Phương pháp tập trung điện di một chiều độ phân giải cao đối với các kháng nguyên MHC lớp I của chuột

Immunogenetics - Tập 32 - Trang 440-450 - 1990
Hans-Gustaf Ljunggren1, Margriet Oudshoorn-Snoek2, Maria G. Masucci1, Hidde L. Ploegh3
1Department of Tumor Biology, Karolinska Institutet, Stolkholm, Sweden
2Department of Molecular Genetics, The Netherlands Cancer Institute, Amsterdam, The Netherlands
3Department of Cellular Biochemistry, The Netherlands Cancer Institute, Amsterdam, The Netherlands

Tóm tắt

Bài báo mô tả một phương pháp so sánh sinh hóa các kháng nguyên lớp I của chuột bằng cách sử dụng kháng sinh với một mô hình phản ứng đơn hình và phương pháp tập trung điện di một chiều độ phân giải cao (1D-IEF). Các alen H-2K và D, thường xảy ra và đã được nghiên cứu nhiều nhất, đã được xác định trong một so sánh hơn 40 dòng chuột. Bằng cách so sánh các dòng chuột đột biến H-2, các dòng tế bào đã được chuyển gen xác định lớp I, hoặc các chuột chuyển gen cho một gen lớp I của chuột và các dòng chuột tái tổ hợp H-2, việc xác định không còn nghi ngờ được các alen lớp I là khả thi. Mô hình phức tạp được trình bày bởi chuột H-2-heterozygous dễ dàng được phân tích thành các đóng góp từ các alen phụ huynh riêng lẻ. Chuỗi đột biến H-2bm đã được phân tích, và đối với những đột biến mà sự khác biệt điện tích đã được dự đoán dựa trên trình tự đã biết của chúng, một sự thay đổi trong điểm isoelectric (IEP) thực sự đã được quan sát. Dựa trên phân tích bằng phương pháp IEF, đột biến bm8 có thể chứa các sự thay thế axit amin ngoài những gì đã được báo cáo. Phương pháp hiện tại dường như cũng hữu ích trong việc làm rõ các khiếm khuyết trong tổng hợp kháng nguyên lớp I và các biến đổi sau dịch mã, vì những điều này không thể được đặc trưng dễ dàng khi sử dụng nhuộm bề mặt với kháng thể đơn dòng (mAbs).

Từ khóa

#kháng nguyên lớp I #chuột #tập trung điện di một chiều #H-2 #đột biến

Tài liệu tham khảo

Archibald, A. L., Thompson, N. A., and Kvist, S.: A single nucleotide difference at the 3′ end of an intron causes differential splicing of two histocompatibility genes. EMBO J 5: 957–965, 1986 Arnold, B., Horstmann, U., Kuon, W., Burgert, H. G., Hämmerling, G. J., and Kvist, S.: Alloreactive cytotoxic T-cell clones preferentially recognize conformational determinants on histocompatibility antigens: analysis with genetically engineered hybrid antigens. Proc Natl Acad Sci USA 82: 7030–7034, 1985 Beiberich, C., Scangos, G., Tanaka, K., and Jay, G.: Regulated expression of a murine class I gene in transgenic mice. Moll Cell Biol 6: 1339–1342, 1986 Bjorkman, P. M., Saper, M. A., Samraoui, B., Bennet, W. S., Strominger, J. L., and Wiley, D. C.: Structure of the human class I histocompatibility antigen, HLA-A2. Nature 329: 506–512, 1987a Bjorkman, P. M., Saper, M. A., Samraoui, B., Bennet, W. S., Strominger, J. L., and Wiley, D. C.: The foreign antigen binding site and T cell recognition regions of Class I histocompatibility antigens. Nature 329: 512–518, 1987b DeMars, R., Ruderdorf, R., Chang, C., Peterson, J., Strandtmann, J., Korn, N., Sidwell, B., and Orr, H. T.: Mutations that impair a posttranscriptional step in expression of HLA-A and-B antigens. Proc Natl Acad Sci USA 82: 8183–8187, 1985 Flavell, R. A., Allen, H., Huber, B., Wake, C., and Widera, G.: Organization and expression of the MHC of the C57 Black/10 mouse. Immunol Rev 84: 29–50, 1985 Garrels, J. I.: The QUEST system for quantitative analysis of two dimensional gels. J Biol Chem 264: 5269–5282, 1989 Garrels, J. I. and Franza, B. R., Jr.: Transformation-sensitive and growth-related changes of protein synthesis in REF52 cells. J Biol Chem 264: 5299–5312, 1989 Goding, J. W. and Walker, I. D.: Allelic forms of β2-microglobulin in the mouse. Proc Natl Acad Sci USA 77: 7395–7399, 1980 Jones, P. P.: Analysis of H-2 and Ia molecules by two-dimenssional gel electrophoresis. J Exp Med 146: 1261–1279, 1977 Klar, D. and Hämmerling, G. J.: Induction of assembly of MHC class I heavy chains with β2-microglobulin by interferon-γ. EMBO J 8: 475–481, 1989 Klein, J., Figueroa, F., and David, C. S.: H-2 haplotypes, genes and antigenes: second listing. II. The H-2 complex. Immunogenetics 17: 553–596, 1983 Koch, S., Robinson, P. J., Koch, N., and Hämmerling, G. J.: Separation of H-2Dd, H-2Ld, and H-2Rd by two-dimensional gel electrophoresis. Immunogenetics 17: 215–218, 1983 Kvist, S., Ostberg, L., and Peterson, P. A.: Reactions and crossreactions of a rabbit anti-H-2 antigen serum. Scand J Immunol 7: 265–276, 1978 Ljunggren, H. G. and Kärre, K.: Host resistance directed selectively against H-2-deficient lymphoma variants. Analysis of the mechanism. J Exp Med 162: 1745–1759, 1985 Ljunggren, H. G., Pääbo, S., Cochet, M., Kling, G., Kourilsky, P., and Kärre, K.: Molecular analysis of H-2 deficient lymphoma lines; distinct defects in MHC class I/β2-microblogulin biosynthesis associated with increased sensitivity to NK cell lysis. J Immunol 142: 2911–2915, 1989 Ljunggren, H. G., Stam, N. J., Öhlén, L., Neefjes, J. J., Höglund, P., Heemels, M. T., Bastin, J., Schumacher, T. N. M., Townsend, A., Kärre, K., and Ploegh, H. L.: Empty MHC class I molecules come out in the cold. Nature 346: 476–480, 1990 Mellor, A. L., Golden, L., Weiss, E., Bullman, H., Hurst, J. S., James, R. F. L., Townsend, A. R. M., Taylor, P. M., Schmidt, W., Ferluga, J., Leben, L., Santamaria, M., Atfield, G., Festenstein, H., and Flavell, R. A.: Expression of murine H-2Kb histocompatibility antigens in cells transformed with cloned H-2 genes. Nature 298: 529–534, 1982 Michaelson, J.: Genetics of beta-2 microglobulin in the mouse. Immunogenetics 17: 219–260, 1983 Moore, M. W., Carbone, F. R., and Bevan, M.: Introduction of soluble protein into the class I pathway of antigen procession and presentation. Cell 54: 777–785, 1988 Nathenson, S. G., Geliebter, J., Pfaffenbach, G. M., and Zeff, R. A.: Murine major histocompatibility complex class I mutants; molecular analysis and structure function implications. Annu Rev Immunol 4: 471–502, 1986 Neefjes, J. J. and Ploegh, H. L.: Allele and locus-specific differences in cell surface expression and the association of HLA class I heavy chain with ß2-microglobulin: differential effects of inhibition of glycosylation on class I subunit association. Eur J Immunol 18: 801–810, 1988 Neefjes, J. J., Breur-Vriesendorp, B. S., van Seventer, G. A., Ivanyi, P., and Ploegh, H. L.: An improved biochemical method for the analysis of HLA-class I antigens. Definition of new HLA-class I subtypes. Hum Immunol 16: 169–181, 1986 Öhlén, C., Bastin, J., Ljunggren, H. G., Imreh, S., Klein, G., Townsend, A. R. M., and Kärre, K.: Restoration of H-2b expression and processing of endogenous antigens in the MHC class I pathway by fusion of a lymphoma mutant to L-cells of the H-2k haplotype. Eur J Immunol, in press, 1990 Ostrand-Rosenberg, S., Nickerson, D. A., Clements, V. K., Garcia, E. P., Lamonse-Smith, E., Hood, L., and Stroynowski, I.: Embryonal carcinoma cells express Qa and Tla class I genes of the major histocompatibility complex. Proc Natl Acad Sci USA 86: 5084–5088, 1989 Robinson, P. J.: Structure and expression of polypeptides encoded in the mouse Qa region. Immunol Res 6: 46–56, 1987 Salter, R. D. and Cresswell, P.: Impaired assembly and transport of HLA-A and-—Baantigens in a mutant TXB hybrid. EMBO J 5: 943–949, 1986 Scholten, P., Schuurman, R.,aand Ploegh, H. L.: Activation of human B cells: involvement of surface immunoglobulin as evidenced by two biochemically distinct types of response to Staphylococcus aureus. Hum Immunol 16: 1–13, 1986 Snoek, M., Ivanyi, D., Nusse, R., and Demant, P.: A new H-2.1-positive D-region allele, D dx, controlling two molecules, H-2Ddx and H-2Ldx. Immunogenetics 8: 109–125, 1979 Townsend, A. R. M., Gotch, F. M. and Davey, J.: Cytotoxic T cells recognize fragments of influenza nucleoprotein. Cell 42: 457–467, 1985 Townsend, A. R. M., Rothbard, J., Gotch, F. M., Bahadur, G., Wraith, D., and McMichael, A. J.: The epitopes of influenza nucleoprotein recognized by cytotoxic T lymphocytes can be defined with short synthetic peptides. Cell 44: 959–968, 1986 Townsend, A. R. M., Öhlén, C., Bastin, J., Ljunggren, H. G., Foster, L., and Kärre, K.: Association of class I histocompatibility heavy and light chains induced by viarl peptides. Nature 340: 443–448, 1989 Vasilov, R. G., Hahn, A., Mölders, H., van Rood, J. J., Breuning, M., and Ploegh, H. L.: Analysis of human class I antigens by two dimensional gel electrophoresis. Immunogenetics 17: 333–356, 1983 Weiss, E. H., Golden, L., Fahrer, K., Mellor, A. L., Devlin, J. J., Bullman, H., Tiddens, H., Bud, H., and Flavell, R. A.: Organization and evolution of the class I gene family in the major histocompatibility complex of the C57BL/10 mouse. Nature 310: 650–655, 1984