Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Tác Động Của Các Đồng Phân Butyrate Đến Sự Kích Thích Metallothionein Trong Văn Hóa Hepatocyte Cơ Sở Của Chuột Chũi
Tóm tắt
Natri butyrate (NaB), một acid béo 4 carbon, đã được báo cáo là kích hoạt gen metallothionein (MT) trong một số dòng tế bào ung thư. Do các tác động của NaB phụ thuộc vào loại tế bào được nghiên cứu, nghiên cứu này được thực hiện để xác định xem NaB và các đồng phân của nó có kích thích MT trong các nền văn hóa tế bào gan chuột cống hay không. Các tế bào gan được nuôi cấy trên lớp đơn trong 12 giờ và sau đó được điều trị bằng formate, acetate, propionate (NaP), NaB và acid valeric trong khoảng từ 10 đến 58 giờ. Để kiểm tra sự tương tác của chúng với các tác nhân kích thích MT đã biết, cadmium (Cd), kẽm (Zn), hoặc dexamethasone (Dex) đã được thêm vào một số nền văn hóa. Protein MT trong các tế bào đã được định lượng bằng phương pháp thử nghiệm Cd-hemoglobin; mRNA MT-1 được phân tích bằng hybridization blot miền Bắc với các mồi oligonucleotide và được định lượng bằng phân tích slot-blot. Trong số các acid cacboxylic từ 1 đến 5 carbon, chỉ có NaP (3 carbon) và NaB (4 carbon) gây kích thích MT. NaP và NaB một mình đã tạo ra sự tăng nhẹ về MT từ hai đến bốn lần so với đối chứng, nhưng khi kết hợp với Cd hoặc Dex, một sự gia tăng cộng thêm đã được quan sát. Tuy nhiên, khi kết hợp với Zn, một sự tăng cường hiệp đồng đã được phát hiện. NaB và Zn đã làm tăng protein MT một cách hiệp đồng, nhưng chỉ tạo ra sự gia tăng cộng thêm về mRNA MT, cho thấy sự tham gia của một số sự kiện sau phiên mã trong việc kích thích MT bởi NaB-Zn. Tóm lại, NaP và NaB đã kích thích MT trong các tế bào gan chuột cống bình thường được nuôi cấy, tạo ra sự gia tăng bổ sung về protein MT với Cd và Dex, và sự gia tăng cộng hưởng về protein MT với Zn.
Từ khóa
#Natri butyrate #metallothionein #tế bào gan chuột cống #acid béo #tác nhân kích thíchTài liệu tham khảo
Andersen, R. D.; Birren, B. W.; Taplitz, S. J., et al. Rat metallothionein-1 structural gene and three pseudogenes, one of which contain 5’-regulatory sequence. Mol. Cell. Biol. 6:302–314; 1986.
Andrews, G. K.; Adamson, E. D. Butyrate selectively activates the metallothionein gene in teratocarcinoma cells and induces hypersensitivity to metal induction. Nucleic Acids Res. 15:5461–5475; 1987.
Andrews, G. K. Regulation of metallothionein gene expression. Recent Prog. Food Nutr. Sci. 14:193–258; 1990.
Berry, M. N.; Friend, D. S. High-yield preparation of isolated rat liver parenchymal cells. J. Cell Biol. 43:506–520; 1969.
Birren, B. W.; Herschman, H. R. Regulation of the rat metallothionein-I gene by sodium butyrate. Nucleic Acids Res. 14:853–867; 1986.
Birren, B. W.; Taplitz, S. J.; Herschman, H. R. Butyrate-induced changes in nuclease sensitivity of chromatin cannot be correlated with transcriptional activation. Mol. Cell. Biol. 7:3863–3870; 1987.
Bissell, D. M.; Guzelian, P. S. Phenotypic stability of adult rat hepatocytes in primary monolayer culture. Ann. NY Acad. Sci. 349:85–98; 1980.
Bracken, W. M.; Klaassen, C. D. Induction of metallothionein in rat primary hepatocyte cultures: evidence for direct and indirect induction. J. Toxicol. Environ. Health 22:163–174; 1987.
Bradford, M. M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal. Biochem. 72:248–254; 1976.
Cherian, M. G., Nordberg, M. Cellular adaption in metal toxicology and metallothionein. Toxicology 28:1–15; 1983.
Chomczynski, P.; Sacchi, N. Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction. Anal. Biochem. 162:156–159; 1987.
Collins, M. L.; Hunsaker, W. R. Improved hybridization assays employing tailed oligonucleotide probes: a direct comparison with 5’-end-labeled oligonucleotide probes and nick-translated plasmid probes. Anal. Biochem. 151:211–224; 1985.
Cousins, R. J. Absorption, transport, and hepatic metabolism of copper and zinc: special reference to metallothionein and ceruloplasmin. Physiol. Rev. 65:238–309; 1985.
Dunn, M. A.; Blalock, T. L.; Cousins, R. J. Metallothionein. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 185:107–119; 1987.
Eaton, D. L.; Toal, B. F. Evaluation of the Cd/hemoglobin affinity assay for the rapid determination of metallothionein in biological tissues. Toxicol. Appl. Pharmacol. 66:134–142; 1982.
Engelmann, G. L.; Staecker, J. L.; Richardson, A. G. Effect of sodium butyrate on primary cultures of adult rat hepatocytes. In Vitro Cell. Dev. Biol. 23:86–92; 1987.
Guguen-Guillouzo, C.; Guillouzo, A. Modulation of functional activities in cultured rat hepatocytes. Mol. Cell. Biochem. 53/54:35–56; 1983.
Kreamer, B. L.; Staecker, J. L.; Sawada, N., et al. Use of a low-speed, iso-density percoll centrifugation method to increase the viability of isolated rat hepatocyte preparations. In Vitro Cell. Dev. Biol. 22:201–211; 1986.
Kruh, J. Effects of sodium butyrate, a new pharmacological agent, on cells in culture. Mol. Cell. Biochem. 42:65–82; 1982.
Lehrach, H.; Diamond, D.; Wozney, J. M., et al. RNA molecular weight determination by gel electrophoresis under denaturing conditions, a critical reexamination. Biochemistry 16:4743–4751; 1977.
Liu, J.; Kershaw, W. C.; Klaassen, C. D. Rat primary hepatocyte cultures are a good model for examining metallothionein-induced tolerance to cadmium toxicity. In Vitro Cell. Dev. Biol. 26:75–79; 1990.
Nakamura, T.; Ichihara, A. Control of growth and expression of differentiated functions of mature hepatocytes in primary culture. Cell Struct. Funct. 10:1–16; 1985.
Prasad, K. N.; Sinha, P. K. Effect of sodium butyrate on mammalian cells in culture: a review. In Vitro 12:125–132; 1976.
Prasad, K. N. Butyric acid: a small fatty acid with diverse biological functions. Life Sci. 27:1351–1358; 1980.
Sambrook, J.; Fritsch, E. F.; Maniatis, T., editors. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor, NY: Cold Spring Harbor Laboratory Press; 1989:7.3–7.87.
Staecker, J. L.; Sawada, N.; Pitot, H. C. Stimulation of DNA synthesis in primary cultures of adult rat hepatocytes by sodium butyrate. Biochem. Biophys. Res. Commun. 147:78–85; 1987.
Staecker, J. L.; Sattler, C. A.; Pitot, H. C. Sodium butyrate preserves aspects of the differentiated phenotype of normal adult rat hepatocytes in culture. J. Cell. Physiol. 135:356–376; 1988.
Steele, R. G. D.; Torrie, J. H. Principles and procedures of statistics. New York: McGraw-Hill Book Co.; 1960:99–160.
Thomas, D. J.; Angle, C. R.; Swanson, S. A., et al. Effect of sodium butyrate on metallothionein induction and cadmium cytotoxicity in ROS 17/2.8 ceUs. Toxicology 66:35–46; 1991.
Thome, A. W.; Kmiciek, D.; Mitchelson, K., et al. Patterns of histone acetylation. Eur. J. Biochem. 193:701–713; 1990.
Waalkes, M. P.; Wilson, M. J. Enhancement of cadmium-induced metallothionein synthesis in cultured TRL 1215 cells by butyric acid pretreatment. Toxicol. Lett. 32:289–294; 1986.
Webb, M. Role of metallothionein in cadmium metabolism. In: Foulkes, E. C., ed. Cadmium (Handbook of experimental pharmacology, vol. 80). Berlin, Heidelberg: Springer-Verlag Press; 1986:281–328.