Các Axit Nucleic Lây Nhiễm Của Virus Bacteriophage Escherichia coli

FEBS Journal - Tập 2 Số 4 - Trang 414-428 - 1967
Rolf Benzinger1, Hajo Delius2, Rudolf Jaenisch3, P. H. Hofschneider3
1Department of Biology University of Virginia Charlottesville, Virginia, U.S.A. H. Delius
2Laboratoire de Biologie Moleculaire (Biochimie Génétique) 24, Quai de 1'Ecole de Médecine Genéve 4, Switzerland
3Max‐Planck‐Institut fur Biochemie Goethestraße 31 Munich, Germany

Tóm tắt

Các chủng khác nhau của Escherichia coli đã được nuôi trong môi trường pepton đạt mật độ 5 × 108 tế bào/ml. Sau khi trải qua các cú sốc thẩm thấu (pepton → nước → 0,4 M sucrose) hoặc điều trị bằng lysozyme‐EDTA trong môi trường ưu trương, các spheroplasts được lưu trữ ở 4° và sau đó được thử nghiệm khả năng tiếp nhận với DNA phage ØX 174 và M 13 và RNA phage M 12. Các spheroplasts lysozyme cho thấy hiệu quả cao nhất và tạo ra các khả năng lây nhiễm tối đa sau: đối với một phân tử DNA Ø× 174, 5 × 10−3 trung tâm DNA lây nhiễm; đối với một phân tử DNA M 13, 10−5 trung tâm DNA lây nhiễm; và đối với một phân tử RNA phage M 12, 2 × 10−5 trung tâm RNA lây nhiễm. Đối với nhiều chuẩn bị spheroplast, khả năng tiếp nhận vẫn gần như không thay đổi trong một tuần. Một chủng, E. coli 112–12 (λh)F+, giữ được mức độ khả năng tiếp nhận (mặc dù thấp) ở mức không thay đổi trong nhiều tháng khi được đông lạnh trong dung dịch dimethyl sulfoxide 10% (v/v).

Các thí nghiệm bão hòa DNA Ø× 174 cho thấy rằng 0,05–1% spheroplast lysozyme có khả năng tiếp nhận. Trong khoảng thời gian từ 12 đến 20 phút sau khi thêm mức không bão hòa của DNA Ø× 174 được đánh dấu bằng 32P vào các quần thể tế bào đã được tiếp nhận ở 37°, 10–20% của dấu hiệu đã được hấp thụ. Các quần thể tế bào không có khả năng tiếp nhận chỉ hấp thụ không quá 4% của dấu hiệu đã thêm vào. Việc kéo dài thời gian hấp thụ DNA không mang lại hiệu quả cao hơn trong việc lây nhiễm DNA, vì các tế bào bắt đầu mất khả năng tiếp nhận thông qua một quá trình phụ thuộc vào nhiệt độ.

Hơn 90% các trung tâm DNA Ø× 174 lây nhiễm vẫn nhạy cảm với DNAase trong 20 phút đầu tiên của quá trình hấp thụ DNA. Việc cấy các tế bào bị nhiễm DNA Ø× 174 và RNA M 12 trên môi trường agar methylene xanh eosin trong khoảng thời gian này đã ngăn chặn sự hình thành phage, trong khi khả năng hình thành đốm của phage trưởng thành không bị ức chế. Những quan sát này có thể gợi ý về tính thấm khác thường của các tế bào có khả năng tiếp nhận.

Các chất ức chế sự nhiễm RNA phage đã bị loại bỏ bằng cách rửa các tế bào có khả năng tiếp nhận. Việc điều trị tiền DNAase cho các spheroplast đã tăng cường khả năng tiếp nhận của chúng đối với RNA phage M 12 lây nhiễm.

Từ khóa


Tài liệu tham khảo

Hofschneider P. H., 1960, Z. Naturforsch., 15, 441, 10.1515/znb-1960-0707

Wahl R., 1960, Compt. Rend., 250, 4227

10.1016/S0022-2836(60)80026-5

Sekiguchi M., 1960, Biochim. Biophys. Acta, 45, 199, 10.1016/0006-3002(60)91443-8

10.1016/S0022-2836(60)80050-2

Meyer F., 1961, J. Biol. Chem., 236, 1141, 10.1016/S0021-9258(18)64256-5

Veldhuisen G., 1962, Biochim. Biophys. Acta, 61, 630

10.1002/jcp.1030600303

10.1016/0042-6822(62)90226-X

10.1007/BF00897593

10.1016/0926-6550(63)90342-6

Pouwels P. H., 1963, Biochem. Biophys. Res. Commun., 13, 83, 10.1016/0006-291X(63)90168-2

Zander H. unpublished observations.

Rueckert R. R., 1962, Virology, 17, 204, 10.1016/0042-6822(62)90101-0

10.1016/S0022-2836(62)80047-3

10.1016/0042-6822(60)90100-8

Delius H. Ph. D. dissertation Munich 1965.

Hoffmann‐Berling H., 1963, Z. Naturforsch., 18, 876, 10.1515/znb-1963-1105

10.1016/0006-291X(63)90022-6

10.1016/S0022-2836(59)80006-1

10.1016/0022-2836(66)90020-9

Nester E. W., 1963, J. Bacteriol., 86, 785, 10.1128/jb.86.4.785-796.1963

Taketo A., 1963, J. Biochem. (Japan), 54, 520, 10.1093/oxfordjournals.jbchem.a127825

Engelhardt D. L., 1964, Virology, 23, 582, 10.1016/0042-6822(64)90242-9

10.1016/0006-291X(64)90238-4

Fraser D., 1953, J. Biol. Chem., 205, 291, 10.1016/S0021-9258(19)77254-8

Ryter A., 1959, J. Ultrastructure Res., 2, 200, 10.1016/S0022-5320(58)90018-2

Hofschneider P. H., 1962, Fifth International Congress for Electron Microscopy, RR‐9

10.1016/S0021-9258(18)97200-5

Rueckert R. R., 1962, J. Mol. Biol., 5, 1, 10.1016/S0022-2836(62)80056-4

10.1016/S0021-9258(18)96497-5

Lehman I. R., 1963, Progress in Nucleic Acid Research, 84

10.1016/S0022-2836(62)80031-X

10.1126/science.146.3641.254

10.1515/znb-1963-0306

10.1073/pnas.51.3.480

10.1099/00221287-31-1-125

Weidel W., 1964, Advan. Enzymol., 26, 193

10.1016/0926-6550(63)90004-5

Huppert J, 1962, Biochim. Biophys. Acta, 55, 182, 10.1016/0006-3002(62)90944-7

Hofschneider P. H., 1961, Proceedings V. International Congress of Biochemistry, Moscow, 115

Benzinger R., 1963, Z. Vererbungslehre, 94, 316

10.1126/science.142.3594.962

Jansz H. S., 1963, Biochem. Biophys. Res. Commun., 18, 589, 10.1016/0006-291X(65)90795-3

10.1016/0022-2836(66)90023-4

Benzinger R., 1966, J. Mol. Biol., 21, 493, 10.1016/0022-2836(66)90022-2

10.1016/0006-3002(52)90227-8

Thông tin
Thông tin xuất bản

FEBS Journal

Tập 2 Số 4

414-428

Thông tin tác giả