Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Hoạt tính sinh học trong ống nghiệm của ribozyme hammerhead chống C II TA - Một tiếp cận mới cho các bệnh tự miễn
Tóm tắt
Nghiên cứu này đã khảo sát tính khả thi của việc sử dụng ribozyme hammerhead chống lại C II TA, một yếu tố điều hòa chính của kháng nguyên MHC II, nhằm ức chế sự biểu hiện của các phân tử MHC II trên các tế bào Hela. Một ribozyme hammerhead (Rz464) đặc hiệu cho triplet GUC 463–465 của C II TA và gen mục tiêu của nó đã được phiên mã, sau đó được trộn lẫn và ủ trong môi trường vitro. Các sản phẩm cắt được phân tích bằng PAGE và nhuộm bạc. Rz464 sau đó đã được chèn vào vector pIRES2-EGFP (pRz464). Các transfectant ổn định của Hela với pRz464 đã được thử nghiệm để kiểm tra sự cảm ứng MHC loại II bằng interferon-gamma tái tổ hợp (IFN-γ). mRNA của C II TA được đo bằng RT-PCR. Kết quả của chúng tôi cho thấy rằng Rz464 có thể cắt riêng lẻ RNA của C II TA. Khi được kích thích bằng IFN-γ, sự biểu hiện của HLA-DR, -DP, -DQ trên Hela pRz464+ đã được kích thích, và nội dung mRNA của C II TA cũng giảm. Kết luận rút ra là Rz464 có thể ức chế C II TA và do đó, gia đình các gen được điều hòa bởi C II TA: các phân tử MHC II. Những kết quả này đã cung cấp cái nhìn sâu sắc về ứng dụng trong tương lai của Rz464 như một loại thuốc nucleic acid mới chống lại các bệnh tự miễn.
Từ khóa
#ribozyme hammerhead #C II TA #MHC II #tế bào Hela #bệnh tự miễn #interferon-gamma #RT-PCRTài liệu tham khảo
Tsark E C, Wang W, Teng Y Cet al. Differential MHC class II-mediated presentation of rheumatoid arthritis autoantigens by human dendritic cells and macrophages. J Immunol, 2002, 169(11): 6625
Czaja A J. Understanding the pathogenesis of autoimmune hepatitis. Am J Gastroenterol, 2001, 96: 1224
Stuve O, Youssef S, Slavin A Jet al. The role of the MHC class II transactivator in class II expression and antigen presentation by astrocytes and in susceptibility to central nervous system autoimmune disease. J Immunol, 2002, 169: 6720
Holling T M, van der Stoep N, Quinten Eet al. Activated human T cells accomplish MHC class II expression through T cell-specific occupation of class II transactivator promoter III. J Immunol, 2002, 168: 763
Waldburger J M, Suter T, Fontana Aet al. Selective abrogation of major histocompatibility complex class II expression on extrahematopoietic cells in mice lacking promoter IV of the class II transactivator gene. J Exp Med, 2001, 194: 393
Sullivan J M, Pietras K M, Shin B Jet al. Hammerhead ribozymes designed to cleave all human rod opsin mRNAs which cause autosomal dominant retinitis pigmentosa. Mol Vis, 2002, 8:102
Linke A T, Male D K. Strain-specific variation in constitutive and inducible expression of MHC class II, class I and ICAM-1 on rat cerebral endothelium. Immunology, 1994, 82: 88
Luder C G, Lang C, Giraldo-Velasquez Met al. Toxoplasma gondii inhibits MHC class II expression in neural antigen-presenting cells by down-regulating the class II transactivator CIITA. J Neuroimmunol, 2003, 134: 12
Luder C G, Walter W, Beuerle Bet al. Toxoplasma gondii down-regulates MHC class II gene expression and antigen presentation by murine macrophages via interference with nuclear translocation of STAT1alpha. Eur J Immunol, 2001, 31: 1475