Nghiên cứu thuốc nhuộm huỳnh quang Alamar Blue (resazurin) để đánh giá tính độc tế bào của tế bào động vật có vú

FEBS Journal - Tập 267 Số 17 - Trang 5421-5426 - 2000
John O’Brien1, Ian D. Wilson1, Terry C. Orton1, François Pognan1
1AstraZeneca, Alderley Park, Macclesfield, UK

Tóm tắt

Chúng tôi đã chỉ ra rằng Alamar Blue chính là resazurin. ‘Thử nghiệm giảm resazurin’ đã được sử dụng trong khoảng 50 năm để theo dõi sự ô nhiễm vi khuẩn và nấm men trong sữa, cũng như để đánh giá chất lượng tinh trùng. Resazurin (màu xanh và không phát quang) được giảm thành resorufin (màu hồng và phát quang mạnh) và tiếp tục được giảm thành hydroresorufin (không màu và không phát quang). Vẫn chưa biết quá trình giảm này xảy ra như thế nào, bên trong tế bào thông qua hoạt động enzyme hay trong môi trường như một phản ứng hóa học, mặc dù dạng huỳnh quang đã được giảm của Alamar Blue đã được phát hiện trong tế bào chất và trong nhân của các tế bào sống và tế bào chết. Gần đây, thuốc nhuộm này đã trở nên phổ biến như một cách rất đơn giản và linh hoạt để đo lường sự phát triển của tế bào và tính độc tế bào. Thuốc nhuộm này có nhiều ưu điểm so với các thử nghiệm độc tế bào hay phát triển tế bào khác, nhưng chúng tôi đã quan sát thấy một số nhược điểm trong việc sử dụng Alamar Blue thường xuyên. Các thử nghiệm với một số chất độc hại trên các dòng tế bào khác nhau và tế bào gan sơ cấp của chuột đã cho thấy sự tích lũy sản phẩm huỳnh quang của Alamar Blue trong môi trường, điều này có thể dẫn đến việc ước lượng quá mức về dân số tế bào. Hơn nữa, việc giảm mạnh Alamar Blue bởi các tế bào có hoạt động trao đổi chất dẫn đến một sản phẩm cuối không phát quang, vì vậy có thể dẫn đến việc ước lượng thấp về hoạt động tế bào.

Từ khóa


Tài liệu tham khảo

Fields R.D., 1993, Dual‐attribute continuous monitoring of cell proliferation/cytotoxicity, Am. Biotechnol. Lab., 11, 48

10.1002/jcla.1860090203

10.3168/jds.S0022-0302(50)91981-3

10.3109/01485019808987928

10.1007/s11626-998-0130-x

Pagé B., 1993, A new fluorimetric assay for cytotoxicity measurements in vitro, Int. J. Oncol., 3, 473

10.1016/s0022-1759(97)00043-4

10.1016/0022-1759(94)90396-4

10.1016/s0165-0270(96)00118-5

10.1016/B978-0-12-461201-3.50026-8

10.1093/carcin/18.5.1021

10.1046/j.1365-2605.1998.00126.x

Matsumoto K., 1990, Fluorometric determination of carnitine in serum with immobilized carnitine dehydrogenase and diaphorase, Clin. Chem., 36, 2072, 10.1093/clinchem/36.12.2072

10.1007/BF00689804

10.1006/bbrc.1994.1165

10.1016/0009-8981(80)90442-8

Thông tin
Thông tin xuất bản

FEBS Journal

Tập 267 Số 17

5421-5426

Thông tin tác giả