Sự giảm biểu hiện của các giọt lipid gan trong mô hình thoát vị hoành bẩm sinh do nitrofen

Pediatric Surgery International - Tập 32 - Trang 155-160 - 2015
Hiromizu Takahashi1, Balazs Kutasy1, Florian Friedmacher1, Toshiaki Takahashi1, Prem Puri1
1Our Lady’s Children’s Hospital, National Children’s Research Centre, Dublin 12, Ireland

Tóm tắt

Tỷ lệ tử vong trước sinh ở trẻ sơ sinh mắc thoát vị hoành bẩm sinh (CDH) được cho là liên quan đến lượng lớn gan thoát vị qua khuyết thiếu hoành. Các nghiên cứu tiền sinh trên thai nhi người và chuột có CDH đã cho thấy sự đóng góp của gan đang phát triển trong sinh bệnh học của CDH. Sự phát triển gan bất thường trong các mô hình động vật thí nghiệm, do đó, cho thấy sự gián đoạn phát triển gan bình thường ở CDH. Tuy nhiên, những thay đổi cấu trúc, mô học và chức năng cơ bản trong gan của động vật mắc CDH vẫn chưa rõ ràng. Chúng tôi thiết kế nghiên cứu này để kiểm tra giả thuyết rằng sự phát triển hình thái và tế bào ở gan bị thay đổi trong mô hình CDH do nitrofen gây ra. Chuột mang thai được tiếp xúc với dầu ô liu hoặc nitrofen vào ngày thứ 9 của thai kỳ (D9). Gan và ngực được thu hoạch vào ngày D21 và chia thành hai nhóm: đối chứng (n = 8), nitrofen với CDH (CDH, n = 8). Nhuộm hematoxylin–eosin (Straub et al. Histopathology 68:617–631, 2013) được thực hiện để đánh giá những thay đổi hình thái cơ bản. Thử nghiệm apoptosis được kiểm tra bằng cách sử dụng nhuộm TUNEL và số lượng tế bào apoptotic được đếm trên 16–16 khung trong 25 trường do hai người đánh giá độc lập thực hiện. Biểu hiện các giọt lipid gan được đánh giá thông qua biểu hiện protein liên quan đến phân biệt tế bào mỡ gan (ARDP). So với nhóm đối chứng, nhóm CDH cho thấy sự tăng trưởng bất thường rõ rệt. Số lượng tế bào apoptosis tăng đáng kể được phát hiện ở nhóm CDH so với nhóm đối chứng (5.1 ± 1.5 so với 2.1 ± 0.6) (p < 0.05). Mức độ biểu hiện mRNA tương đối của ARDP giảm đáng kể trong nhóm CDH so với nhóm đối chứng. Miễn dịch hóa học cho thấy sự giảm đáng kể tính nhạy cảm miễn dịch ADRP ở gan của thai nhi CDH so với nhóm đối chứng. Các phát hiện của chúng tôi cung cấp bằng chứng mạnh mẽ về sự phì đại gan và tăng số lượng tế bào apoptosis trong gan của CDH do nitrofen gây ra. Những thay đổi hình thái này có thể ảnh hưởng đến chức năng biểu hiện giọt lipid gan.

Từ khóa

#thoát vị hoành bẩm sinh #hình thái học gan #apoptosis #biểu hiện lipid #mô hình nitrofen

Tài liệu tham khảo

Colvin J, Bower C, Dickinson JE et al (2005) Outcomes of congenital diaphragmatic hernia: a population-based study in Western Australia. Pediatrics 116:e356–e363 Straub BK, Gyoengyoesi B, Koenig M et al (2013) Adipophilin/perilipin-2 as a lipid droplet-specific marker for metabolically active cells and diseases associated with metabolic dysregulation. Histopathology 62:617–631 Stege G, Fenton A, Jaffray B (2003) Nihilism in the 1990s: the true mortality of congenital diaphragmatic hernia. Pediatrics 112:532–535 Robinson PD, Fitzgerald DA (2007) Congenital diaphragmatic hernia. Paediatric respiratory reviews 8:323–334 (quiz 334–325) Werner NL, Coughlin M, Kunisaki SM et al (2015) Prenatal and postnatal markers of severity in congenital diaphragmatic hernia have similar prognostic ability. Prenatal Diag. doi:10.1002/pd.4721 Zamora IJ, Olutoye OO, Cass DL et al (2014) Prenatal MRI fetal lung volumes and percent liver herniation predict pulmonary morbidity in congenital diaphragmatic hernia (CDH). J Pediatr Surg 49:688–693 Nagata K, Usui N, Terui K et al (2015) Risk factors for the recurrence of the congenital diaphragmatic hernia-report from the long-term follow-up study of Japanese CDH study group. Eur J Pediatr Surg 25:9–14 Terui K, Nagata K, Hayakawa M et al (2015) Growth assessment and the risk of growth retardation in congenital diaphragmatic hernia: a long-term follow-up study from the Japanese congenital diaphragmatic hernia study group. Eur J Pediatr Surg [Epub ahead of print] Langwieler T, Fiegel HC, Alaamian M et al (2004) The relationship of diaphragmatic defect, liver growth, and lung hypoplasia in nitrofen-induced congenital diaphragmatic hernia in the rat. Pediatr Surg Int 20:509–514 Tobin KA, Harsem NK, Dalen KT et al (2006) Regulation of ADRP expression by long-chain polyunsaturated fatty acids in BeWo cells, a human placental choriocarcinoma cell line. J Lipid Res 47:815–823 Friedmacher F, Fujiwara N, Hofmann AD et al (2014) Evidence for decreased lipofibroblast expression in hypoplastic rat lungs with congenital diaphragmatic hernia. Pediatr Surg Int 30:1023–1029 Shi HB, Yu K, Luo J et al (2015) Adipocyte differentiation-related protein promotes lipid accumulation in goat mammary epithelial cells. J Dairy Sci 98:6954–6964 Montedonico S, Nakazawa N, Puri P (2008) Congenital diaphragmatic hernia and retinoids: searching for an etiology. Pediatr Surg Int 24:755–761 Noble BR, Babiuk RP, Clugston RD et al (2007) Mechanisms of action of the congenital diaphragmatic hernia-inducing teratogen nitrofen. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 293:L1079–L1087 Kutasy B, Gosemann JH, Doi T et al (2012) Nitrofen interferes with trophoblastic expression of retinol-binding protein and transthyretin during lung morphogenesis in the nitrofen-induced congenital diaphragmatic hernia model. Pediatr Surg Int 28:143–148 Gosemann JH, Doi T, Kutasy B et al (2012) Alterations of peroxisome proliferator-activated receptor gamma and monocyte chemoattractant protein 1 gene expression in the nitrofen-induced hypoplastic lung. J Pediatr Surg 47:847–851 Kling DE, Cavicchio AJ, Sollinger CA et al (2010) Nitrofen induces apoptosis independently of retinaldehyde dehydrogenase (RALDH) inhibition. Birth Defects Res B Dev Reprod Toxicol 89:223–232 Manson JM (1986) Mechanism of nitrofen teratogenesis. Environ Health Perspect 70:137–147 Brown TJ, Manson JM (1986) Further characterization of the distribution and metabolism of nitrofen in the pregnant rat. Teratology 34:129–139 Clugston RD, Zhang W, Greer JJ (2012) Early development of the primordial mammalian diaphragm and cellular mechanisms of nitrofen-induced congenital diaphragmatic hernia. Birth Defects Res A Clin Mol Teratol 88:15–24 Columbano A, Shinozuka H (1996) Liver regeneration versus direct hyperplasia. FASEB J 10:1118–1128 Michalopoulos GK, DeFrances MC (1997) Liver regeneration. Science 276:60–66