Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Xác định HLA-B27 bằng các phương pháp huyết thanh học. So sánh giữa xét nghiệm miễn dịch enzym và xét nghiệm vi lympho bạch huyết học với phương pháp nhuộm tế bào dòng chảy và xét nghiệm sinh học phân tử
Tóm tắt
Việc xác định HLA-B27 thường được thực hiện cho các bệnh nhân mắc bệnh viêm khớp không có miễn dịch. Ngoài xét nghiệm vi lympho bạch huyết học (MLCT), đã có một số kỹ thuật huyết thanh học khác được phát triển, chẳng hạn như xét nghiệm miễn dịch enzym (EIA) sử dụng huyết thanh hoặc huyết tương làm nguồn xác định HLA-B27 hòa tan (sHLA-B27) và các phương pháp nhuộm tế bào dòng chảy (FC). Mục tiêu của nghiên cứu hiện tại là kiểm tra độ chính xác và độ tin cậy của EIA đối với sHLA-B27 so với MLCT bằng cách sử dụng kháng thể chống lại HLA-B27 và các đặc tính phản ứng chéo (CRS), cũng như một phương pháp FC và một phương pháp sinh học phân tử. Bất kỳ kết quả nào không đồng nhất nên được xác định lại bằng MLCT sử dụng bộ kháng thể chống lại HLA lớp I hoàn chỉnh, thông qua phương pháp FC và phương pháp sinh học phân tử. EIA cũng nên được lặp lại cho những bệnh nhân đó, sử dụng huyết tương và huyết thanh từ một lần chọc ven mới. Trong số 81 bệnh nhân mắc các rối loạn thấp khớp, EIA và MLCT với kháng thể chống lại HLA-B27 và CRS đã được thực hiện. Dựa trên MLCT với bộ kháng thể chống lại HLA lớp I hoàn chỉnh làm tiêu chuẩn, kết quả xét nghiệm không đồng nhất đã được thu được cho 9 trong 81 bệnh nhân với MLCT sử dụng kháng thể chống lại HLA-B27 và CRS và với EIA. Những kết quả sai sót sau đây đã xảy ra: trong MLCT với anti-HLA-B27 và CRS có hai kết quả âm tính giả; trong EIA có bốn kết quả âm tính giả và một kết quả dương tính giả: một mẫu không thể xác định. So với MLCT, bao gồm bộ kháng thể HLA lớp I hoàn chỉnh, cũng như với một kỹ thuật sinh học phân tử, việc xác định bằng FC cho thấy sự nhất quán hoàn toàn. Các cuộc điều tra của chúng tôi đã chứng minh rằng để xác định định kỳ HLA-B27, MLCT không thể thay thế cho EIA do số lượng sai sót đáng kể. MLCT chỉ được thực hiện bằng kháng thể chống lại HLA-B27 và CRS cũng có thể dẫn đến lỗi xác định. Không phát hiện lỗi nào khi sử dụng phương pháp nhuộm tế bào dòng chảy. Nếu chỉ có thể thực hiện các phương pháp huyết thanh học trong một phòng thí nghiệm, thì sự kết hợp giữa nhuộm tế bào dòng chảy và MLCT có thể nâng cao độ an toàn của việc xác định HLA-B27.
Từ khóa
#HLA-B27 #xét nghiệm miễn dịch enzym #xét nghiệm vi lympho bạch huyết học #phương pháp nhuộm tế bào dòng chảy #xét nghiệm sinh học phân tửTài liệu tham khảo
Calin A (1989) Ankylosing spondylitis. In: Kelley WN, Harris ED Jr, Ruddy S, Sledge CB (eds) Textbook of rheumatology. Saunders, Philadelphia, pp 1021–1052
Brewerton DA, Caffrey M, Hart FD, James DCO, Nicholls A, Sturrock RD (1973) Ankylosing spondylitis and HLA-B27. Lancet I:904–907
Schlosstein L, Terasaki PI, Bluestone R, Pearson CM (1973) High association of HL-A antigen, W27, with ankylosing spondylitis. N Engl J Med 288:704–706
Nickerson CL, Luthra HS, David CS (1990) Role of enterobacteria andHLA-B27 in spondyloarthropathies: studies with transgenic mice. Ann Rheum Dis 49:426–433
Gladman DD, Anhorn KAB, Schachter RK, Mervart H (1986) HLA antigens in psoriatic arthritis. J Rheumatol 13:586–592
Gladman DD, Brubacher B, Buskila D, Langevitz P, Farewell VT (1992) Psoriatic spondyloarthropathy in men and women: a clinical, radiographic, and HLA study. Clin Invest Med 15:371–375
Kellner H, Yu D (1992) The pathogenetic aspects of spondyloarthropathies from the point of view of HLA-B27. Rheumatol Int 12:121–127
López de Castro JA (1994) Structure, function, and disease association of HLA-B27. Curr Opin Rheumatol 6:371–377
Brand DL, Ray JG Jr, Hare DB, Kayhoe DE, McClelland JD (1970) Preliminary trials toward standardization of leucocyte typing. In: Terasaki PI (ed) Histocompatibility testing 1970. Munksgaard, Copenhagen, pp 357–367
Albrecht J, Müller HAG (1987) HLA-B27 typing by use of flow cytofluorometry. Clin Chem 33:1619–1623
Janssen WCM, Rouwen JACN, Hoffmann JJML (1992) Improved flow cytometric method for HLA-B27 typing. Ann Clin Biochem 29:663–667
Ax W (1991) Das HLA System: 1327 Typisierung mit Hilfe der Flow-Zytometrie. Klin Lab 9:267
Orr K, Thomson GTD, Alfa M (1994) Utilization of commercial antisera and flow cytometry in HLA-B27 typing. Cytometry 18:17–20
Hulstaert F, Albrecht J, Hannet I, Lancaster P, Buchner L, Kunz J, Falkenrodt A, Tongio M, De Keyser F, Veys EM, Noens L, Mir N, Costello C, Becker R, Strauss K (1994) An optimized method for routine HLA-B27 screening using flow cytometry. Cytometry 18:21–29
Doxiadis I, Westhoff U, Grosse-Wilde H (1989) Quantification of soluble HLA class I gene products by an enzyme linked immunosorbent assay. Blut 59:449–454
Samoso S, Kiefel V, Volz H, Mueller-Eckhardt C (1992) Quantitation of soluble HLA class I antigen in human albumin and immunoglobulin preparations for intravenous use by solid-phase immunoassay. Vox Sang 62:29–33
Chang CH, Ferrone S, Pouletty P (1991) sHLA-STAT B27. An ELISA for HLA typing using serum. Hum Immunol 32 [Suppl 1]:289
Huetz F, Lucotte G, Kahan A, Amor B (1987) Polymorphisme de restriction Taq I et allèle HLA B27 dans la spondylarthrite ankylosante. Rev Rhum 54:175–178
Ness DB, Grumet FC (1987) New polymorphisms of HLA-B27 and other B locus antigens detected by RFLP using a locus-specific probe. Hum Immunol 18:65–73
Steffens-Nakken HM, Zwart G, van den Bergh FAJTM (1995) Validation of allele-specific polymerase chain reaction for DNA typing of HLA-B27. Clin Chem 41:687–692
Olerup O (1994) HLA-B27 typing by group-specific PCR amplification. Tissue Antigens 43:253–256
Middleton D, Williams F, Cullen C, Mallon E (1995) Modification of an HLA-B PCR-SSOP typing system leading to improved allele determination. Tissue Antigens 45:232–236
Lôpez-Larrea C, Sujirachato K, Mehra NK, Chiewsilp P, Isarangkura D, Kanga U, Dominguez O, Coto E, Pena M, Setién F, Gonzalez-Roces S (1995) HLA-B27 subtypes in Asian patients with ankylosing spondylitis. Tissue Antigens 45:169–176
Pouletty P, Chang C, Kalil J, Atwood E, Ferrone S, Shimizu B, Howson W, Mazaheri R, Del Villano B, Grumet C (1993) Typing of serum-soluble HLA-B27 antigen by ELISA. Tissue Antigens 42:14–19
Miller SA, Dykes DD, Polesky HF (1988) A simple salting out procedure for extracting DNA from human nucleated cells. Nucleic Acids Res 16:1215
Craxton M (1991) Linear amplification sequencing, a powerful method for sequencing. Methods: a companion to Methods Enzymol 3:20–26
Fischer GF, Faé I, Petrasek M, Haas H, Mayr WR (1995) An HLA-DR I I variant (HLA-DRB 1 * 1115) segregating in a family of Turkish origin. Tissue Antigens 45:145–147
Neumüller J, Fischer M, Ebert R (1993) Failure of the serological determination of HLA-B27 due to antigen masking in patients with ankylosing spondylitis. Rheumatol Int 13:163–167
Krangel MS (1986) Secretion of HLA-A and -13 antigens via an alternative RNA splicing pathway. J Exp Med 163:1173–1190
Krangel MS (1987) Two forms of HLA class I molecules in human plasma. Hum Immunol 20:155–165
Dobbe LME, Stam NJ, Neefjes JJ, Giphart MJ (1988) Biochemical complexitiy of serum HLA class I molecules. Immunogenetics 27:203–210
Grosse-Wilde H, Doxiadis I (1989) Allotyping for HLA class I using plasma as antigen source. J Immunogenet 16:149–155
Grumet FC, Buelow R, Grosse-Wilde H, Kubens B, Garovoy M, Pouletty P (1994) Report of the second international soluble HLA (sHLA) workshop. Hum Immunol 40:153–160
Zavazava N, Wobst B, Ferstl R, Müller-Ruchholtz W (1994) Soluble MHC class I molecules in human body fluids. J Clin Lab Anal8:432–436
Ferrone S, Yamamura M, Grosse-Wilde H, Pouletty P (1992) W14.1 Summary of the serum-soluble HLA class I antigen component. In: Tsuji K, Aizawa M, Sasazuki T (eds) HLA 1991. Oxford University Press, Oxford, pp 1057–1061
Puppo F, Scudeletti M, Indiveri F, Ferrone S (1995) Serum HLA class I antigens: markers and modulators of an immune respone? Immunol Today 16:124–127
Tsuchiya N, Husby G, Williams RC Jr (1989) Studies of humoral and cell-mediated immunity to peptides shared by HLA-27.1 Klebsiella pneumoniae nitrogenase in ankylosing spondylitis. Clin Exp Immunol 76:354–360
Toubert A, Hamachi M, Raffoux C, Park MS, Yu DTY (1990) Epitope mapping of an HLA-B27 monoclonal antibody that also reacts with a 35-kD bacterial outer-membrane protein. Clin Exp Immunol 82:16–20
Groß U, Chen J-H, Kono DH, Yu DTY (1990) A ribosomal protein ofYersinia pseudotuberculosis having partial epitope identity with HLA-B27. Autoimmunity 7:267–277
Russo C, Fotino M, Carbonara A, Ferrone S (1987) A double determinant immunoassay for HLA class I typing using serum as an antigen source. Hum Immunol 19:69–77