Biểu hiện mucopolysaccharide sulfat hóa trong sụn khí quản chuột với kỹ thuật diaminobenzidine-osmium tetroxide

Springer Science and Business Media LLC - Tập 4 - Trang 205-211 - 1972
G. Monga1, Maria G. Canese1, G. Bussolati1
1Centro di Microscopia Elettronica della Facoltà di Medicina e Chirurgia, I° and II° Instituto di Anatomia e Istologia Patologica, Università di Torino, Italy

Tóm tắt

Phương pháp diaminobenzidine-osmium tetroxide để chứng minh mucopolysaccharide sulfat hóa đã được kiểm tra ở mức độ vi mô electron. Phản ứng (bao gồm việc xử lý bằng diaminobenzidine trong dung dịch acid sau đó là oxy hóa bằng osmium tetroxide) đã được thực hiện trực tiếp trên các mẫu cắt siêu mỏng của sụn khí quản chuột nhúng trong glycolmethacrylate tan trong nước. Mucopolysaccharides sulfat hóa trong ma trận sụn đã được định vị như một kết tủa nặng, dày đặc electron. Phương pháp này có thể áp dụng trực tiếp cho các mẫu cắt, vượt qua những khó khăn trong việc thâm nhập, và dường như có độ đặc hiệu cao hơn đối với mucopolysaccharides sulfat hóa so với các kỹ thuật khác đã được đề xuất trước đây để chứng minh cấu trúc vi mô acid mucopolysaccharides.

Từ khóa

#mucopolysaccharides sulfat hóa #diaminobenzidine #osmium tetroxide #sụn khí quản chuột #phương pháp vi mô electron

Tài liệu tham khảo

Bussolati, G. (1971). Histochemical demonstration of sulphate groups by means of diaminobenzidine.Histochem. J. 3, 445–9. Canese, M. G., Castino, F., & Mollo, F. (1971). Osservazioni preliminari sulla membrana plasmatica dei podociti in nefropatie umane con l'impiego del rosso rutenio.Atti VIII Congresso Società Italiana di Microscopia Elettronica. In press. Eisenstein, R., Arsenis, C. &Kuettner, K. E. (1970a). Electron microscopic studies of cartilage matrix using lysozyme as a vital stain.J. Cell Biol. 46, 626–31. Eisenstein, R., Soble, L. W. &Kuettner, K. E. (1970b). Lysozyme in epiphyseal cartilage. III. Effects of protamine, Toluidine Blue and histamine on mouse embryonic cartilage in organ culture.Amer. J. Path. 60, 43–56. Eisenstein, R., Sorgente, N. &Kuettner, K. E. (1971). Organization of extra-cellular matrix in epiphyseal growth plate.Amer. J. Path. 65, 515–34. Goodman, G. C. &Porter, K. R. (1960). Chondrogenesis studies with the electron microscope.J. biophys. biochem. Cytol. 8, 719–60. Graham, R. C. &Karnovsky, M. J. (1966). The early stages of absorption of injected horseradish peroxidase in the proximal tubules of mouse kidney: ultra-structural cytochemistry by a new technique.J. Histochem. Cytochem. 14, 291–302. Karnovsky, M. J. (1965). A formaldehyde-glutaraldehyde fixative of high osmolarity for use in electron microscopy.J. Cell. Biol. 27, 137A. Leduc, E. H. &Bernhard, W. (1962). Water-soluble embedding media for ultra-structural cytochemistry. Digestion with nucleases and proteinases. InThe Interpretation of Ultra-structure (ed. R. J. C. Harris), Vol. 1, pp. 21–45. New York: Academic Press. Luft, J. H. (1961). Improvements in epoxy resin embedding methods.J. Biophys. Biochem. Cytol. 9, 409–14. Luft, J. H. (1965). The fine structure of hyaline cartilage matrix following Ruthenium Red fixation and staining.J. Cell Biol. 27, 61A. Luft, J. H. (1966). Fine structure of capillary and endocapillary layer as revealed by Ruthenium Red.Fed. Proc. 25, 1773–83. Matukas, V. J., Panner, B. J. &Orbison, J. L. (1967). Studies on ultra-structural identification and distribution of protein-polysaccharides in cartilage matrix.J. Cell Biol. 32, 365–77. Meyer, K., Davidson, E., Linker, A. &Hoffman, P. (1956). Acid mucopolysaccharides of connective tissue.Biochim. Biophys. Acta 21, 506–18. Pearse, A. G. E. (1968).Histochemistry: theoretical and applied, 3rd Edn. London: Churchill. Revel, J. P. (1964). A stain for the ultrastructural localization of acid mucopolysaccharides.J. Microscopie 3, 535–54. Reynolds, E. S. (1963). The use of lead citrate at high pH as an electron-opaque stain in electron microscopy.J. Cell Biol. 17, 208–12. Sabatini, D. D., Bensch, K. &Barrnett, R. J. (1963). Cytochemistry and electron microscopy. The preservation of cellular ultrastructure and enzymatic activity by aldehyde fixation.J. Cell Biol. 17, 19–58. Seligman, A. M., Karnovsky, M. J., Wasserkrug, H. L. &Hanker, J. S. (1968). Nondroplet ultrastructural demonstration of cytochrome oxidase activity with a polymerizing osmiophilic reagent, diaminobenzidine (DAB).J. Cell Biol. 38, 1–14.