Fibrillarin: một protein mới của nhân con được xác định bởi huyết thanh tự miễn
Tóm tắt
Huyết thanh tự miễn từ một bệnh nhân mắc bệnh xơ cứng bì đã được xác định thông qua kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang gián tiếp cho thấy nó bám vào các nhân con trong nhiều loại tế bào khác nhau bao gồm: tế bào chuột kangaroo PtK2, Xenopus A6, 3T3, HeLa và bạch cầu lympho máu ngoại vi của người. Phân tích miễn dịch điện di của protein nhân con với kháng thể xơ cứng bì đã cho ra một dải protein đơn độc với trọng lượng phân tử 34 kD có pI là 8.5. Kỹ thuật miễn dịch điện tử hiển vi cho thấy protein được nhận biết bởi huyết thanh xơ cứng bì được định vị hoàn toàn ở vùng sợi của nhân con, bao gồm cả vùng sợi dày đặc và vùng trung tâm sợi. Do đó, chúng tôi đã đặt tên cho protein này là “fibrillarin”. Fibrillarin được tìm thấy trên các vùng tổ chức nhân con (NORs) giả thuyết của nhiễm sắc thể trong kỳ giữa và kỳ sau, và trong kỳ cuối, fibrillarin được xác định là dấu hiệu sớm cho vị trí hình thành của nhân con mới hình thành. Kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang đôi và miễn dịch điện tử trên các nhân con bình thường, được phân tách bằng actinomycin D, và nhân con được điều trị bằng DRB cho thấy fibrillarin và protein nhân con B23 chủ yếu được định vị tại các vùng sợi và hạt của nhân con tương ứng. Sự tiêu hóa bằng RNase A và DNase I của các tế bào trong tình trạng hiện trường cho thấy fibrillarin bị loại bỏ một phần bởi RNase và bị loại bỏ hoàn toàn bởi DNase. Những kết quả này gợi ý rằng fibrillarin là một protein nhân con cơ bản không phải histone phổ biến, và vị trí cùng độ nhạy với nuclease của nó có thể chỉ ra vai trò cấu trúc và/hoặc chức năng nào đó trong các vùng sợi dày chứa rDNA và vùng trung tâm sợi của nhân con.