Xác định và Phân Tích Các Phức Hợp Acetyltransferase Histone Nucleosomal Ở Nấm Men

Nhiều nghiên cứu đã liên kết việc acetyl hóa các dư lượng lysine trên các đuôi amino-terminal của các histone lõi với hoạt động phiên mã của chromatin tế bào. Những hiểu biết mới trong lĩnh vực này đã được đạt được khi xác định được acetyltransferase histone (HAT) loại A hạt nhân đầu tiên. Protein thích nghi phiên mã nấm men Gcn5 đã được xác định là một HAT hạt nhân, từ đó cung cấp một liên kết trực tiếp giữa các con đường kích hoạt phiên mã và acetyl hóa histone. Tuy nhiên, mặc dù Gcn5 tái tổ hợp có khả năng acetyl hóa hiệu quả histone H3 tự do, và, ở mức độ thấp hơn, H4, nó không có khả năng acetyl hóa các histone nucleosomal. Do đó, rất có thể rằng cần có thêm các protein khác để thực hiện acetyl hóa histone nhiễm sắc thể do Gcn5 trung gian. Chúng tôi gần đây đã chỉ ra rằng Gcn5 là đơn vị xúc tác của hai phức hợp acetyltransferase histone có trọng lượng phân tử cao trong nấm men. Ngoài các phức hợp HAT ADA và SAGA chứa Gcn5, chúng tôi đã xác định được hai phức hợp HAT khác trong nấm men. Chúng được gọi là NuA3 và NuA4 dựa trên khả năng chuyên biệt chủ yếu của chúng để acetyl hóa histone H3 và H4, tương ứng. Tại đây, chúng tôi mô tả việc xác định và đặc trưng hóa bốn phức hợp HAT hạt nhân có trọng lượng phân tử cao bản địa trong Saccharomyces cerevisiae. Các HAT đã được tinh chế này có thể được sử dụng trong nhiều bài kiểm tra chức năng khác nhau nhằm giải quyết thêm các câu hỏi về cách acetyl hóa ảnh hưởng đến điều tiết phiên mã.