Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Giảm biểu hiện yếu tố mô (TF) bằng RNA can thiệp kích thích quá trình apoptosis và suy giảm khả năng sống sót của tế bào nội mô và tế bào u ác tính
Tóm tắt
Yếu tố mô (TF) đã được liên kết với các biến chứng huyết khối xảy ra trong quá trình thải ghép mạch và có thể góp phần vào sự tăng sinh nội mạc trong bệnh mạch ghép mãn tính. Do đó, việc giảm biểu hiện TF ở nội mô sau ghép có thể có giá trị điều trị. RNA can thiệp trung gian lentivirus đã được sử dụng trên các tế bào nội mô chính để nghiên cứu tác động của nó đối với biểu hiện protein TF và hoạt tính chức năng. Việc biểu hiện một RNA si RNA đặc hiệu với TF cùng với protein huỳnh quang xanh như một gen báo cáo (siRNATF-GFP) đã dẫn đến việc giảm 42 ± 3.9% TF bề mặt ở các tế bào nội mô so với các tế bào biểu hiện một trình tự siRNATF trộn lẫn (P = 0.025). Hàm lượng TF trong lysat tế bào nội mô đã giảm từ 6.85 ± 1.99 ng xuống 3.05 ± 0.82 ng (P = 0.006). Hoạt hóa yếu tố X (FX) không bị suy giảm trên bề mặt tế bào nội mô đỉnh. Ma trận dưới nội mô của các tế bào nội mô có biểu hiện TF thấp cho thấy hoạt tính TF giảm đáng kể so với các tế bào không được chuyển giao hoặc với các tế bào mang vector rỗng. Các tế bào nội mô biểu hiện siRNATF-GFP cho thấy sự giảm biểu hiện gen báo cáo (GFP) và mật độ tế bào cùng với hình thái bị thay đổi. Việc chuyển giao tế bào đối chứng có biểu hiện TF cao (tế bào J82) hoặc thấp (tế bào MiaPaCa-2) với các oligonucleotide siRNATF đã gây ra quá trình apoptosis của tế bào J82 nhưng không gây ra ở tế bào MiaPaCa-2. Do đó, việc sử dụng RNA can thiệp trung gian lentivirus giảm biểu hiện TF của các tế bào nội mô hoạt hóa nhưng không ảnh hưởng đến hoạt hóa FX qua TF/FVIIa trên bề mặt đỉnh. Tuy nhiên, việc giảm biểu hiện này vẫn có những tác động tiêu cực đáng kể đến khả năng sống sót của các tế bào nội mô và các tế bào đối chứng biểu hiện TF. Những phát hiện này ngụ ý rằng một mức độ nhất định của TF là cần thiết cho việc duy trì sự sống sót và sự phát triển của nội mô cũng như các tế bào u ác tính biểu hiện TF.
Từ khóa
Tài liệu tham khảo
Amarzguioui M, Peng Q, Wiiger MT, Vasovic V, Babaie E, Holen T, et al (2006) Ex vivo and in vivo delivery of anti-tissue factor short interfering RNA inhibits mouse pulmonary metastasis of B16 melanoma cells. Clin Cancer Res 12:4055–4061
Belting M, Dorrell MI, Sandgren S, Aguilar E, Ahamed J, Dorfleutner A, et al (2004) Regulation of angiogenesis by tissue factor cytoplasmic domain signaling. Nat Med 10:502–509
Bevilacqua MP, Pober JS, Majeau GR, Fiers W, Cotran RS, Gimbrone MAJ (1986) Recombinant tumor necrosis factor induces procoagulant activity in cultured human vascular endothelium: characterization and comparison with the actions of interleukin 1. Proc Natl Acad Sci USA 83:4533–4537
Bokarewa MI, Tarkowski A (2001) Thrombin generation and mortality during Staphylococcus aureus sepsis. Microb Pathog 30:247–252
Bokarewa MI, Morrissey JH, Tarkowski A (2002) Tissue factor as a proinflammatory agent. Arthritis Res 4:190–195
Bromberg ME, Sundaram R, Homer RJ, Garen A, Konigsberg WH (1999) Role of tissue factor in metastasis: functions of the cytoplasmic and extracellular domains of the molecule. Thromb Haemost 82:88–92
Carmeliet P, Mackman N, Moons L, Luther T, Gressens P, Van Vlaenderen I, et al (1996) Role of tissue factor in embryonic blood vessel development. Nature 383:73–75
Colucci M, Balconi G, Lorenzet R, Pietra A, Locati D, Donati MB, et al (1983) Cultured human endothelial cells generate tissue factor in response to endotoxin. J Clin Invest 71:1893–1896
Contrino J, Hair G, Kreutzer DL, Rickles FR (1996) In situ detection of tissue factor in vascular endothelial cells: correlation with the malignant phenotype of human breast disease. Nat Med 2:209–215
Ehrnfelt C, He Z, Holgersson J (2005) No role of alpha-Gal in human monocyte-endothelial cell interactions in vitro. Scand J Immunol 62:445–452
Golino P, Ragni M, Cirillo P, Avvedimento VE, Feliciello A, Esposito N, et al (1996) Effects of tissue factor induced by oxygen free radicals on coronary flow during reperfusion. Nat Med 2:35–40
He Z, Ehrnfelt C, Kumagai-Braesch M, Islam KB, Holgersson J (2004) Aberrant expression of alpha-Gal on primary human endothelium does not confer susceptibility to NK cell cytotoxicity or increased NK cell adhesion. Eur J Immunol 34:1185–1195
Holen T, Amarzguioui M, Wiiger MT, Babaie E, Prydz H (2002) Positional effects of short interfering RNAs targeting the human coagulation trigger tissue factor. Nucleic Acids Res 30:1757–1766
Jang Y, Guzman LA, Lincoff AM, Gottsauner-Wolf M, Forudi F, Hart CE, et al (1995) Influence of blockade at specific levels of the coagulation cascade on restenosis in a rabbit atherosclerotic femoral artery injury model. Circulation 92:3041–3050
Ketting RF, Haverkamp TH, Luenen HG van, Plasterk RH (1999) Mut-7 of C. elegans, required for transposon silencing and RNA interference, is a homolog of Werner syndrome helicase and RNaseD. Cell 99:133–141
Nitori N, Ino Y, Nakanishi Y, Yamada T, Honda K, Yanagihara K, et al (2005) Prognostic significance of tissue factor in pancreatic ductal adenocarcinoma. Clin Cancer Res 11:2531–2539
Osterholm C, Qi Z, Ekberg J, Veress B, Pyke C, Hedner U, et al (2001) Initial inhibition of tissue factor signalling reduces chronic vascular changes in isogenic rat aortic transplants. Am J Transplant 1:29–37
Ott I, Fischer EG, Miyagi Y, Mueller BM, Ruf W (1998) A role for tissue factor in cell adhesion and migration mediated by interaction with actin-binding protein 280. J Cell Biol 140:1241–1253
Parry GC, Erlich JH, Carmeliet P, Luther T, Mackman N (1998) Low levels of tissue factor are compatible with development and hemostasis in mice. J Clin Invest 101:560–569
Pawlinski R, Fernandes A, Kehrle B, Pedersen B, Parry G, Erlich J, et al (2002) Tissue factor deficiency causes cardiac fibrosis and left ventricular dysfunction. Proc Natl Acad Sci USA 99:15333–15338
Pyo RT, Sato Y, Mackman N, Taubman MB (2004) Mice deficient in tissue factor demonstrate attenuated intimal hyperplasia in response to vascular injury and decreased smooth muscle cell migration. Thromb Haemost 92:451–458
Ryan J, Brett J, Tijburg P, Bach RR, Kisiel W, Stern D (1992) Tumor necrosis factor-induced endothelial tissue factor is associated with subendothelial matrix vesicles but is not expressed on the apical surface. Blood 80:966–974
Sakai T, Lund-Hansen T, Paborsky L, Pedersen AH, Kisiel W (1989) Binding of human factors VII and VIIa to a human bladder carcinoma cell line (J82). Implications for the initiation of the extrinsic pathway of blood coagulation. J Biol Chem 264:9980–9988
Sato Y, Asada Y, Marutsuka K, Hatakeyama K, Kamikubo Y, Sumiyoshi A (1997) Tissue factor pathway inhibitor inhibits aortic smooth muscle cell migration induced by tissue factor/factor VIIa complex. Thromb Haemost 78:1138–1141
Sorensen BB, Persson E, Freskgard PO, Kjalke M, Ezban M, Williams T, et al (1997) Incorporation of an active site inhibitor in factor VIIa alters the affinity for tissue factor. J Biol Chem 272:11863–11868
Toomey JR, Kratzer KE, Lasky NM, Stanton JJ, Broze GJ Jr (1996) Targeted disruption of the murine tissue factor gene results in embryonic lethality. Blood 88:1583–1587
Waterhouse PM, Wang MB, Lough T (2001) Gene silencing as an adaptive defence against viruses. Nature 411:834–842
Yan SF, Zou YS, Gao Y, Zhai C, Mackman N, Lee SL, et al (1998) Tissue factor transcription driven by Egr-1 is a critical mechanism of murine pulmonary fibrin deposition in hypoxia. Proc Natl Acad Sci USA 95:8298–8303
Yang Y, Loscalzo J (2000) Regulation of tissue factor expression in human microvascular endothelial cells by nitric oxide. Circulation 101:2144–2148
Yu JL, May L, Lhotak V, Shahrzad S, Shirasawa S, Weitz JI, et al (2005) Oncogenic events regulate tissue factor expression in colorectal cancer cells: implications for tumor progression and angiogenesis. Blood 105:1734–1741