Nhân giống in vitro cây Mận (Prunus salicina) giống ‘Santa Rosa’ và đánh giá sự ổn định di truyền bằng các dấu hiệu RAPD

Springer Science and Business Media LLC - Tập 23 - Trang 161-168 - 2018
Manisha Thakur1, Madhvi Soni1, Dharam Paul Sharma2, Manu Vivek1, Vishal Sharma1
1Department of Biotechnology, Dr Y S P University of Horticulture and Forestry, Solan, India
2Department of Fruit Science, Dr Y S P University of Horticulture and Forestry, Solan, India

Tóm tắt

Virus gây vết loét vòng chân răng Prunus (PNRSV), virus cuộn lá anh đào (CLRV) và virus đốm lá xanh táo (ACLSV) đã được sử dụng làm nguồn mẫu trong các nghiên cứu của chúng tôi với cây Mận Santa Rosa. Các chồi non được thu thập và nuôi cấy trên môi trường Murashige và Skoog (MS) với các nồng độ khác nhau của benzyl adenine (BA) và acid gibberellic (GA3) nhằm thiết lập nuôi cấy in vitro. Tỷ lệ thành công tối đa (75,92%) đạt được trên môi trường MS bổ sung với 2,0 mg L−1 BA và 0,5 mg L−1 GA3. Sự nhân lên chồi tối đa đạt được trên môi trường MS được tăng cường với 0,5 mg L−1 BA, 0,1 mg L−1 GA3, 0,05 mg L−1 IBA và 10 mg L−1 dịch thủy phân casein. Để ra rễ in vitro, các chồi được tiền xử lý trên môi trường lỏng MS nửa nồng độ chứa 5,0 mg L−1 IBA trong 24 giờ, sau đó chuyển sang môi trường MS cơ bản, cho kết quả đạt 79,80% ra rễ. Các cây con được nuôi cấy in vitro đã được cứng hóa với tỷ lệ sống sót 80–85% sau 1 tháng và đã được chuyển thành công ra đồng ruộng sau 1 năm với tỷ lệ sống sót 100%. Phân tích RAPD cho thấy tất cả các sản phẩm khuếch đại đều đồng dạng ở các cây được nhân giống vi mô và tương tự như cây mẹ. Quy trình nhân giống vi mô được phát triển phù hợp cho việc nhân giống vô tính hàng loạt cây Santa Rosa.

Từ khóa

#Prunus salicina #Santa Rosa #nhân giống in vitro #RAPD #ổn định di truyền

Tài liệu tham khảo

Adams, A. N., Guise, C. M., & Crossley, J. (1999). Plum pox virus detection in dormant plum trees by PCR and ELISA. Plant Pathology, 48, 240–244. Arab, M. M., Yadollahi, A., Shojaeiyan, A., Shokri, S., & Ghojah, S. M. (2014). Effects of nutrient media, different cytokinin types and their concentrations on in vitro multiplication of G × N15 (hybrid of almond × peach) vegetative rootstock. Journal of Genetic Engineering and Biotechnology, 12, 81–87. Barbara, N., Kazimierz, M., & Ludwik, H. (2004). Sugar uptake and utilization during adventitious bud differentiation on in vitro leaf of ‘Wegierka Zwykla’ Plum (Prunus domestica). Plant Cell, Tissue and Organ Culture, 76, 255–260. Calayan, K., Serçe, Ç. U., Gazel, M., & Jelkmann, W. (2006). Detection of four apple viruses by ELISA and RT-PCR assays in Turkey. Turkish Journal of Agriculture and Forestry, 30, 241–246. Chandel, V., Rana, T., Hallan, V., & Zaidi, A. A. (2007). Evidence for occurance of Prunus necrotic ringspot virus on peach in India. Canadian Journal of Plant Pathology, 29, 311–316. Faber, T., Lech, W., Malodobry, M., & Dziedzic, E. (2002). Assessment of growth and cropping of the Plum trees growing on Wangenheim Prune rootstock and originated from in vitro. Acta Horticulturae, 577, 51–56. Kalinina, A., & Brown, D. C. W. (2007). Micropropagation of ornamental Prunus spp. and GF305 Peach, a prunus viral indicator. Plant Cell Reports, 26, 927–935. Koubouris, G., & Vasilakakis, M. (2006). Improvement of in vitro propagation of apricot cultivar ‘Bebecou’. Plant Cell, Tissue and Organ Culture, 85, 173–180. Lech, W., Malodobry, M., Dziedzic, E., & Faber, T. (1998). Assessment of growth and cropping of the Plum tree originated from in vitro. Acta Horticulturae, 478, 187–190. Mandic, B., Matic, S., Rwahnih, M. A. L., Jelkmann, W., & Myrta, A. (2007). Viruses of sweet and sour cherry in Serbia. Journal of Plant Pathology, 89, 103–108. Minaev, V. A., Verzilin, A. V., & Vysotskii, V. A. (2003). Efficiency of clonal micropropagation and quality of improved rootstock material of apple. Sadovodstva-i-Vinogradarstvo, 4, 12–13. Murashige, T., & Skoog, F. (1962). A revised medium for rapid growth and bio assays with tobacco tissue cultures. Physiologia Plantarum, 15, 473–497. Pathak, H., & Dhawan, V. (2012). ISSR assay for ascertaining genetic fidelity of micropropagated plants of apple rootstock Merton 793. In vitro Cellular and Developmental Biology, 48, 137–143. Rana, T., Chandel, V., Hallan, V., & Zaidi, A. A. (2007). Molecular evidence of Applechlorotic leaf spot virus in wild and cultivated apricot in Himachal Pradesh, India. Journal of Plant Pathology, 89, 72–76. Rana, T., Chandel, V., Hallan, V., & Zaidi, A. A. (2009). Molecular evidence for presence of Applechlorotic leaf spot virus in infected peach trees in India. Scientia Horticulturae—Amsterdam, 120, 296–301. Rathore, J. S., Phulwaria, M., Rai, M. K., Shekhawat, S., & Shekhawat, N. S. (2015). Use of liquid culture medium and ex vitro rooting for micropropagation of Acacia nilotica (L.) Del. ssp. Cupressiformis. Indian Journal of Plant Physiology, 20, 172–176. Scott, S. W., Barnett, O. W., & Burrows, P. M. (1989). Incidence of prunus necrotic ringspot virus in selected peach orchards of South California. Plant Disease, 73, 913–916. Siril, E. A., & Dhar, U. (1997). Micropropagation of mature Chinese tallow tree (Sapium sebiferum Roxb.). Plant Cell Reports, 16, 637–640. Soliman, H. I. A. (2012). In vitro propagation of apricot (Prunus armeniaca L.) and assessment of genetic stability of micropropagated plants using RAPD analysis. World Applied Sciences Journal, 19, 674–687. Soni, M., Thakur, M., & Modgil, M. (2011). In vitro multiplication of Merton I. 793—an apple rootstock suitable for replantation. Indian Journal of Experimental Biology, 10, 362–368. Te-Chato, S., Hilae, A., & In-Peuy, K. (2008). Effects of cytokinin types and concentrations on growth and development of cell suspension culture of oil palm. Journal of Agricultural Technology, 4, 157–161. Tornero, O. P., & Burgos, L. (2000). Different media requirements for micropropagation of apricot cultivars. Plant Cell, Tissue and Organ Culture, 63, 133–141. Vinthehalter, B., & Neskovic, M. (1992). Factors affecting in vitro propagation of quince (Cydonia oblonga Mall.). Journal of Horticultural Sciences, 67, 35–43. Yildirim, H., Onay, A., Tilkat, E., & Aktürk, Z. (2011). Micropropagation of the apricot (Prunus armeniaca L.) cv. Hacıhaliloğlu by means of single node culture. Turkish Journal of Agriculture and Forestry, 35, 55–59. Zou, Z. N. (2010). Micropropagation of Chinese Plum (Prunus salicina Lindl.) using mature stem segments. Notulae Botanicae Horti Agrobotanici Cluj, 38, 214–218.