Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Tác động của kích thích điện đối với sự phiên mã IGF-1 qua các kênh canxi loại L trong các tế bào Müller võng mạc được nuôi cấy
Tóm tắt
Mục tiêu của nghiên cứu này là điều tra tác động của kích thích điện (ES) đối với sự phiên mã yếu tố tăng trưởng giống insulin 1 (IGF-1) trong các tế bào Müller võng mạc nuôi cấy. Các tế bào Müller được tách ra từ võng mạc chuột. Kích thích điện đã được áp dụng cho các tế bào Müller ở lần chuyến giao thứ 1 với các xung hai pha (thời gian, 1 ms; tần số, 20 Hz; dòng điện, 0–10 mA) trong 30 phút. Mức mRNA của IGF-1 được xác định bằng phản ứng chuỗi polymerase phiên mã ngược (RT-PCR) ngay lập tức đến 2 giờ sau khi kích thích điện. Sự thay đổi nồng độ canxi nội bào ([Ca2+]) do kích thích điện gây ra được giám sát bằng hình ảnh Ca2+ với Fura 2-AM. Hình ảnh Ca2+ và RT-PCR được thực hiện có và không có sự áp dụng 1 μM nifedipine, một chất chẹn kênh canxi loại L. Mức mRNA của IGF-1 đã tăng lên đáng kể (P < 0.05) khoảng 1.3 lần ngay sau khi kích thích điện 10 mA. [Ca2+] bắt đầu tăng lên ngay sau khi bắt đầu kích thích điện, đạt mức tối đa khoảng 1.8 lần, và tiếp tục tăng cho đến khoảng 20 phút sau khi kích thích điện. Sự phiên mã IGF-1 và sự xâm nhập Ca2+ đã bị nifedipine ức chế. Những kết quả này chỉ ra rằng sự gia tăng phiên mã IGF-1 bởi kích thích điện trong các tế bào Müller nuôi cấy phần lớn phụ thuộc vào sự xâm nhập Ca2+ qua các kênh canxi loại L.
Từ khóa
#kích thích điện #yếu tố tăng trưởng giống insulin 1 (IGF-1) #tế bào Müller #canxi loại L #RT-PCRTài liệu tham khảo
Morimoto T, Miyoshi T, Matsuda S, Tano Y, Fujikado T, Fukuda Y. Transcorneal electrical stimulation rescues axotomized retinal ganglion cells by activating endogenous retinal IGF-1 system. Invest Ophthalmol Vis Sci 2005;46:2147–2155.
Fujikado T, Morimoto T, Matsushita K, Shimojo H, Okawa Y, Tano Y. Effect of transcorneal electrical stimulation in patients with nonarteritic ischemic optic neuropathy or traumatic optic neuropathy. Jpn J Ophthalmol 2006;50:266–273.
Porter JT, McCarthy KD. Hippocampal astrocytes in situ respond to glutamate released from synaptic terminals. J Neurosci 1996;16:5073–5081.
Koyama S, Haruyama T, Kobatake E, Aizawa M. Electrically induced NGF production by astroglial cells. Nat Biotechnol 1997;15:164–166.
Yanagida Y, Mizuno A, Motegi T, Kobatake E, Aizawa M. Electrically stimulated induction of hsp70 gene expression in mouse astroglia and fibroblast cells. J Biotech 2000;79:53–61.
Schipke CG, Boucsein C, Ohlemeyer C, Kirchhoff F, Kettenmann H. Astrocyte Ca2+ waves trigger responses in microglial cells in brain slices. FASEB J 2002;16:255–257.
Balkowiec A, Katz DM. Cellular mechanisms regulating activitydependent release of native brain-derived neurotrophic factor from hippocampal neurons. J Neurosci 2002;22:10399–10407.
Simard M, Arcuino G, Takano T, Liu QS, Nedergaard M. Signaling at the gliovascular interface. J Neurosci 2003;23:9254–9262.
Bowser DN, Khakh BS. ATP excites interneurons and astrocytes to increase synaptic inhibition in neuronal networks. J Neurosci 2004;24:8606–8620.
Cao W, Wen R, Li F, Cheng T, Steinberg RH. Induction of basic fibroblast growth factor mRNA by basic fibroblast growth factor in Müller cells. Invest Ophthalmol Vis Sci 1997;38:1358–1366.
Li F, Cao W, Steinberg RH, LaVail MM. Basic FGF-induced down-regulation of IGF-1 mRNA in cultured rat Müller cells. Exp Eye Res 1999;68:19–27.
Taylor S, Srinivasan B, Wordinger RJ, Roque RS. Glutamate stimulates neurotrophin expression in cultured Müller cells. Brain Res Mol Brain Res 2003;111:189–197.
King JL, Guidry C. Insulin-like growth factor binding proteins modulate Müller cell responses to insulin-like growth factors. Invest Ophthalmol Vis Sci 2004;45:2848–2855.
Seki M, Tanaka T, Sakai Y, et al. Müller cells as a source of brainderived neurotrophic factor in the retina: noradrenaline upregulates brain-derived neurotrophic factor levels in cultured rat Müller cells. Neurochem Res 2005;30:1163–1170.
Roque RS, Caldwell RB, Behzadian MA. Cultured Müller cells have high levels of epidermal growth factor receptors. Invest Ophthalmol Vis Sci 1992;33:2587–2595.
Johnson MR, Wang K, Smith JB, Heslin MJ, Diasio RB. Quantitation of dihydropyrimidine dehydrogenase expression by real-time reverse transcription polymerase chain reaction. Analytical Biochem 2000;278:175–184.
Xu HP, Zhao JW, Yang XL. Expression of voltage-dependent calcium channel subunits in the rat retina. Neurosci Lett 2002;329:297–300.
Bourinet E, Mangoni ME, Nargeot J. Dissecting the functional role of different isoforms of the L-type Ca2+ channel. J Clin Invest 2004;113:1382–1384.
Hicks D, Courtois Y. The growth and behaviour of rat retinal Müller cells in vitro. 1. An improved method for isolation and culture. Exp Eye Res 1990;51:119–129.
Hauck SM, Suppmann S, Ueffing M. Proteomic profiling of primary retinal Müller glia cells reveals a shift in expression patterns upon adaptation to in vitro conditions. Glia 2003;44:251–263.
Miller RJ. Rocking and rolling with Ca2+ channel. Trends Neurosci 2001;24:445–449.
Heidinger V, Hicks D, Sahel J, Dreyfus H. Ability of retinal Müller glial cells to protect neurons against excitotoxicity in vitro depends upon maturation and neuron-glial interactions. Glia 1999;25:229–239.