Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Giảm biểu hiện RNA không mã hóa dài H19 thúc đẩy sự tăng sinh tế bào P19CL6 và ức chế quá trình apoptosis trong giai đoạn muộn của biệt hóa tim qua Sox6 được điều chỉnh bởi miR-19b
Tóm tắt
Việc điều tiết quá trình biệt hóa tim nhằm duy trì sự phát triển và chức năng tim bình thường là rất quan trọng. Hiện tại, chức năng sinh học của H19 trong quá trình biệt hóa tim vẫn chưa hoàn toàn rõ ràng. Mục tiêu của nghiên cứu này là khám phá tác động chức năng của H19 trong quá trình biệt hóa tim. Mức độ biểu hiện của các dấu ấn đặc trưng cho tim sớm Nkx-2.5 và GATA4, cùng với các gen protein co bóp tim α-MHC và MLC-2v đã được xác định bằng qRT-PCR và phương pháp western blot. Mức độ của lncRNA H19 và miR-19b được phát hiện bằng qRT-PCR. Chúng tôi đã dự đoán trình tự liên kết của H19 và miR-19b bằng phần mềm trực tuyến starBase v2.0 và TargetScan. Các chức năng sinh học của H19 và Sox6 được đánh giá qua bộ kit CCK-8, xét nghiệm chu kỳ tế bào, xét nghiệm apoptosis và hoạt động của caspase-3. Mức độ biểu hiện của α-MHC, MLC-2v và H19 tăng lên, trong khi miR-19b giảm đáng kể ở tế bào P19CL6 của chuột trong giai đoạn muộn của quá trình biệt hóa tim. Phân tích chức năng sinh học cho thấy việc giảm biểu hiện H19 thúc đẩy sự tăng sinh tế bào và ức chế quá trình apoptosis. H19 ức chế biểu hiện miR-19b, và miR-19b nhắm đến Sox6, điều này ức chế sự tăng sinh tế bào và thúc đẩy apoptosis ở tế bào P19CL6 trong quá trình biệt hóa tim vào giai đoạn muộn. Quan trọng hơn, việc tăng cường biểu hiện Sox6 có thể đảo ngược những tác động tích cực của việc giảm H19 đối với tế bào P19CL6. Việc giảm biểu hiện H19 đã thúc đẩy sự tăng sinh tế bào và ức chế apoptosis trong giai đoạn muộn của quá trình biệt hóa tim bằng cách điều chỉnh vai trò tiêu cực của miR-19b trong biểu hiện Sox6, từ đó gợi ý rằng việc điều chỉnh biểu hiện H19 có thể là một chiến lược tiềm năng cho bệnh tim.
Từ khóa
#H19 #miR-19b #Sox6 #biệt hóa tim #P19CL6 #tăng sinh tế bào #apoptosisTài liệu tham khảo
Nascone N, Mercola M. An inductive role for the endoderm in Xenopus cardiogenesis. Development. 1995;121:515–23.
Satou Y, Satoh N. Gene regulatory networks for the development and evolution of the chordate heart. Genes Dev. 2006;20:2634–8.
Olson EN, Srivastava D. Molecular pathways controlling heart development. Science. 1996;272:671–6.
Monzen K, Shiojima I, Hiroi Y, Kudoh S, Oka T, Takimoto E, Hayashi D, Hosoda T, Habara-Ohkubo A, Nakaoka T, Fujita T, Yazaki Y, Komuro I. Bone morphogenetic proteins induce cardiomyocyte differentiation through the mitogen-activated protein kinase kinase kinase TAK1 and cardiac transcription factors Csx/Nkx-2.5 and GATA-4. Mol Cell Biol. 1999;19:7096–105.
Young DA, Gavrilov S, Pennington CJ, Nuttall RK, Edwards DR, Kitsis RN, Clark IM. Expression of metalloproteinases and inhibitors in the differentiation of P19CL6 cells into cardiac myocytes. Biochem Biophys Res Commun. 2004;322:759–65.
Habara-Ohkubo A. Differentiation of beating cardiac muscle cells from a derivative of P19 embryonal carcinoma cells. Cell Struct Funct. 1996;21:101–10.
Yang F, Xue X, Bi J, Zheng L, Zhi K, Gu Y, Fang G. Long noncoding RNA CCAT1, which could be activated by c-Myc, promotes the progression of gastric carcinoma. J Cancer Res Clin Oncol. 2013;139:437–45.
Yuan JH, Yang F, Wang F, Ma JZ, Guo YJ, Tao QF, Liu F, Pan W, Wang TT, Zhou CC, Wang SB, Wang YZ, Yang Y, Yang N, Zhou WP, Yang GS, Sun SH. A long noncoding RNA activated by TGF-beta promotes the invasion-metastasis cascade in hepatocellular carcinoma. Cancer Cell. 2014;25:666–81.
Gu M, Zheng A, Tu W, Zhao J, Li L, Li M, Han S, Hu X, Zhu J, Pan Y, Xu J, Yu Z. Circulating LncRNAs as novel, non-invasive biomarkers for prenatal detection of fetal congenital heart defects. Cell Physiol Biochem. 2016;38:1459–71.
Hurst LD, Smith NG. Molecular evolutionary evidence that H19 mRNA is functional. Trends Genet. 1999;15:134–5.
Gabory A, Ripoche MA, Le Digarcher A, Watrin F, Ziyyat A, Forne T, Jammes H, Ainscough JF, Surani MA, Journot L, Dandolo L. H19 acts as a trans regulator of the imprinted gene network controlling growth in mice. Development. 2009;136:3413–21.
Eulalio A, Mano M, Dal Ferro M, Zentilin L, Sinagra G, Zacchigna S, Giacca M. Functional screening identifies miRNAs inducing cardiac regeneration. Nature. 2012;492:376–81.
Boggs RM, Moody JA, Long CR, Tsai KL, Murphy KE. Identification, amplification and characterization of miR-17-92 from canine tissue. Gene. 2007;404:25–30.
Qin DN, Qian L, Hu DL, Yu ZB, Han SP, Zhu C, Wang X, Hu X. Effects of miR-19b overexpression on proliferation, differentiation, apoptosis and Wnt/beta-catenin signaling pathway in P19 cell model of cardiac differentiation in vitro. Cell Biochem Biophys. 2013;66:709–22.
Wang S, Wu X, Liu Y, Yuan J, Yang F, Huang J, Meng Q, Zhou C, Liu F, Ma J, Sun S, Zheng J, Wang F. Long noncoding RNA H19 inhibits the proliferation of fetal liver cells and the Wnt signaling pathway. FEBS Lett. 2016;590:559–70.
Yin Y, Wang H, Liu K, Wang F, Ye X, Liu M, Xiang R, Liu N, Liu L. Knockdown of H19 enhances differentiation capacity to epidermis of parthenogenetic embryonic stem cells. Curr Mol Med. 2014;14:737–48.
Ragina NP, Schlosser K, Knott JG, Senagore PK, Swiatek PJ, Chang EA, Fakhouri WD, Schutte BC, Kiupel M, Cibelli JB. Downregulation of H19 improves the differentiation potential of mouse parthenogenetic embryonic stem cells. Stem Cells Dev. 2012;21:1134–44.
Thum T, Catalucci D, Bauersachs J. MicroRNAs: novel regulators in cardiac development and disease. Cardiovasc Res. 2008;79:562–70.
Sluijter JP, van Mil A, van Vliet P, Metz CH, Liu J, Doevendans PA, Goumans MJ. MicroRNA-1 and -499 regulate differentiation and proliferation in human-derived cardiomyocyte progenitor cells. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2010;30:859–68.
Cai B, Li J, Wang J, Luo X, Ai J, Liu Y, Wang N, Liang H, Zhang M, Chen N, Wang G, Xing S, Zhou X, Yang B, Wang X, Lu Y. microRNA-124 regulates cardiomyocyte differentiation of bone marrow-derived mesenchymal stem cells via targeting STAT3 signaling. Stem Cells. 2012;30:1746–55.
Liang D, Zhen L, Yuan T, Huang J, Deng F, Wuyahan, Zhang H, Pan L, Liu Y, The E, Yu Z, Zhu W, Zhang Y, Li L, Peng L, Li J, Chen YH. miR-10a regulates proliferation of human cardiomyocyte progenitor cells by targeting GATA6. PLoS One. 2014;9:e103097.
An CI, Dong Y, Hagiwara N. Genome-wide mapping of Sox6 binding sites in skeletal muscle reveals both direct and indirect regulation of muscle terminal differentiation by Sox6. BMC Dev Biol. 2011;11:59.
Zhang Y, Yang TL, Li X, Guo Y. Functional analyses reveal the essential role of SOX6 and RUNX2 in the communication of chondrocyte and osteoblast. Osteoporos Int. 2015;26:553–61.
Guo X, Yang M, Gu H, Zhao J, Zou L. Decreased expression of SOX6 confers a poor prognosis in hepatocellular carcinoma. Cancer Epidemiol. 2013;37:732–6.
Li H, Zheng D, Zhang B, Liu L, Ou J, Chen W, Xiong S, Gu Y, Yang J. Mir-208 promotes cell proliferation by repressing SOX6 expression in human esophageal squamous cell carcinoma. J Transl Med. 2014;12:196.
Qin YR, Tang H, Xie F, Liu H, Zhu Y, Ai J, Chen L, Li Y, Kwong DL, Fu L, Guan XY. Characterization of tumor-suppressive function of SOX6 in human esophageal squamous cell carcinoma. Clin Cancer Res. 2011;17:46–55.
Li X, Wang J, Jia Z, Cui Q, Zhang C, Wang W, Chen P, Ma K, Zhou C. MiR-499 regulates cell proliferation and apoptosis during late-stage cardiac differentiation via Sox6 and cyclin D1. PLoS ONE. 2013;8:e74504.
Ohta S, Misawa A, Lefebvre V, Okano H, Kawakami Y, Toda M. Sox6 up-regulation by macrophage migration inhibitory factor promotes survival and maintenance of mouse neural stem/progenitor cells. PLoS ONE. 2013;8:e74315.