Biểu hiện của thụ thể hoạt hóa protease chức năng 1 trong các dòng tế bào ung thư tuyến tiền liệt của con người

Urological Research - Tập 31 - Trang 163-168 - 2003
Jian Liu1, Manuela Bastian1, Peter Kohlschein1, Peter Schuff-Werner1, Michael Steiner1
1University of Rostock, Medical Faculty, Germany

Tóm tắt

Các thụ thể hoạt hóa protease (PAR) có chức năng đã được biểu hiện bởi nhiều loại tế bào ác tính. Trong nghiên cứu hiện tại, các thử nghiệm RT-PCR cho thấy sự biểu hiện của mRNA thụ thể thrombin PAR-1 trong các dòng tế bào ung thư tuyến tiền liệt của con người như DU 145, LnCAP và dòng tế bào biểu mô tuyến tiền liệt người PNT1A đã được bất tử hóa bằng SV40. Ngược lại, các thụ thể thrombin bổ sung PAR-3 và PAR-4 không được phát hiện. Protein PAR-1 có mặt ở bề mặt tế bào được phát hiện bằng phương pháp phân tích tế bào bằng dòng chảy trong cả ba dòng tế bào. Để chứng minh tầm quan trọng chức năng của PAR-1, các tác động của các nồng độ thrombin khác nhau lên động lực học sinh sản của tế bào đã được đánh giá. Việc điều trị các tế bào bị ngừng phát triển với các nồng độ thrombin khác nhau đã cho thấy hiệu ứng phụ thuộc vào liều và thời gian. Ở nồng độ thấp (<0.5 U/ml), thrombin đã kích thích sự phát triển của tất cả các dòng tế bào có nguồn gốc từ tuyến tiền liệt. Thrombin ở nồng độ cao hơn (1.0 U/ml) ban đầu kích thích các tế bào PNT1A và LnCAP phát triển (thời gian ứng dụng thrombin 24 h và 48 h) sau đó bị ức chế tăng trưởng khi đánh giá sau 72 h ủ. Ngược lại, 1.0 U/ml thrombin đã gây ức chế sớm sự phát triển của DU 145 bắt đầu từ 48 h ủ. Kết quả của chúng tôi gợi ý rằng PAR-1 đóng vai trò trung gian trong các hiệu ứng điều biến sự phát triển của thrombin đối với các tế bào ung thư tuyến tiền liệt.

Từ khóa

#thụ thể hoạt hóa protease #PAR-1 #thrombin #tế bào ung thư tuyến tiền liệt #sinh sản tế bào

Tài liệu tham khảo

Ahmad R, Knafo L, Xu J, Sindhu ST, Menezes J, Ahmad A (2000) Thrombin induces apoptosis in human tumor cells. Int J Cancer 87:707 Ahmad R, Menezes J, Ahmad A (2000) Signaling mechanism in the induction of apoptosis by thrombin in human tumor cells. Blood 96:4001 Buckley CD, Pilling D, Henriquez NV, Parsonage G, Threlfall K, Scheel-Toellner D, Simmons DL, Akbar AN, Lord JM, Salmon M (1999) RGD peptides induce apoptosis by direct caspase-3 activation. Nature 397:534 Coughlin SR (2000) Thrombin signalling and protease-activated receptors. Nature 407:258 Cussenot O, Berthon P, Berger R, Mowszowicz I, Faille A, Hojman F, Teillac P, Le Duc A, Calvo F (1991) Immortalization of human adult normal prostatic epithelial cells by liposomes containing large T-SV 40 gene. J Urol 143:881 Even-Ram S, Uziely B, Cohen P, Grisaru-Granovsky S, Maoz M, Ginzburg Y, Reich R, Vlodavsky I, Bar-Shavit R (1998) Thrombin receptor overexpression in malignant and physiological invasion processes. Nature Med 4:909 Horoszewicz JS, Leong SS, Kawinski E, Karr JP, Rosenthal H, Chu TM, Mirand EA, Murphy GP (1983) LNCaP model of human prostatic carcinoma. Cancer Res 43:1809 Hou L, Howells GL, Kapas S, Macey MG (1998) The protease-activated receptors and their cellular expression and function in blood-related cells. Br J Haematol 101:1 Huang YQ, Li JJ, Karpatkin S (2000) Thrombin inhibits tumor cell growth in association with up-regulation of p21waf/cip1 and caspases via a p53-independent, STAT-1-dependent pathway. J Biol Chem 275:6462 Huang YQ, Li JJ, Hu L, Lee M, Karpatkin S (2001) Thrombin induces increased expression and secretion of VEGF from human FS4 fibroblasts, DU 145 prostate cells and CHRF megakaryocytes. Thromb Haemost 86:1094 Kamath L, Meydani A, Foss F, Kuliopulos A (2001) Signaling from protease-activated receptor-1 inhibits migration and invasion of breast cancer cells. Cancer Res 61:5933 Kaufmann R, Patt S, Schafberg H, Kalff R, Neupert G, Nowak G (1998) Functional thrombin receptor PAR1 in primary cultures of human glioblastoma cells. Neuroreport 9:709 Kaufmann R, Patt S, Zieger M, Kraft R, Tausch S, Henklein P, Nowak G (2000) The two-receptor system PAR-1/PAR-4 mediates α-thrombin-induced [Ca2+]i mobilization in human astrocytoma cells. J Cancer Res Clin Oncol 126:91 Kettner C, Shaw E (1979) D-Phe-Pro-ArgCH2Cl a selective affinity label for thrombin. Thromb Res 14:969 Klepfish A, Greco MA, Karpatkin S (1993) Thrombin stimulates melanoma tumor-cell binding to endothelial cells and subendothelial matrix. Int J Cancer 53:978 Lecrone V, Li W, Devoll RE, Logothetis C, Farach-Carson MC (2000) Calcium signals in prostate cancer cells: specific activation by bone-matrix proteins. Cell Calcium 27:35 Nguyen KT, Eskin SG, Patterson C, Runge MS, McIntire LV (2001) Shear stress reduces protease activated receptor-1 expression in human endothelial cells. Ann Biomed Eng 29:145 Nierodzik ML, Kajumo F, Karpatkin S (1992) Effect of thrombin treatment of tumor cells on adhesion of tumor cells to platelets in vitro and metastasis in vivo. Cancer Res 52:3267 Nierodzik ML, Bain MR, Liu LX, Shivji M, Takeshita K, Karpatkin S (1996) Presence of the seven transmembrane thrombin receptor on human tumour cells: effect of activation on tumour adhesion to platelets and tumour tyrosine phosphorylation. Br J Haematol 92:452 Nierodzik ML, Chen K, Takeshita K, Li JJ, Huang YQ, Feng XS, D'Andrea MR, Andrade-Gordon P, Karpatkin S (1998) Protease-activated receptor 1 (PAR-1) is required and rate-limiting for thrombin-enhanced experimental pulmonary metastasis. Blood 92:3694 Oleksowiecz L, Dutcher JP, DeLeon-Fernandez M, Etkind P (1997) A GPIb alpha-related protein is expressed by fresh human breast carcinoma tissue and is regulated by a PKC-sensitive mechanism. Exp Cell Res 237:110 Ordonez NG (1998) Thrombomodulin expression in transitional cell carcinoma. Am J Clin Pathol 110:385 Prenzel N, Zwick E, Daub H, Leserer M, Abraham R, Wallasch C, Ullrich A (1999) EGF receptor transactivation by G-protein-coupled receptors requires metalloproteinase cleavage of proHB-EGF. Nature 402:884 Rasmussen UB, Vouret-Craviari V, Jallat S, Schlesinger Y, Pages G, Pavirani A, Lecocq JP, Pouyssegur J, Van Obberghen-Schilling E (1991) cDNA cloning and expression of a hamster alpha-thrombin receptor coupled to Ca2+ mobilization. FEBS Lett 288:123 Rudroff C, Schafberg H, Nowak G, Weinel R, Scheele J, Kaufmann R (1998) Characterization of functional thrombin receptors in human pancreatic tumor cells (MIA PACA-2). Pancreas 16:189 Schafberg H, Nowak G, Kaufmann R (1997) Thrombin has a bimodal effect on glioma cell growth. Br J Cancer 76:1592 Shimizu S, Gabazza EC, Hayashi T, Ido M, Adachi Y, Suzuki K (2000) Thrombin stimulates the expression of PDGF in lung epithelial cells. Am J Physiol 279:L503 Stone KR, Mickey DD, Wunderli H, Mickey GH, Paulson DF (1978) Isolation of a human prostate carcinoma cell line (DU 145). Int J Cancer 21:274 Vu TK, Hung DT, Wheaton VI, Coughlin SR (1991) Molecular cloning of a functional thrombin receptor reveals a novel proteolytic mechanism of receptor activation. Cell 64:1057 Walz DA, Fenton JW (1995) The role of thrombin in tumor cell metastasis. Invasion Metast 14:303 Wasilenko WJ, Cooper J, Palad AJ, Somers KD, Blackmore PF, Rhim JS, Wright GLJr, Schellhammer PF (1997) Calcium signaling in prostate cancer cells: evidence for multiple receptors and enhanced sensitivity to bombesin/GRP. Prostate 30:167 Weinstein JR, Gold SJ, Cunningham DD, Gall CM (1995) Cellular localization of thrombin mRNA in rat brain: expression by mesencephalic dopaminergic neurons and codistribution with prothrombin mRNA. J Neurosci 15:2906 Wojtukiewicz MZ, Tang DG, Ben-Josef E, Renaud C, Walz DA, Honn KV (1995) Solid tumor cells express functional "tethered ligand" thrombin receptor. Cancer Res 55:698 Wojtukiewicz MZ, Rucinska M, Zimnoch L, Jaromin J, Piotrowski Z, Rozanska-Kudelska M, Kisiel W, Kudryk BJ (2000) Expression of prothrombin fragment 1+2 in cancer tissue as an indicator of local activation of blood coagulation. Thromb Res 97:335 Zacharski LR, Memoli VA, Morain WD, Schlaeppi JM, Rousseau SM (1995) Cellular localization of enzymatically active thrombin in intact human tissues by hirudin binding. Thromb Haemost 73:793 Zain J, Huang YQ, Feng X, Nierodzik ML, Li JJ, Karpatkin S (2000) Concentration-dependent dual effect of thrombin on impaired growth/apoptosis or mitogenesis in tumor cells. Blood 95:3133