cornea. Am J Ophthalmol 41:505–506

Madden PW, Easty DL (1981) Assessment and interpretation of corneal endothelial cell morphology and function following cryopreservation. Br J Ophthalmol 66:136–140

Neronov AJ, Mihailov-Boiadjieva (1989) Cryopreservation of rabbit cornea with polyethylene oxide 400. A scanning electron microscopy study. Cryo Lett 10:279–288

Neronov AJ, Goranov IT, Mihailova-Boyadjieva A (1989) Cryopreservation of rabbit corneas by combinations of dextran 40, human albumin and low doses of DMSO: a scanning electron microscopy study. Cryo Lett 10:289–298

Neubauer L, Laing RA, Leibowitz HM, Oak SS (1983) Coalescence of endothelial cells in the traumatized cornea. I. Experimental observations in cryopreserved tissue. Arch Ophthalmol 101:1787–1790

Neubauer R, Baratz RS, Laing RA, Oak SS, Leibowitz HM (1984) Coalescence of endothelial cells in the traumatized cornea. III. Correlation between specular and scanning electron microscopy. Arch Ophthalmol 102:921–922

Rich SJ, Armitage WJ (1992) Corneal tolerance of vitrifiable concentrations of glycerol. Cryobiology 29:153–164

Ryecroft BW (1957) Three unusual grafts. Br J Ophthalmol 41:759–777

Schultz RO (1971) Laboratory evaluation of cryopreserved corneal tissue. Trans Am Ophthahnol Soc 69:563–607

Singh G, Böhnke M, von Domarus D, Draeger J, Lindstrom RL, Doughman DJ (1985) Vital staining of corneal endothelium. Cornea 4:80–91

Sperling S (1981) Cryopreservation of human cadaver corneas regenerated at 31°C in a modified culture medium. Acta Ophthalmol 59:142–148

Horn DL van, Schultz RO (1974) Endothelial survival in cryopreserved human corneas: a scanning electron microscopic study. Invest Ophthalmol 13:7–16

Horn DL van, Hanna C, Schultz RO (1970) Corneal cryopreservation. II. Ultrastructural and viability changes. Arch Ophthalmol 84:665–667